李俊仁 作品数:12 被引量:57 H指数:5 供职机构: 广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 广东省中医药管理局基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
岗梅种子检验规程研究 被引量:7 2016年 目的建立岗梅种子的检验方法。方法参考《国际种子检验规程》和《农作物种子检验规程》的方法,通过对岗梅种子扦样、真实性、净度、发芽率、含水量、生活力及千粒重等7项指标进行研究,确定各指标标准检验方法。结果扦样时种子批的最大总质量可选为5000 g,送检样品的质量最少为150 g;真实性可利用岗梅种子外观结构、大小和颜色等形态特征进行鉴定;净度分析可按照GB/T 3543.1-1995《农作物种子检验规程总则》中的相关方法进行;发芽试验条件为50 mg·L^(-1)赤霉素浸种24 h后于20℃、光照10 h,砂上发芽;种子水分测定采用高恒温[(130±2)℃]烘干法烘2 h;生活力测定采用四氮唑(TTC)染色法,浸种时间为4 h,种子横向切去1/3后于40℃、0.5%TTC溶液中避光染色24 h;质量测定采用百粒法。结论确定了可控指标检验的最优条件,本规程可用于岗梅种子的质量检验。 李俊仁 陈秀珍 张振山 邢建永 詹若挺 何瑞关键词:岗梅 种子 检验规程 青天葵中一个分枝发育相关基因的研究 葵[Herba Nervilia Plicatae]为兰科芋兰属植物毛唇芋兰[Nervilia fordii(Hance) Schltr.]的块茎或全草,为岭南道地药材,对小儿呼吸到疾病疗效显著.近年来由于过度采挖以及自... 陈秀珍 梁凌玲 李俊仁 汤小婷 詹若挺 何瑞关键词:药用作物 青天葵 基因表达 岗梅种苗质量分级标准研究 被引量:15 2016年 目的:研究岗梅种苗质量分级标准。方法:测量1年生岗梅种子实生苗的株高、株径、根长等参数,通过多种方法进行分级获得分级标准,以不同级别存活苗分布情况来评价3种质量分级方法。结果:确定以种苗参数K-聚类法进行质量分级,将岗梅种苗分为三级,其中一级种苗株高≥59cm,根长≥22cm,株径≥6.96mm;二级种苗株高43~59cm,根长18~22cm,株径4.88~6.96mm;三级种苗株高15.5~43cm,根长10~18cm,株径2.18~4.88mm。结论:建立了适用于生产实践的岗梅种苗质量分级标准。 李俊仁 陈秀珍 梁凌玲 张振山 邢建永 詹若挺 何瑞关键词:岗梅 种苗 聚类分析 连作对穿心莲基因组DNA甲基化的影响 被引量:3 2018年 目的:探究连作条件下穿心莲基因组DNA的甲基化水平及模式变化情况。方法:结合甲基化敏感扩增多态性(methylation-sensitive amplified polymorphism,MSAP)技术和液相色谱-质谱(LC-MS/MS)法对3个连作年限(0,1,2年)穿心莲基因组DNA的甲基化水平及模式进行分析。结果:LC-MS/MS测定的连作0-2年穿心莲基因组DNA甲基化水平为13.91%,12.72%,10.26%,MSAP测定的结果则为10.16%,9.64%,8.98%,两者均表明穿心莲基因组DNA的甲基化水平与连作年限呈现负相关,即DNA甲基化水平随着连作时间的延长而逐渐下降。MSAP技术对DNA甲基化模式分析也显示,穿心莲基因组DNA的CCGG位点在连作过程中主要发生了去甲基化。结论:连作条件下,穿心莲基因组DNA的甲基化水平和模式发生改变并以此来响应连作胁迫。 李俊仁 陈秀珍 曾湘达 卓一南 何瑞 詹若挺关键词:穿心莲 DNA甲基化 连作 甲基化敏感扩增多态性 液相色谱-质谱法 穿心莲MSAP反应体系的优化及引物筛选 2018年 为建立穿心莲甲基化敏感扩增多态性(methylation sensitivity amplification polymorphism,MSAP)反应体系,本研究以穿心莲叶片为材料,提取总基因组DNA,采用L25(55)正交试验对穿心莲MSAP的预扩增和选择性扩增的相关参数进行了优化,并对MSAP引物进行了筛选,以期建立穿心莲MSAP最佳反应体系。优化后的体系具有稳定的图谱,清晰丰富的条带。运用优化后的体系,在穿心莲MSAP的80对引物中筛选出8对有效引物。筛选出的引物组合特异性良好,能够用于后续穿心莲甲基化的相关研究。为其他药用植物MSAP分析提供参考。 卓一南 曾湘达 李俊仁 何瑞 詹若挺关键词:穿心莲 MSAP 引物筛选 青天葵NfLS基因启动子克隆及序列分析 [背景和目的]青天葵[Herba Nervilia Plicatae]为兰科芋兰属植物毛唇芋兰[Nervilia fordii (Hance)Schltr.]的块茎或全草,为岭南道地药材,对小儿呼吸到疾病疗效显著.近年来... 陈秀珍一 李俊仁 汤小婷 詹若挺 何瑞连作对穿心莲生长及药材质量的影响 被引量:9 2017年 目的探讨连作对穿心莲植株生长及药材质量的影响。方法以盆栽穿心莲为对象进行连作试验,在栽培周期内测定不同连作年限(连作0~2年)穿心莲植株的生长指标、生理指标、产量及活性成分含量。结果穿心莲植株的株高、叶总面积、叶绿素含量及产量均随着连作年限的增加而增加,连作1,2年与连作0年比较,差异有统计学意义(P<0.05);连作后穿心莲花期和果期提前了5~7 d;连作1,2年的穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量均比连作0年的降低;穿心莲叶片膜脂过氧化程度及抗氧化酶活性测定发现丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)及过氧化氢酶(CAT)的活性均随连作年限的增加而升高。结论连作后的穿心莲长势良好、产量提高,连作胁迫产生的活性氧可及时被酶系统清除,连作对穿心莲的主要障碍效应表现为活性成分含量的降低。 李俊仁 陈秀珍 汤小婷 曾湘达 卓一南 何瑞 詹若挺关键词:穿心莲 连作 活性成分 携带芋兰属LATERAL SUPPRESSOR(LS)-EGFP融合基因植物表达载体的构建 被引量:1 2015年 LATERAL SUPPRESSOR(LS)是GRAS家族参与植物分生组织发育的转录因子,是控制植物分枝的关键基因。增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)是目前应用广泛的分子生物学报告基因之一,为筛选转基因植株提供了简便有效的方法。为了探讨LS基因在青天葵及其同属植物广布芋兰中的功能,本研究利用降落-重叠PCR(Touchdown-Overlap Extension PCR,TD-OE PCR)方法,分别构建了两种芋兰属植物LS基因和EGFP融合基因。通过酶切和连接的方法,将融合基因构建到植物双元表达载体p RI 101-AN DNA中,成功获得了两个携带芋兰属植物LS-EGFP融合基因的植物表达载体p RI 101-LS-EGFP,并成功转化至农杆菌,下一步拟用于转化拟南芥,为深入研究该基因功能提供基础。 陈秀珍 梁凌玲 李俊仁 汤小婷 詹若挺 何瑞关键词:青天葵 穿心莲连作土壤提取物对其种子的化感作用 被引量:5 2016年 【目的】考察不同质量浓度穿心莲连作土壤提取物对其种子的化感作用。【方法】制备连作0年、连作1年及连作2年的穿心莲栽培土壤水、醇提取物,稀释至不同试验浓度用于穿心莲种子发芽试验。【结果】穿心莲连作土壤的水提物及醇提物均对穿心莲种子的发芽指数、发芽势、发芽率及胚根长有不同程度的抑制作用,但其抑制作用与连作年限无明显关联,3个连作年限土壤的抑制效果比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。水提物中,以125 mg/m L的抑制效果最强。醇提物中,高浓度醇提物的抑制作用较强,尤以抑制胚根长度的作用最为明显。在水提物和醇提物作用下,穿心莲种子各萌发指标的化感效应指数(RI)均RI<0,并且化感综合效应(SE)也均SE<0。【结论】穿心莲连作土壤提取物对其种子萌发存在化感抑制作用,化感作用可能是造成穿心莲连作障碍的原因之一。 李俊仁 陈秀珍 刘凯频 彭秋菊 詹若挺 何瑞关键词:种子萌发 化感作用 广藿香FPPS重组蛋白表达及互作蛋白筛选分析 被引量:3 2019年 对广藿香的法尼基焦磷酸酶(PatFPPS)进行重组蛋白的原核表达,并筛选与之互相作用的蛋白。利用PCR扩增PatFPPS编码区并连接到pGEX-6P-1表达载体,测序验证后将质粒转化BL21(DE3)表达菌株,并用IPTG诱导表达蛋白,最终得到带有GST标签的PatFPPS融合蛋白。利用GST Pull-Down技术,将GST-PatFPPS融合蛋白分别与广藿香叶片总蛋白进行体外孵育,洗脱得到蛋白复合物,经SDS-PAGE及LC-MS/MS鉴定。结果表明,PatFPPS原核表达体系成功建立,获得纯化重组蛋白,并且筛选得到一些候选PatFPPS互作蛋白。利用优化的原核表达体系,可获得可溶性的PatFPPS蛋白,并鉴定得到与之互作的候选蛋白。 钟李婷 陈秀珍 唐云 李俊仁 王小兵 刘彦婷 周璇璇 詹若挺 陈立凯关键词:广藿香 蛋白表达 广藿香醇 茉莉酸甲酯