夏灿
- 作品数：2 被引量：9H指数：1
- 供职机构：南京农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 肠出血性大肠杆菌O157:H7抗原基因及毒力基因多重荧光定量PCR检测方法的建立被引量：9
- 2016年
- 根据Gen Bank公布的大肠杆菌O157:H7的菌体抗原基因rfb E、鞭毛抗原基因fli C、溶血素基因hly A、紧密黏附素基因eae A和志贺样毒素基因stx1和stx2的序列,同源性比较后选择保守序列分别设计6对特异性的引物及相应的Taqman探针,rfb E/eae A、Stx1/hly A、fli C/Stx2探针5'端分别标记为FAM、HEX、CY5荧光报告基团,3'端均标记为BHQ1荧光淬灭基团。通过优化反应体系和程序,建立2个能够快速、特异性地检测大肠杆菌O157:H7及其4个主要毒力基因的三重荧光定量PCR方法。结果显示,该方法灵敏度高,stx1、rfb E、fli C、eae A、hly A、stx2的最低检测限分别为20、30、20、20、30和40拷贝数/μL;特异性试验证明,该菌与其他菌种无交叉反应;重复性好,变异系数均小于2%;检测过程耗时约1 h。将建立的荧光定量PCR体系应用到人工染菌模拟猪肉样品试验中,未富集或富集8 h后测得大肠杆菌O157:H7的最低检出限分别为200 cfu/m L与1 cfu/m L。以上结果表明,本试验所建立的三重荧光定量PCR方法的敏感性、重复性及特异性均较好,可作为同时快速检测肠出血性大肠杆菌O157:H7及其毒力基因的方法。
- 夏灿蒋蔚刘迎春陈永军龙梦瑶薛俊欣王权孙卫东
- 关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7毒力基因TAQMAN探针
- 一种检测弓形虫急性感染的方法及其靶标蛋白
- 本发明公开了一种非疾病诊断或治疗目的的检测弓形虫急性感染的方法、其试剂盒及其用到的抗体。所述方法包括下述步骤：使待检测样本与弓形虫ELMO蛋白或所述弓形虫ELMO蛋白的抗体发生反应。本发明所提供的检测方法能够快速检测弓形...
- 薛俊欣王权蒋蔚陈永军刘迎春宫枫举曾鹏王民燕夏灿陈军霞
