吴红霞
- 作品数：19 被引量：9H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点实验室开放基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 伪狂犬病病毒在小鼠原代神经细胞中潜伏感染模型的建立
- 2024年
- 缺少PRV良好的潜伏感染模型已成为研究其潜伏感染机制的障碍。为建立PRV潜伏感染的体外细胞模型,本研究通过分离新生鼠背根神经节(DRG)获取神经细胞,并利用间接免疫荧光试验(IFA)对其进行鉴定,获得了DRG中的神经细胞。采用重组报告病毒r PRV-EGFP感染神经细胞,同时添加阿昔洛韦(ACV)抑制病毒复制以建立潜伏感染,并采用棋盘法对病毒感染剂量和ACV浓度进行优化,结果显示,感染复数(MOI)为0.001,ACV浓度为0.5 mmol/L,病毒能够在神经细胞中稳定建立潜伏感染。采用荧光定量RT-PCR、病毒滴度测定、药物刺激再激活的方法对潜伏感染模型鉴定,结果显示,潜伏感染时病毒不能复制,且不产生感染性病毒粒子;而经LY294002(PI3K抑制剂)诱导病毒再激活后,病毒大量复制并产生感染性病毒粒子。本研究首次利用小鼠原代神经细胞建立了PRV的潜伏感染模型,该模型的建立为PRV潜伏感染机制的研究奠定了基础。
- 向广韬吴红霞王异民周末王亚林王翌尹航仇华吉孙元
- 关键词：伪狂犬病毒再激活
- 表达DsRed和NanoLuc双报告基因的重组伪狂犬病病毒的构建与鉴定
- CRISPR/Cas9是几年前出现的一种由小的引导RNA(single guide RNA,sgRNA)介导的Cas9核酸酶对靶基因进行特异性切割的基因编辑技术,该技术被广泛应用于重组DNA病毒(如疱疹病毒和慢病毒)的构...
- 吴红霞向广韬周末孙元仇华吉
- 关键词：伪狂犬病病毒报告基因
- 杂交瘤细胞株McAb 1H2及兔出血症RHDVa型病毒单克隆抗体
- 杂交瘤细胞株McAb 1H2及兔出血症RHDVa型病毒单克隆抗体，它涉及一株杂交瘤细胞株及其分泌的单克隆抗体。它解决了目前没有能够单独识别RHDV2型病毒或RHDVa型病毒的单克隆抗体的问题。杂交瘤细胞株McAb 1H2...
- 刘家森曲连东姜骞郭东春刘大飞刘春国李志杰仇铮田进吴红霞刘明
- α疱疹病毒的神经传导——轴突上的“穿梭”被引量：1
- 2019年
- α疱疹病毒经过长期的进化与宿主形成了良好的相互适应关系。其中部分α疱疹病毒具有典型的嗜神经特性,受到广泛的关注和深入的研究。嗜神经性α疱疹病毒能突破宿主屏障而感染神经元,并在其胞体内大量繁殖进而完成进一步的扩散或在胞体中建立潜伏感染。病毒无论是感染神经元还是在进一步扩散的过程中都会经历沿轴突或树突的传导过程,所以此过程是病毒生命周期中不可或缺的一部分,同时也是影响病毒入侵神经系统的关键因素。对嗜神经性α疱疹病毒在神经元内传导过程的研究不仅能深入地了解病毒,而且还能针对性地研发相应的疫苗或靶向性治疗药物,同时还可利用其神经嗜性将病毒作为解析神经环路的有力工具。文中主要对α疱疹病毒在轴突中的传导机制进行了综述,并提出病毒在轴突中传导的研究发展方向和应用价值,可为防控α疱疹病毒感染提供参考。
- 祁寒松吴红霞仇华吉孙元
- 关键词：神经元轴突
- 嗜神经性疱疹病毒:神经科学研究的有力工具被引量：1
- 2023年
- 病毒是研究现代神经科学的有力工具。对神经元的连接方式及功能研究大都是利用重组病毒完成的,嗜神经性疱疹病毒便是其中一种重要工具。随着基因工程学以及分子生物学技术的不断发展,多种嗜神经性疱疹病毒被改造为不同的重组病毒工具应用于神经科学研究。本文基于几种常见且应用较为广泛的嗜神经性疱疹病毒作为神经传导示踪工具、治疗神经性疾病的病毒载体和溶瘤病毒治疗神经肿瘤等应用进行阐述及讨论,为进一步开发嗜神经性疱疹病毒的功能提供参考。
- 李明智潘力吴红霞仇华吉王异民孙元
- 关键词：神经环路
- 猫疱疹病毒Ⅰ型US3基因剪接异构体的鉴定被引量：1
- 2017年
- 为鉴定猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)US3基因的编码产物,本研究以提取FHV-1感染细胞的总RNA为模板,通过RT-PCR方法扩增US3基因转录产物,测序结果显示除了全长US3基因(1 056 bp)外,还出现了一个825 bp的片段(US3-X1)。该片段是由全长US3基因在226 bp^458 bp位置发生了自我剪接,导致234 bp DNA缺失而产生,但ORF并没有改变。此外,通过重叠延伸PCR将US3基因226 bp处碱基"A"突变为"G"(m US3),改变自我剪接位点。将全长US3基因、m US3和US3-X1基因分别克隆至p3×Flag-CMV-10中,转染F81细胞,经western blot检测表明FHV-1 US3可以表达两种不同分子量的异构蛋白,大小约为45 ku和50 ku。这种US3基因的剪接异构体现象在猪伪狂犬病毒和人单纯疱疹病毒中已有报道,而FHV-1 US3基因的剪接异构体的鉴定尚属首次。该研究结果为进一步研究FHV-1 US3异构体蛋白的功能奠定了基础。
- 孙雪田进刘大飞吴红霞祖少坡曲连东
- 关键词：剪接异构体
- 伪狂犬病病毒感染小鼠的背根神经节后天然免疫相关转录组测序及分析
- 2022年
- 伪狂犬病病毒(PRV)的天然宿主是猪,但是能够感染多种哺乳动物。PRV是一种嗜神经性α疱疹病毒,小鼠感染PRV后会产生严重的神经症状和神经炎症。为了探究小鼠感染PRV后其背根神经节(DRG)的天然免疫应答情况,本研究将PRV TJ株以10^(6)pfu剂量接种小鼠,在濒死期剖杀小鼠,取其DRG进行转录组测序,并使用DESeq2软件对测序结果分析,结果显示,与对照组相比,PRV感染小鼠的DRG内共有6 502条基因的转录水平发生改变,其中转录水平升高的基因有3 703条,降低的基因有2 799条(差异倍数>2,且P≤0.05)。利用clusterProfiler R软件对发生差异转录的基因进行了KEGG分析,结果显示,转录水平发生差异的基因参与细胞内20种信号通路途径,其中12条信号通路与天然免疫反应有关,提示PRV感染小鼠后会激活DRG内广泛的天然免疫反应。差异转录基因数量最多的5条天然免疫信号通路分别是丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、核苷酸结合寡聚化结构域样受体(NLR)信号通路、肿瘤坏死因子(TNF)信号通路、细胞凋亡(Apoptosis)信号通路和信号转导及转录激活因子(JAK-STAT)信号通路,上述天然免疫反应通路可能在PRV诱导的神经炎症方面有重要作用。本研究随机选择了10条转录水平存在差异的基因,采用荧光定量PCR验证,结果显示其变化趋势均与转录组测序数据一致。本研究首次分析了PRV感染小鼠DRG内转录组的变化,为研究PRV感染后诱导宿主的天然免疫反应相关信号通路提供了参考,并为PRV致病机制等相关研究奠定了基础。
- 王冰吴红霞李淼高莹袁梦淇仇华吉孙元
- 关键词：伪狂犬病病毒小鼠背根神经节转录组测序
- 嵌合猫杯状病毒F9株感染性克隆的构建及病毒拯救被引量：1
- 2019年
- 为构建猫杯状病毒(FCV)弱毒株F9的感染性克隆,本研究利经PCR分段扩增了FCV各基因片段,并拼接出FCVF9全基因组序列。经测序显示,其1823位多出一个碱基造成该序列存在移码突变,经替换为pOK-2280(已构建出的FCV强毒株的感染性克隆)相应序列并对差异氨基酸逐个突变,最终获得嵌合FCVF9全基因组的重组质粒pOK-F9H。将线性化的pOK-F9H体外转录,获得的加帽RNA转染F81细胞,得到了拯救病毒rFCVF9。经过对拯救病毒与亲本病毒的蚀斑形成能力、CPE形成能力和多步生长曲线分析,结果显示rFCVF9与亲本株在复制能力和体外生长能力方面基本一致,表明构建了嵌合FCVF9株的感染性克隆并拯救出重组病毒。本研究构建的嵌合FCVF9株感染性克隆可以为FCV的基因功能研究以及新型FCV疫苗的研发奠定基础。
- 左智敏康洪涛吴红霞祖少坡田进刘永相倪宏波曲连东
- 关键词：感染性克隆病毒拯救
- 杂交瘤细胞株McAb 1G2及兔出血症RHDV2型病毒单克隆抗体
- 杂交瘤细胞株McAb 1G2及兔出血症RHDV2型病毒单克隆抗体，它涉及一株杂交瘤细胞株及其分泌的单克隆抗体。它解决了目前没有能够单独识别RHDV2型病毒或RHDVa型病毒的单克隆抗体的问题。杂交瘤细胞株McAb 1G2...
- 刘家森曲连东姜骞郭东春刘大飞刘春国李志杰仇铮田进吴红霞刘明
- 表达DsRed和NanoLuc双报告基因的重组伪狂犬病病毒的构建与鉴定
- CRISPR/Cas9是几年前出现的一种由小的引导RNA(single guide RNA,sgRNA)介导的Cas9核酸酶对靶基因进行特异性切割的基因编辑技术,该技术被广泛应用于重组DNA病毒(如疱疹病毒和慢病毒)的构...
- 吴红霞向广韬周末孙元仇华吉
- 关键词：伪狂犬病病毒报告基因
- 文献传递
