代鑫
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：陕西师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- PEP-3与HBc融合原核表达载体的构建与表达
- 2015年
- 以可诱导较强免疫反应及呈现高拷贝抗原小肽的乙肝病毒核心蛋白(Hepatitis B Virus Core Protein,HBc)类病毒颗粒(Virus-like Particles,VLPs)作为免疫载体蛋白,通过分子生物学手段,将蓝白班筛选元件Lac Zα插入HBc的主要免疫显性区域,构建获得外源小肽与HBc融合的通用原核表达载体。在此通用载体的基础上,通过PEP-3小肽替换Lac Zα片段,构建了PEP-3与HBc融合原核表达载体,并成功进行了HBc/PEP-3融合蛋白的表达及纯化。该新型通用载体的成功构建,将为小肽疫苗的研究及应用提供有效工具。
- 杨星陈皓叶明付代鑫夏海滨
- 关键词：原核表达载体肽疫苗
- 利用CRISPR/Cas9技术构建GLRX3基因敲除的HEK293细胞系被引量：1
- 2017年
- 为了构建GLRX3(Glutaredoxin 3)敲除的HEK293细胞系,根据该蛋白结构特性设计了靶向于GLRX3基因Exon5的4个sgRNA,并通过T7E1检测确认了所设计sgRNA的有效性。将携带Cas9及靶向hGLRX3-Exon5的sgRNA1的打靶载体转染HEK293,通过药物Puromycin和细胞克隆化筛选出稳定GLRX3基因敲除的HEK293细胞株,并通过测序确定GLRX3两个等位基因均发生移码突变。通过免疫印迹在蛋白表达水平确认了该基因的敲除。利用CRISPR/Cas9技术成功构建了GLRX3敲除的HEK293细胞株,其为探索GLRX3的功能和作用机制提供了有效的细胞模型。
- 代鑫赵俊丽杨沛艳夏海滨
- 关键词：基因敲除
