叶星
- 作品数：4 被引量：6H指数：1
- 供职机构：兰州生物制品研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 不同通气方式对抗破伤风毒素抗体工程细胞株生长及蛋白表达的影响被引量：1
- 2020年
- 目的探讨生物反应器不同通气方式对抗破伤风毒素抗体的CHO工程细胞株生长、代谢及目的蛋白表达的影响。方法在3个3 L生物反应器中,分别选用微泡、大泡和膜供氧的通气方式,以相同的初始密度接种CHO种子细胞,设置相同的温度、pH、搅拌速度、溶氧(dissolved oxygen,DO)等关键培养参数,采用补料分批培养模式进行培养。每日取样,分别检测培养液的活细胞密度(viable cell density,VCD)、细胞活率、渗透压及葡萄糖、乳酸、NH4+和抗体蛋白浓度。筛选细胞生长较好及乳酸等代谢副产物累积较少且蛋白表达量高的一种通气方式。结果微泡通气方式下,CHO细胞生长缓慢,最高VCD为7.63×10^6个/mL,接种后细胞活率一直低于90%且下降较快,培养8 d,抗体蛋白浓度为76 mg/L。大泡通气方式下,最高VCD为12.45×10^6个/mL,培养1~6 d细胞活率均高于90%,培养第8天乳酸浓度开始下降,培养10 d,抗体蛋白浓度为534 mg/L。膜供氧通气方式下,最高VCD为13.54×10^6个/mL,培养1~8 d细胞活率均高于90%,培养第8天乳酸浓度开始下降,培养10 d,抗体蛋白浓度为755 mg/L。结论大泡及膜供氧通气方式下细胞生长和蛋白表达情况均较好,选取易进行工艺放大的大泡通气方式进行后续培养工艺的建立。
- 宋兰兰安晨南建军叶星郭岚毛晓燕
- 关键词：通气方式细胞代谢蛋白表达
- 抗破伤风毒素人源单克隆抗体制剂配方的初步筛选被引量：1
- 2020年
- 目的初步筛选抗破伤风毒素人源单克隆抗体制剂配方组成。方法以PBS为缓冲体系,聚山梨酯-80(Tween-80)为表面活性剂,乙二胺四乙酸(EDTA)为抗氧化剂及溶液不同pH值为关键因素,实验设计(Design of Experiment,DOE)10组抗破伤风毒素人源单克隆抗体制剂配方,分别进行加速稳定性试验[40℃保存0、1、7及14 d],分析单克隆抗体主要质量属性[分子排阻-高效液相色谱(size-exclusive-high performance chromatography,SEC-HPLC)和毛细管凝胶电泳(capillary electrophoresis-sodium dodecyl sulfate,CE-SDS)分析纯度,毛细管等点聚焦(capillary isoelectric focusing,cIEF)分析电荷变异体,动物实验检测抗体效价)]变化,初步确定制剂最适配方。结果单克隆抗体制剂经SEC-HPLC分析,1、2、9及10制剂配方组纯度较好,经CE-SDS分析,1、2、7~10制剂配方组纯度较好;经cIEF分析电荷变异体,2及9制剂配方组保护效果较好;经动物实验检测,1、2、7~10制剂配方组抗体效价较好;初步确定2及9制剂配方组为最适制剂配方。结论初步筛选出2组抗破伤风毒素人源单克隆抗体制剂配方,Tween-80浓度及制剂溶液pH值可能是影响抗体稳定的主要因素。本研究为单克隆抗体制剂的进一步优化提供了方向及依据。
- 王建锋叶星南建军安晨宋兰兰毛晓燕
- 关键词：单克隆抗体
- 以CHO细胞为基质的单抗生产中无血清培养基的优化
- 隆抗体药物特异性高且疗效显著,是近年来研究的热点药物之一,在肿瘤的诊断与治疗、自身免疫性疾病、感染性疾病和移植排斥反应等方面具有广阔的应用前景.抗体药物治疗的特点是所需剂量大且治疗周期长,故市场需求量巨大.因此,基于大规...
- 叶星毛晓燕
- 关键词：单克隆抗体药物哺乳动物细胞无血清培养基
- 以CHO细胞为基质的重组单克隆抗体生产中无血清培养基的优化被引量：4
- 2016年
- 重组单克隆抗体药物特异性高且疗效显著,是近年来研究的热点药物之一,在肿瘤的诊断与治疗、自身免疫性疾病、感染性疾病和移植排斥反应等方面具有广阔的应用前景。抗体药物治疗的特点是所需剂量大且治疗周期长,因此市场需求量巨大。基于大规模生物反应器的哺乳动物细胞(特别是CHO细胞)培养技术已逐渐成为生产单抗药物的核心技术。哺乳动物细胞培养技术包括工程细胞株的筛选、无血清培养基的开发与优化、生物反应器培养工艺的优化等环节。本文重点介绍无血清培养基的发展、分类及优化策略,旨在为建立经济高效的单抗体药物生产工艺提供参考。
- 叶星毛晓燕
- 关键词：单克隆抗体无血清培养基
