邱雯雯
- 作品数：4 被引量：19H指数：3
- 供职机构：湖北中医药大学更多>>
- 发文基金：中西医结合科研计划课题国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 温阳活血利水方含药血清对足细胞组织蛋白酶L、发动蛋白以及微丝、微管的影响被引量：9
- 2018年
- 目的探讨温阳活血利水方治疗原发性肾病综合征蛋白尿的可能作用机制。方法将足细胞分为正常对照组、模型组、地塞米松组、10%中药血清组、20%中药血清组、空白对照组。除正常对照组、空白对照组外,其余各组用氨基核苷嘌呤霉素粉剂制备足细胞损伤模型。正常对照组和模型组加入完全培养基5 ml,地塞米松组加入392μg/L地塞米松5 ml,10%中药血清组、20%中药血清组、空白对照组分别加入10%中药血清、20%中药血清、空白对照血清各5 ml。RT-PCR法与Western blot分别检测各组足细胞胞浆组织蛋白酶L(CatL)、发动蛋白mRNA和蛋白表达含量,并用激光共聚焦观察各组中足细胞骨架微丝、微管的形态结构变化。结果与正常组比较,模型组CatL mRNA与蛋白含量升高,发动蛋白表达含量降低(P<0.01);与模型组比较,各中药血清组与地塞米松组CatL mRNA与蛋白表达含量降低,足细胞发动蛋白蛋白表达含量升高(P<0.01);与10%中药血清组比较,20%中药血清组CatL mRNA与蛋白表达含量降低,发动蛋白表达含量升高(P<0.01)。各组间足细胞发动蛋白mRNA表达含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论温阳活血利水方可能通过下调足细胞CatL的表达,减少CatL对发动蛋白的酶解,从而稳定细胞骨架中的微丝、微管等结构,减少足突融合,改善蛋白尿。
- 陈凤王相相邱雯雯袁军
- 关键词：原发性肾病综合征组织蛋白酶L足细胞
- 温阳活血利水法对嘌呤霉素损伤足细胞的细胞骨架及相关蛋白的影响
- 目的：观察温阳活血利水方含药血清对嘌呤霉素损伤小鼠永生系足细胞组织蛋白酶L（Cathepsin L,CatL）的转录因子Dendrin、膜相关鸟苷酸激酶转化蛋白2(Membrane-associated guanylat...
- 邱雯雯
- 关键词：肾小球疾病足细胞组织蛋白酶L
- 温阳活血利水方含药血清对嘌呤霉素损伤小鼠永生系足细胞组织蛋白酶L表达的影响被引量：10
- 2016年
- 目的观察温阳活血利水方含药血清对嘌呤霉素损伤的小鼠永生系足细胞组织蛋白酶L(Cathepsin L,CatL)表达的影响。方法体外培养小鼠永生系足细胞,将其分为正常对照组、模型组、地塞米松组、10%温阳活血利水方血清组(简称10%中药血清组)、20%中药血清组及中药血清空白对照组。正常对照组以培养液孵育足细胞24 h,模型组应用嘌呤霉素45 mg/L作用于足细胞24 h;在模型组干预基础上,地塞米松组加用地塞米松1μmol/L共孵育24 h;10%及20%中药血清组分别加用10%及20%的中药血清共孵育24h,并设中药血清空白对照组(单用中药血清孵育24 h)。采用细胞免疫荧光染色观察各组足细胞CatL及其底物Synaptopodin荧光表达改变;异硫氰酸荧光素(FITC)-鬼笔毒环肽(phalloidin)染色标记足细胞纤维肌动蛋白(F-actin),并采用F-actin外周环评分(cortical F-actin score,CFS)半定量分析足细胞F-actin分布。结果与正常对照组比较,模型组足细胞Synaptopodin表达水平明显降低,CatL表达水平升高,F-actin排列紊乱,逐渐向细胞外周分布形成F-actin环,CFS评分明显升高(P<0.01)。与模型组比较,地塞米松组、10%、20%中药血清组足细胞Synaptopodin蛋白表达升高,CatL表达水平降低,CFS评分亦降低(P<0.05,P<0.01)。与地塞米松组比较,10%中药血清组Synaptopodin表达降低(P<0.05),20%中药血清组CFS评分明显降低(P<0.05)。结论温阳活血利水方能上调嘌呤霉素损伤的足细胞Synaptopodin表达,下调CatL表达水平,减少骨架蛋白F-actin的重构,有助于稳定足细胞actin骨架,改善足细胞融合。
- 邱雯雯袁军杨柳
- 关键词：嘌呤霉素足细胞组织蛋白酶L
- 温阳活血利水法对足细胞骨架及相关蛋白影响被引量：3
- 2018年
- 目的:观察温阳活血利水方含药血清对嘌呤霉素损伤小鼠永生系足细胞组织蛋白酶L(cathepsin L,Cat L)的转录因子Dendrin、膜相关鸟苷酸激酶转化蛋白2(membrane-associated guanylate kinase inverted2,MAGI-2)、下游底物synaptopodin、Rho A mRNA与蛋白表达变化以及足细胞骨架蛋白actin、中间丝分布情况的影响,探讨温阳活血利水方的作用改善肾病综合征蛋白尿及足突融合的机制。方法:体外培养小鼠足细胞,采用嘌呤霉素45 mg/L、中药含药血清或地塞米松与足细胞孵育12 h,荧光定量PCR检测Cat L、synaptopodinmRNA表达变化; western blotting测定MAGI-2、synaptopodin、Cat L、Rho A的蛋白表达;细胞免疫荧光观察Dendrin的分布以及细胞骨架蛋白微丝和中间丝的荧光分布变化。结果:嘌呤霉素作用足细胞12 h后,Dendrin转核比例增多(与正常组对比P <0. 01),MAGI-2、Rho A、synaptopodin蛋白的表达显著性下降(与正常组对比,均P <0. 01),Cat L mRNA与蛋白的表达显著性升高(与正常组对比,均P <0. 01),synaptopodin mRNA表达没有变化(与模型组比较P> 0. 05),足细胞伪突回缩变短,中间丝和微丝结构紊乱,杂乱无章排列,结构不清晰。地塞米松、10%与20%含药血清干预后Cat L mRNA与蛋白表达减少,MAGI-2、Rho A、synaptopodin蛋白的表达有所增多,Dendrin转核比例减少(与模型组对比,均P <0. 01),均改善了足细胞骨架结构。结论:温阳活血利水方能减少足细胞受损后Dendrin核内转移,降低胞质cat L水平,从而减少synaptopodin降解,使Rho A表达增加,改善微丝(F-actin)和中间丝的重构,稳定细胞骨架结构,减少足突融合,从而减少蛋白尿。
- 孟祥燕邱雯雯王相相袁军
- 关键词：肾小球疾病足细胞微丝中间丝
