张田力
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 供职机构：江南大学食品学院食品科学与技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生理学更多>>
- 肠致病性大肠杆菌适配体筛选研究被引量：4
- 2015年
- 目的食源性致病菌引起的食源性疾病已成为全球食品安全面临的巨大威胁,其中由大肠杆菌引起的食源性疾病最为常见。因此发展快速、准确检测大肠杆菌的方法对于保障食品安全、保护国民健康具有重要意义。方法应用Whole bacteria-SELEX(指数富集的配体系统进化技术),以肠致病性大肠杆菌为靶标,经过15轮的筛选富集,将所得产物进行克隆测序,并结合荧光分析考察所得序列的亲和力和特异性,根据解离常数值分析比较序列的亲和力和特异性,最终得到2条(Seq.1和Seq.28)与肠致病性大肠杆菌高特异性结合的适配体。结果适配体Seq.1和Seq.28均对肠致病性大肠杆菌表现出了相对良好的亲和力和特异性(对其他菌的相对亲和力均低于15%),解离常数分别为45.06±6.797和32.31±6.002 nmol/L。结论本文利用SELEX技术筛选特异性识别肠致病性大肠杆菌适配体,具有稳定性高、合成方便、易标记等特点,可进一步应用于食品中肠致病性大肠杆菌的快速检测。
- 段诺张田力吴世嘉王周平
- 关键词：肠致病性大肠杆菌适配体WHOLE荧光分析
- 基于适配体识别-荧光法检测肠致病大肠杆菌被引量：1
- 2015年
- 基于适配体识别和荧光探针技术,发展了一种检测肠致病大肠杆菌（EPEC）的新型分析方法。该方法以生物素化适配体1为捕获探针,通过生物素与亲和素的特异性结合得以固定在微孔板中;以FAM标记的适配体2作为显示探针,当有目标物存在的情况下,生物素化适配体1将捕获目标物质并与其相结合,同时FAM标记的适配体2也会与目标物质相结合,从而使得目标物标记上荧光信号,通过测定荧光信号可实现对目标物质的定量检测。考察了影响方法分析性能的各种条件,结果发现当微孔板包被亲和素质量浓度为100μg/m L,生物素化适配体1浓度为100 nmol/L,FAM标记的适配体2浓度为150 nmol/L时,可获得方法的最佳分析表现。在最佳试验条件下,方法对肠致病大肠杆菌检测的线性范围为50~106cfu/m L,检出限为50 cfu/m L。方法选择性良好,操作简单,已成功应用于实际样品中肠致病大肠杆菌的检测。
- 段诺张田力吴世嘉王周平
- 关键词：适配体荧光分析
