王文华 作品数:6 被引量:25 H指数:4 供职机构: 贵州医科大学 更多>> 发文基金: 贵州省中药现代化科技产业研究开发专项项目 贵州省卫生厅科学技术基金 贵州省科学技术基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
参芎葡萄糖注射液及其丹参组分对小鼠核受体表达的调控作用 2016年 目的考察参芎葡萄糖注射液(SGI)及其丹参组分(SM)对小鼠肝细胞中芳香烃受体(Ah R)、肝细胞核因子4α(HNF-4α)、孕烷X受体(PXR)和过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)m RNA表达的影响。方法采用随机数表法将40只雄性小鼠分为8组,每组5只,分别为空白组、阳性组(苯巴比妥)、SGI低剂量组(以丹参素计2.6 mg·kg^(-1)·d^(-1))、SGI中剂量组(以丹参素计3.9 mg·kg^(-1)·d^(-1))、SGI高剂量组(以丹参素计5.2 mg·kg^(-1)·d^(-1))、SM低剂量组(以丹参素计2.6 mg·kg^(-1)·d^(-1))、SM中剂量组(以丹参素计3.9 mg·kg^(-1)·d^(-1))、SM高剂量组(以丹参素计5.2 mg·kg^(-1)·d^(-1)),连续给药7 d。提取各组小鼠肝脏组织中的RNA,检测相关核受体m RNA的变化。结果与空白组相比,SGI高剂量组可以上调Ah R m RNA的水平(P<0.05),上调倍数为1.7倍,但是SGI对PPARα、PXR、HNF-4α的m RNA水平没有显著性影响(P>0.05);SM对Ah R、PPARα、PXR和HNF-4α的m RNA表达均无显著性影响(P>0.05)。结论高剂量的参芎葡萄糖注射液能够影响Ah R m RNA的表达,但这种影响并不是由其丹参组分导致的。 吴琼 杨友辉 王文华 孙佳 薛维娜 何彬 龚菲 刘亭关键词:核受体 小鼠 荧光定量PCR 参芎葡萄糖注射液 丹参 参芎葡萄糖注射液对小鼠肝细胞色素P450酶活性及表达的影响 被引量:2 2016年 目的:研究参芎葡萄糖注射液(Shenxiong glucose injection,SGI)对小鼠肝脏细胞色素P450 2_(E1)(CYP2_(E1)),2_(A11)(CYP2_(A11)),1_(A2)(CYP1_(A2))和2_(D22)(CYP2_(D22))酶活性以及mRNA表达水平的影响。方法:将昆明小鼠随机分为正常组,苯巴比妥组(0.70 g·kg^(-1)),以及SGI低、中、高剂量组(13.0,19.5,26.0 g·kg^(-1))。各组小鼠每天尾静脉注射药物1次,连续注射7 d后处死。取其肝脏制备肝微粒体进行体外代谢实验,测定CYP2_(E1),CYP2_(D22),CYP1_(A2)和CYP3A的酶活性。并用实时荧光定量聚合酶链式反应q PCR技术定量分析小鼠肝组织中CYP2_(E1),CYP2_(D22),CYP1_(A2)和CYP2_(A11)的mRNA表达水平。结果:与正常组比较,各给药组小鼠肝指数没有显著差异。体外代谢实验表明,相较正常组,高剂量SGI能下调CYP2_(E1)酶活性0.45倍(P<0.05);中剂量和高剂量的SGI可上调CYP1_(A2)酶活性1.2~1.23倍(P<0.05);而SGI对CYP3A和CYP2_(D22)的活性无显著影响。q PCR分析发现,相较正常组,高剂量SGI组CYP2_(E1)mRNA的表达下调了0.6倍(P<0.01);SGI中剂量和高剂量组的CYP1_(A2)mRNA的表达分别上调了1.7倍和2.6倍(P<0.05)。SGI组和正常组之间的CYP2_(A11)和CYP2_(D22)mRNA表达量无显著性差异。结论:中高剂量的SGI能上调小鼠肝CYP1_(A2)的表达,并诱导小鼠肝CYP1_(A2)的酶活性。而高剂量的SGI能下调小鼠肝CYP2_(E1)的表达,并抑制小鼠肝CYP2_(E1)的酶活性。 王文华 刘亭 龚菲 吴林霖 谢婷 潘芬 谢德琴 李黎 王爱民关键词:参芎葡萄糖注射液 细胞色素P450 肝微粒体 参芎葡萄糖注射液对H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用 被引量:17 2016年 目的:探讨参芎葡萄糖注射液(Shenxiong glucose injection,SGI)对过氧化氢(H2O2)诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用及其机制。方法:体外培养H9c2心肌细胞,用H2O2(300μmol·L-1)处理0.5 h,建立H9c2心肌细胞H2O2氧化损伤模型,SGI组:H9c2细胞用(100,200,400μmol·L-1)SGI处理6 h后,另设空白组与模型组,再用H2O2处理0.5 h。利用流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)和线粒体膜电位(MMP);用MTS法检测细胞存活率;用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;用蛋白质免疫印迹(Western blot)技术检测凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸蛋白酶(Caspase-3)的表达情况。结果:在300μmol·L-1H2O2作用细胞0.5 h的情况下,细胞存活率降低至50%左右,降低的程度合适,且实验结果重复性好,因此后续实验用该条件建立氧化损伤模型。与模型组比较,SGI预处理6 h能显著升高细胞存活率(P<0.05,P<0.01),减少LDH的外漏和MDA的生成(P<0.05,P<0.01),显著增加SOD,GSH-Px和CAT的活性(P<0.01),明显减少H9c2细胞内ROS含量(P<0.01),并使MMP丢失减少(P<0.01),Western blot表明,SGI能显著上调Bcl-2的表达,下调Caspase-3的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:参芎葡萄糖注射液能保护H9c2心肌细胞对抗H2O2诱导的氧化损伤,其作用机制可能与其提高细胞清除ROS能力和抑制细胞凋亡有关。 杨洋 刘亭 王文华 何彬 吴琼 刘兰 王永林关键词:H9C2心肌细胞 细胞凋亡 参芎葡萄糖注射液 参芎葡萄糖注射液对H_2O_2诱导的HUVEC细胞氧化损伤的保护作用 被引量:6 2017年 目的:探讨参芎葡萄糖注射液(Shenxiong glucose injection,SGI)对H_2O_2诱导的人脐静脉上皮细胞(HUVEC)细胞氧化模型损伤的保护作用及其机制。方法:体外培养HUVEC人脐静脉内皮细胞,用H_2O_2(130 mmol·L^(-1))处理0.5 h,建立HUVEC细胞H_2O_2氧化损伤模型。SGI组HUVEC细胞用(6%,8%,10%)SGI预处理6 h后,再用H_2O_2处理0.5 h。用MTS法检测细胞存活率;用ELISA法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力;用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)技术检测凋亡相关基因及蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的mRNA和蛋白表达情况。结果:在130 mmol·L^(-1)H_2O_2作用细胞0.5 h的情况下,细胞存活率降低至50%左右,降低的程度合适,且实验结果重复性好,因此后续实验用该条件建立氧化损伤模型。与H_2O_2组比较,SGI预处理6 h能显著升高细胞存活率(P<0.05,P<0.01),减少LDH的外漏和MDA的生成(P<0.05,P<0.01),显著增加SOD,GSH-Px和CAT的活性(P<0.05,P<0.01)。RT-PCR和Western blot结果表明,SGI能显著上调Bcl-2的表达(P<0.05,P<0.01),下调Caspase-3,Bax的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:参芎葡萄糖注射液能保护HUVEC细胞对抗H_2O_2诱导的氧化损伤,具有一定的剂量依赖关系,其作用机制可能与抑制细胞凋亡有关。 杨洋 刘兰 王文华 王永林 李勇军 何彬 孙佳 郑林 刘亭关键词:参芎葡萄糖注射液 细胞凋亡 盐酸川芎嗪对小鼠肝细胞色素P_(450)酶活性及表达调控的影响 被引量:4 2017年 目的探讨盐酸川芎嗪对小鼠肝细胞色素P_(450)酶(CYPs)主要亚型及相关核受体的影响。方法将小鼠分为5组:空白对照组、苯巴比妥组、盐酸川芎嗪小剂量(13.0 mg·kg^(-1)·d^(-1))组、盐酸川芎嗪中剂量(19.5 mg·kg^(-1)·d^(-1))组、盐酸川芎嗪大剂量(26.0 mg·kg^(-1)·d^(-1))组,连续7 d给药。取5组小鼠的肝脏组织,制备肝微粒体、提取RNA,检测5组小鼠CYP活性、mRNA水平和蛋白表达的变化。结果与空白对照组比较,盐酸川芎嗪大剂量组CYP1A2酶活性、mRNA水平和蛋白表达分别上调1.43,1.44和1.40倍(P<0.05)。盐酸川芎嗪组CYP2E1、CYP2D22、CYP3A的酶活性、mRNA水平与空白对照组比较,均差异无统计学意义。与空白对照组比较,盐酸川芎嗪大剂量组AhR mRNA水平上调1.6倍(P<0.05)。盐酸川芎嗪对HNF-4α、PXR和PPARα的mRNA水平无显著影响。随着盐酸川芎嗪的剂量增高,CYP2E1蛋白表达有上升趋势,但无显著性影响。结论盐酸川芎嗪对小鼠体内肝CYP2E1、CYP2D22、CYP3A、HNF-4α、PXR和PPARα无显著影响,但对CYP1A2活性有诱导作用,该作用很可能与盐酸川芎嗪上调AhR水平从而促进CYP1A2表达有关。 王文华 张泽萍 杨洋 李勇军 龚菲 李黎 何彬 孙佳 刘亭关键词:细胞色素P450酶 细胞色素P450 参芎葡萄糖注射液的丹参组分对小鼠细胞色素P450的影响 被引量:4 2016年 目的:考察参芎葡萄糖注射液中的主要组分丹参(Salviae Miltiorrhizae Radix et Rhizoma,SM)水提取物对小鼠细胞色素P450酶(CYPs)主要亚型(CYP1A2,CYP2D22,CYP3A11和CYP2E1)的影响。方法:昆明种雄性小鼠分为5组,分别为正常组,苯巴比妥组,丹参水提取物组(3.9 mg·kg-1·d-1),丹参低、高剂量组(2.6,5.2 mg·kg-1·d-1),连续ig 7 d给药。取各组小鼠的肝脏组织,提取肝脏中RNA以及制备肝微粒体,检测各组小鼠CYP450酶活性,mRNA和蛋白水平的变化。结果:与正常组比较,丹参高剂量组可以显著降低CYP2E1的酶活性,mRNA和蛋白表达的水平(P<0.05),丹参对CYP1A2,CYP3A11,CYP2D22没有显著性影响。结论:参芎葡萄糖注射液中的丹参组分可以影响CYP2E1的酶活性,mRNA以及蛋白的表达。 王文华 杨洋 吴琼 郑林 李黎 何彬 王爱民 李勇军 刘亭关键词:丹参 细胞色素P450酶