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李倩: 作品数：12 被引量：16H指数：3; 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室更多>>; 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家科技支撑计划吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目更多>>; 相关领域：生物学农业科学医药卫生化学工程更多>>

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血凝-血凝抑制试验在快速诊断犬细小病毒性肠炎中的应用被引量：3: 2015年; 对38份疑似细小病毒性肠炎病犬粪便样品以HA-HI方法进行了检测,同时与免疫金标检测试纸和PCR检测方法进行比较。结果显示,HA-HI、免疫金标检测试纸和PCR 3种方法检测的阳性率分别为84.2%(32/38)、92.1%(35/38)和89.4%(34/38)。与PCR方法相比,HA-HI检测方法的敏感性和特异性分别为94.1%和100%,免疫金标检测试纸的敏感性和特异性分别为94.1%和25%。结果表明,HA-HI检测方法的特异性比免疫金标检测试纸好,敏感性略低于PCR,适用于基层单位对犬细小病毒性肠炎的快速诊断。; 马爱民李倩王超赵国星程楠金宏丽曹增国赵永坤郑学星高玉伟王化磊杨松涛; 关键词：犬细小病毒性肠炎

重组葡激酶的基因克隆与序列测定: 1999年; 从烧伤病房病人烧伤感染创面分离到 9株金黄色葡萄球菌 ,经纤溶活性测定 ,选纤溶活性最高的作为 PCR扩增模板。将扩增出的葡激酶基因片段插入 p UC1 8载体质粒 ,转化大肠杆菌 DH5 α,筛选出 PUC- SAK阳性克隆 ,经 DNA序列测定证实该基因片段为一种新的; 李倩荫俊雷祚荣宋伟; 关键词：重组葡激酶基因克隆

西尼罗病毒糖蛋白第三结构域的原核表达及鉴定: 2016年; 根据西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)序列设计1对特异性引物,用PCR反应扩增糖蛋白第三结构域(WNVEDⅢ)基因,将PCR产物克隆至pGEX-4T-1原核表达载体上,获得重组表达质粒,将该质粒转化入E.coli DH5α,命名为pG-EDⅢ,鉴定正确后转入transetta表达菌中,经IPTG诱导后纯化重组蛋白,通过SDS-PAGE和Western-blot方法证实WNV-EDⅢ基因可在大肠杆菌中高效表达,小鼠免疫试验证明该原核表达蛋白有良好的免疫原性。; 曹增国李岭王化磊金宏丽郑学星冯娜李倩赵国星闫飞虎赵永坤王铁成高玉伟杨松涛夏咸柱; 关键词：西尼罗病毒原核表达免疫原性

外源基因表达与代谢超负荷被引量：1: 1997年; 李倩雷柞荣; 关键词：基因表达外源基因

西尼罗病毒抗体间接ELISA检测方法的建立、验证及其应用被引量：4: 2016年; 目的建立及验证西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)抗体间接ELISA检测方法,并用于评价疫苗的免疫效果。方法以纯化后的WNV E蛋白第三结构域(EDⅢ)蛋白作为包被抗原,建立WNV抗体间接ELISA检测方法,对抗原包被浓度(2.5、5、10、20、40、80μg/ml)、血清稀释度(1:10、1:20、1:40、1:80、1:160、1:320)、抗原封闭时间(0.5、1、1.5、2 h)、血清孵育时间(0.5、1、1.5、2 h)、HRP标记的山羊抗马Ig G稀释倍数(1:5 000、1:10 000、1:20 000、1:40 000、1:80 000稀释)及其孵育时间(0.5、1、1.5、2 h)进行优化,并验证该方法的特异性、敏感性及精密性。采用建立的方法检测WNV阴性马血清和病毒样颗粒(WNV-VLPs)疫苗免疫的马血清,与ALPHA公司试剂盒的检测结果进行比较。结果间接ELISA法最佳检测条件为:抗原包被浓度为20μg/ml,4℃包被过夜;Blocking ACE封闭液于37℃封闭1.5 h;加入血清(1:80稀释),37℃孵育1.5 h;加入HRP标记的山羊抗马Ig G(1:20 000稀释),37℃孵育1 h。该方法可特异性检测WNV阳性血清中的WNVE-Ig G抗体;阳性血清稀释至1:2 560时,检测结果仍为阳性;批内和批间的变异系数(CV)均小于7%。25份WNV阴性马血清检测结果均为WNVE-Ig G抗体阴性,经WNV-VLPs疫苗免疫的马血清中的WNVE-Ig G抗体效价水平随免疫次数的增加呈递增趋势,间接ELISA法与ALPHA公司试剂盒的检测结果完全一致。结论成功建立了WNV抗体间接ELISA检测方法,可用于疫苗免疫效果的评价,为开展WNV流行病学调查、诊断及新型疫苗的研发奠定了基础。; 曹增国王化磊李岭李岭金宏丽冯娜王丽娜冯娜李倩郑学星赵国星李倩闫飞虎赵永坤夏咸柱; 关键词：西尼罗病毒抗体间接ELISA法

利用基因工程技术生产葡激酶的方法: 本发明提供了一种利用重组菌株表达葡激酶蛋白质的方法。现有技术中葡激酶的表达水平较低，本发明通过将扩增的葡激酶基因与载体pBV220进行连接，构建成表达质粒，并将所构建的表达质粒转化大肠杆菌，构建成重组葡激酶工程菌株，葡激...; 李倩; 文献传递

重组葡激酶基因在大肠杆菌内的高水平表达及生物学活性研究被引量：1: 1999年; 将测序后的葡激酶重组质粒ＰＵＣ－ＳＡＫ经酶切后，组装于表达载体ｐＢＶ２２０，构建成ｐＢＶ－ＳＡＫ表达质粒，转化大肠杆菌。重组葡激酶表达水平达６０％～７０％，相对分子质量为１５５００，主要以可溶状态存在于细胞中。生物活性测定证实，重组葡激酶具有很强的纤溶活性。; 李倩荫俊宋伟雷祚荣付玲; 关键词：葡激酶基因表达生物活性

重组葡激酶的分离纯化被引量：2: 2000年; 在构建出高表达、高活性的葡激酶工程菌株的基础上 ,对表达产物进行了分离纯化研究。经离子交换纯化后 ,纯度达 85 %～ 90 % ,回收率为 5 0 %～ 6 0 % ,经凝胶过滤后 ,纯度达 99%以上 ,回收率为 6 0 % ,经SDS PAGE测定 ,相对分子质量为 15 .5× 10 3,比活为 1.0× 10 5。; 李倩荫俊付玲李广善宋伟李成文徐秀芝; 关键词：重组葡激酶纯化纤溶酶原激活剂

犬细小病毒抗体间接ELISA检测方法的建立被引量：4: 2014年; 利用本实验室建立的昆虫细胞/杆状病毒表达系统表达犬细小病毒病毒样颗粒(CPV-VLPs),采用硫酸铵沉淀、蔗糖密度梯度离心对表达的CPV-VLPs进行纯化,用电子显微镜、SDS-PAGE及Western-blotting方法检测纯化效果。以纯化的CPV-VLPs作为包被抗原建立CPV间接ELISA检测方法,对各反应条件进行优化并分析其特异性、敏感性、重复性。结果显示,CPV-VLPs经过纯化后纯度可达到95%以上;优化的ELISA最佳工作条件为:纯化抗原包被浓度为5.0mg/L,4℃包被过夜;1%BSA,37℃封闭2h;待检血清1∶40稀释,37℃孵育1.5h;HRP标记的酶标二抗1∶20 000稀释,37℃孵育1h;TMB室温避光显色30min;确定的血清阴性阳性临界值D450nm值为0.264。该方法可特异性检测犬细小病毒阳性血清,与犬瘟热、犬传染性肝炎、犬冠状病毒病、狂犬病阳性血清均不发生反应。该方法的敏感性为1∶640,批内重复试验变异系数小于6%,批间重复试验变异系数小于8%。42份临床血清样本的检测结果表明,与血凝抑制试验的符合率为90.48%。; 赵国星王化磊金宏丽李倩郑学星冯娜李岭李露王超赵永坤王铁成高玉伟杨松涛夏咸柱; 关键词：犬细小病毒病毒样颗粒间接ELISA 抗体检测

葡萄球菌质粒的分子生物学研究简况: 1991年; 葡萄球菌是引起医院内感染和食物中毒的重要病原体,其耐药性、产毒性与质粒有重要关系。本文着重论述葡萄球菌质粒的主要生物表型及传递方式的研究进展。; 李倩雷祚荣; 关键词：分子生物学

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