陈哲
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 供职机构：昆明医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省应用基础研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组腺病毒介导人类白细胞抗原-G基因转染恒河猴树突状细胞对T细胞的增殖作用被引量：3
- 2017年
- 目的人类白细胞抗原-G(HLA-G)通过与树突状细胞(DC)表面的免疫球蛋白样转录体(ILT2)和ILT4(CD85d)结合,广泛参与机体的免疫耐受的过程。探讨经HLA-G重组腺病毒载体感染后的恒河猴未成熟树突状细胞刺激T细胞的增殖作用。方法麻醉恒河猴获取新鲜骨髓血,采用密度梯度离心法,分离获得的单个核细胞行免疫磁珠法获得CD34+细胞。添加小剂量细胞因子联合诱导分化CD34+细胞,从而获得树突状细胞。介导HLA-G的重组腺病毒经过转染未成熟树突状细胞后,检测病毒感染效率,Western blot检测HLA-G在未成熟树突状细胞中的表达。以恒河猴T细胞作为反应细胞,将介导HLA-G的重组腺病毒转染的不同状态下的DC为刺激细胞,进行混合淋巴细胞实验。设置5组:即成熟树突状细胞组(mDC组);未成熟树突状细胞组(imDC组);imDC(L)组:在第7天成功获得imDC后加入脂多糖100 ng/m L;imDC(V)组:重组腺病毒介导HLA-G感染的imDC,方法同前;imDC(L+V)组:重组腺病毒同样转染imDC,同时在培养过程中添加100ng/m L的脂多糖。根据DC与T细胞不同比例(1∶5、1∶10、1∶20、1∶40)计算各组刺激指数(SI)。结果成功培养获得恒河猴未成熟树突状细胞,HLA-G在该细胞中表达。流式细胞术检测结果发现DC的纯度高达92.3%,imDC组则高达72.39%,CD4+T细胞阳性率纯度>80%。混合淋巴细胞实验分析DC刺激T细胞增殖结果表明,不同DC与T细胞比例(1∶5、1∶10、1∶20、1∶40)下,imDC组SI为1.63±0.03、1.52±0.04、1.39±0.03和1.21±0.01;mDC组SI为2.23±0.05、2.01±0.03、1.65±0.02和1.54±0.05;imDC(L)组SI为2.25±0.04、1.96±0.02、1.62±0.03和1.48±0.01;imDC(V)组SI为1.46±0.04、1.33±0.02、1.20±0.04和1.04±0.02;imDC(L+V)组SI为1.67±0.03、1.59±0.04、1.38±0.03和1.24±0.03。与imDC组比较,mDC组、imDC(L)组SI明显增高(P<0.01);与imDC(V)组比较,imDC组、mDC组、imDC(L)组、imDC(L+V)组SI明显增高(P<0.01);与imDC(L+V)组比较,mDC组、
- 陈哲胡明道田大广魏晓平于恒海陈鹏
- 关键词：免疫耐受恒河猴
- 重组腺病毒介导HLA-G基因转染恒河猴树突状细胞对T细胞增殖的作用
- [目的]将介导HLA-G基因的重组腺病毒转染恒河猴未成熟树突状细胞,鉴定基因进入细胞中并稳定表达;探讨恒河猴HLA-G重组腺病毒载体感染的恒河猴imDC对刺激T细胞增殖的作用。[方法]使用氯胺酮麻醉恒河猴,用穿刺针穿刺恒...
- 陈哲
- 关键词：HLA-G基因免疫耐受恒河猴
- 文献传递
- Toll样受体信号转导通路在肝移植中的作用研究进展被引量：1
- 2016年
- Toll样受体(TLRs)家族由13个成员组成,TLRs识别脂酸、核酸、蛋白质等配体,诱导机体产生免疫应答。而搭载配体的TLRs能够将信号传递到细胞内的接头蛋白。随着深入TLRs诱导免疫耐受机制的研究,其作用也慢慢为人所知。在肝移植过程中,门脉系统能够不断地将TLR2和TLR4配体运送到肝脏,影响TLR信号通路,引起免疫排斥,而这是肝移植免疫中最关键的问题。TLRs活化后可以引起肝脏的免疫反应,使得肝脏发生缺血/再灌注损伤,并且对于肝脏移植术后的肝炎复发起着一定的作用。因此,深入了解TLRs,及其信号通路,在肝移植中的作用有着重要的意义。
- 陈哲陈鹏胡明道
- 关键词：肝移植TOLL样受体树突状细胞信号转导免疫排斥
