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冯晓冬
作品数:
1
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供职机构:
内蒙古大学生命科学学院生物学系
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
农业科学
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合作作者
梁成罡
内蒙古大学生命科学学院生物学系
张鹤龄
内蒙古大学生命科学学院生物学系
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内蒙古大学学...
年份
1篇
1997
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用复制酶基因cDNA探针检测表达病毒外壳蛋白基因马铃薯中的PLRV
1997年
利用马铃薯卷叶病毒(PLRV)复制酶基因3′端长约600bp的cDNA,用缺口平移方法进行32P同位素标记,制备成cDNA探针,通过核酸斑点杂交,对提纯的马铃薯卷叶病毒(PLRV)、病毒RNA、PLRV感染的马铃薯汁液,表达PLRVCP基因的马铃薯叶片及块茎芽进行了检测.结果表明,32P标记的复制酶基因cDNA探针特异性强、灵敏度高.可测得提纯病毒的最低含量为408ng/ml,病毒RNA最低量为27.8pg/ml,未转CP基因接种PLRV的马铃薯叶片提取液的最高稀释度为1375.接种PLRV的转CP基因的抗性马铃薯块茎芽和叶片提取液的最高稀释度为0~1/15.此探针和只转入病毒外壳蛋白基因,不接种PLRV的转基因马铃薯汁液不发生反应.表明,探针只与PLRV基因组RNA特异反应,而不与外壳蛋白基因及其mRNA反应,从而为表达CP基因的转基因马铃薯中PLRV的检测和抗病性鉴定建立了一种可靠的灵敏的分子生物学技术.此项技术已用于转CP基因马铃薯Desire,Favorita。
张鹤龄
梁成罡
冯晓冬
关键词:
CDNA探针
PLRV
马铃薯病毒
外壳蛋白基因
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