孙荣华
- 作品数：10 被引量：58H指数：4
- 供职机构：北京大学化学与分子工程学院化学生物学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组CC家族趋化因子RANTES的原核表达及趋化活性分析被引量：4
- 2001年
- 目的 深入研究趋化因子 RANTES的结构与功能，为其进一步的应用研究打下基础。方法 利用 PCR技术扩增 RANTES成熟蛋白的编码区序列，将其克隆到原核表达载体，经表达纯化得到重组蛋白质纯品，利用趋化小室法测趋化活性。结果 成功扩增 RANTES cDNA编码区序列，在大肠杆菌中成功表达重组 RANTES蛋白，经纯化蛋白纯度达 95％以上，对外周血淋巴细胞（ PBL）， U937淋巴瘤细胞系，和 HEK293-CCR4稳定株有趋化活性，对 Jurkat细胞无明显趋化作用。结论 原核表达的重组 RANTES对多种细胞具有趋化活性，并建立了用培养细胞系检测趋化活性的模型，为下一步 RANTES的结构与功能研究打下了基础。
- 孙荣华王应钟英诚马大龙
- 关键词：趋化因子RANTES原核表达趋化活性
- 蛋白激酶Cζ在人类NSCLC细胞趋化运动中的作用
- 2008年
- [目的]探讨蛋白激酶Cζ(PKCζ)在表皮生长因子及其受体(EGF/EGFR)诱导的人类非小细胞肺癌(NSCLC)细胞(A549、H1299)趋化运动中所起的作用。[方法]利用趋化实验比较不同化诱因子及不同亚型PKC分子在趋化运动中的作用。[结果]EGF诱导的趋化运动指数比趋化因子CXCL12诱导的高出近3.6倍(P<0.001);且用针对不同PKC亚型的抑制剂及PKCζ假底物处理细胞,Chelerythrine chloride对EGF诱导的A549趋化运动阻断具有剂量依赖性(P1=0.0372,P2=0.0098,P3<0.0001);myr-假底物对A549趋化运动的阻断也具有剂量依赖性(P1=0.0227,P2=0.0081,P3<0.0001),对H1299趋化运动具有阻断作用但无剂量依赖性(P≤0.0066);其他抑制剂仍可以使EGF诱导出趋化运动。[结论]在NSCLC细胞中,EGF诱导趋化运动的能力强于CXCL12,且PKCζ参与了EGF诱导的趋化运动。
- 王冰魏晶王世仪孙荣华张宁李芳
- 关键词：人类非小细胞肺癌表皮生长因子趋化
- 人肿瘤坏死因子受体家族TAJ的克隆及凋亡诱导活性研究
- ＜正＞ TAJ（Toxicity And JNK inducer）是新克隆的肿瘤坏死因子受体家族的成员,基因定位在第13号染色体上,编码由423个氨基酸组成的蛋白质,蛋白序列分析表明其胞浆区与目前已知的肿瘤坏死因子受体家...
- 王莺王露孙荣华张颖妹马大龙
- 文献传递
- 人凋亡相关蛋白TFAR19在细胞凋亡过程中的核转位研究
- ＜正＞ TFAR19（TF-1 cell apoptosis related gene 19,TFAR19）是本研究室克隆出的一个拥有自己知识产权的人类新基因。最近,国际人类基因命名委员会建议命名为PDCD5（progr...
- 陈英玉孙荣华韩文玲张颖妹宋泉声狄春辉马大龙
- 文献传递
- 抗人凋亡相关蛋白TFAR19的单克隆抗体制备及鉴定被引量：18
- 2000年
- 目的研制鼠抗人凋亡相关蛋白 TFAR19的单克隆抗体，以进一步探讨 TFAR19蛋白的结构与功能。方法以纯化的重组人 TFAR19蛋白为抗原 ,免疫 BALB/c小鼠，将 TFAR19蛋白免疫的小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞 SP2/0进行细胞融合，经克隆筛选获得鼠抗人 TFAR19蛋白单抗的杂交瘤细胞株，以间接 ELISA、 Western免疫印迹分析等方法进行单克隆抗体的鉴定。结果获得了 3株稳定分泌抗人 TFAR19单克隆抗体的杂交瘤细胞株 (C1,C10,2C12),其分泌的单抗效价高，特异性好，亲和力不一，免疫球蛋白亚类均为 IgG1。 Western免疫印迹分析证明 TFAR19蛋白在凋亡细胞中高表达。结论所获单抗能特异识别原核及真核细胞表达的 TFAR19蛋白，为进一步探讨 TFAR19蛋白的生物学效应提供了条件。
- 陈英玉张颖妹孙荣华宋泉声狄春辉马大龙
- 关键词：TFAR19PDCD5单克隆抗体
- 蛋白激酶Czeta调控肿瘤细胞趋化运动的用途
- 本发明涉及蛋白激酶Czeta(Protein Kinase Cζ，PKCζ)在调控肿瘤细胞趋化运动中的用途。本发明发现PKCζ是肿瘤细胞的趋化运动的必需组分，抑制该酶的活化可以有效地抑制EGFR和趋化因子受体诱导的肿瘤细...
- 张宁孙荣华朱斯特J·奥本海姆马大龙
- 文献传递
- 凋亡相关蛋白TFAR19在TF-1细胞凋亡中出现细胞核转位被引量：37
- 2001年
- 目的 :探讨凋亡相关分子TFAR19在TF 1细胞凋亡过程中的表达及定位。方法 :以TFAR19的单克隆抗体为工具 ,采用荧光显微镜、共聚焦激光扫描显微镜、流式细胞仪等研究手段 ,观察细胞凋亡过程中TFAR19分子的表达水平和细胞内定位 ,分析其与细胞膜磷脂酰丝氨酸 (phosphatidylserine,PS)以及细胞核DNA片段化的关系。结果 :TFAR19蛋白在撤除GM CSF的TF 1细胞中表达水平显著增高 ,伴有明显的核转位现象 ,且早于PS外翻和细胞DNA片段化。结论 :TFAR19蛋白的核转位是细胞凋亡更早期发生的事件之一 ,这一新发现为进一步探讨TFAR19蛋白的生物学效应 。
- 陈英玉孙荣华韩文玲张颖妹宋泉声狄春辉马大龙
- 关键词：TFAR19细胞凋亡
- TF-1细胞凋亡相关基因19在系统性红斑狼疮发病中的作用被引量：9
- 2003年
- 目的 :探讨TF - 1细胞凋亡相关基因 1 9(TFAR1 9)在系统性红斑狼疮 (SLE)发病诱因中的作用及其与SLE病情的关系。方法 :应用倒置相差显微镜、Ladder方法、Westernblotting方法、荧光免疫显微镜、ELISA方法检测中波紫外线 (UVB)诱导HaCaT细胞凋亡时TFAR1 9的表达及其与SLE患者病情的关系。结果 :在剂量为 30mJ/cm2的UVB照射 2 4h后 ,HaCaT细胞开始凋亡 ,TFAR1 9在此过程中有表达 ,发现活动期SLE患者血清中TFAR1 9的抗体值高于稳定期和正常对照组的值 (P≤ 0 .0 5)。结论 :在UVB诱导角质形成细胞HaCaT凋亡的过程中 ,有TFAR1 9的参与并发挥了作用 ,提示TFAR1
- 宋清华王晶陈英玉狄春晖孙荣华陈学荣李世荫
- 关键词：系统性红斑狼疮细胞凋亡紫外线B
- 凋亡相关蛋白TFAR19促进凋亡作用的分子机理探讨
- TFAR19(TF-1cellapoptosisrelatedgene19)是由该研究室利用cDNA-RDA(cDNArepresentationaldifferencesanalysis)技术,在研究去细胞因子诱地凋亡...
- 孙荣华
- 关键词：反义寡核苷酸免疫共沉淀CASPASE-3CASPASE-3抑制剂
- Nmi及其变异体在大肠杆菌中表达、抗体制备及其细胞分布被引量：3
- 2001年
- 为了检测细胞内源性Nmi和变异体Nmi s的表达、亚细胞分布以及可能形成的信号转导蛋白复合物 ,成功构建并表达了异源Nmi和Nmi s 获得纯化异源蛋白 ,用以制备兔源抗Nmi(Nmi s)多克隆抗体 .Western印迹在多种细胞株HL 60 ,K562 ,2 93T细胞中检测到Nmi(Nmi s)高表达 .在不同的细胞系中 ,Nmi表现为不同的蛋白复合物迁移带 ;Nmi(Nmi s)在胞浆和胞核均存在 ,而核内荧光更强 .Nmi(Nmi s)通过与多种蛋白相互作用行使其生物学功能 ,在不同细胞中可能与不同的蛋白相互作用 ,发挥不同的功能 .
- 莫晓宁孙荣华钟英成张颖妹陈英玉马大龙
- 关键词：NMI变异体蛋白印迹
