马斐斐
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 供职机构：首都儿科研究所更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- TGF-β和IGF-1信号通路调控肾母细胞瘤细胞增殖机制探讨被引量：7
- 2017年
- 目的肾母细胞瘤是一种高发的儿童实体瘤,发病率占儿童恶性肿瘤8%~10%,多发生于<5岁儿童,有研究表明某些信号通路可调控其增殖过程。本研究探讨TGF-β和IGF-1信号通路是否共同参与调控肾母细胞瘤细胞的增殖过程。方法采用siRNA转染实验将TGFBR1-siRNA和IGF1R-siRNA转至肾母细胞瘤细胞株G401,以转染不同siRNA分为TGFBR1-siRNA组和IGF1R-siRNA组,siRNA无关序列(non-siRNA)转染组作为对照组,每组设6个复孔。MTS方法检测TGFBR1-siRNA和IGF1R-siRNA对细胞增殖率的影响,蛋白质印迹法检测TGF-β信号通路TGFBR1及下游蛋白p-ERK、SMAD2/3和p-AKT蛋白表达情况;蛋白质印迹法检测IGF-1信号通路IGF1R及下游蛋白p-AKT蛋白表达情况。ELISA法检测细胞上清中FGF9蛋白表达。结果抑制TGFBR1和IGF1R72和96h后,细胞的增殖率受到抑制,对照组增殖率设为100%。与其相比,转染TGFBR1-siRNA 72h后的实验组和对照组的增殖率分别为(80±14)%和(100±7)%,实验组低于对照组,P=0.034;转染IGF1R-siRNA 72h后实验组和对照组的增值率分别为(85±21)%和(100±7)%,实验组低于对照组,P=0.028。转染TGFBR1-siRNA 96h后的实验组和对照组的增殖率分别为(81±13)%和(100±11)%,实验组低于对照组,P=0.021;转染IGF1R-siRNA 96h后实验组和对照组的增殖率分别为(82±17)%和(100±11)%,实验组低于对照组,P=0.038。抑制TGFBR1后,与non-siRNA组相比,下游蛋白FGF-9、p-ERK、SMAD2/3和p-AKT明显受到抑制。TGFBR1-siRNA转染72h后,实验组细胞上清中FGF9蛋白表达量显著下降,实验组为(533.85±54.64)ρg/mL,对照组为(587.34±46.83)ρg/mL,P=0.041;96h后实验组FGF9蛋白表达量仍显著低于对照组,实验组为(495.03±59.26)ρg/mL,对照组为(605.34±49.28)ρg/mL,P=0.018。TGFBR1-siRNA转染48h后,p-ERK、SMAD2/3和p-AKT蛋白表达量出现降低;72h后,p-ERK和SMAD2/3蛋白表达量仍降低。与non-siRNA转染对照组相比,IGF1R-siRNA转染72和96h后,p-AKT蛋白表达量出现降低。�
- 刘卓何峰李媛媛欧阳胜荣曹丁丁常会波马斐斐吴建新
- 关键词：肾母细胞瘤信号通路IGF1R肿瘤增殖
- 脂肪细胞与免疫细胞在脂肪组织炎症与代谢失调中的作用
- 2016年
- 肥胖和超重的患病率继续上升,发病率和死亡率日益增长,是造成高血压、高脂血症、动脉粥样硬化、2型糖尿病等疾病的关键因素之一。目前,针对肥胖的研究已经深入到分子层面。结果提示,肥胖状态下内脏脂肪组织中的低度、慢性炎症反应被认为是其导致胰岛素抵抗的重要病理生理机制。这篇评论的目的是总结目前先天性免疫细胞和适应性免疫细胞在脂肪组织炎症和免疫细胞失调在肥胖和胰岛素抵抗中的作用,认识免疫炎症与代谢之间关系可能为临床治疗肥胖提供靶向。
- 马斐斐曹丁丁李伟唐认桥吴建新
- 关键词：肥胖炎症免疫细胞
- 趋化因子CXCL1在肥胖小鼠脂肪组织中的表达及意义被引量：1
- 2016年
- 目的探讨趋化因子CXCL1在肥胖小鼠脂肪组织中的表达及意义。方法将20只小鼠随机分为高脂饲料喂养组和普通饲料喂养组,每组10只,分别给予高脂饲料和普通饲料喂养。提取2组小鼠附睾脂肪组织总RNA,应用实时荧光定量聚合酶链反应检测小鼠附睾脂肪组织中CXCL1 mRNA表达水平;成脂诱导脂肪间充质干细胞,酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清液中CXCL1的表达。结果与普通饲料喂养组小鼠比较,高脂饲料喂养组小鼠附睾脂肪组织中CXCL1 mRNA表达显著增加(P=0.001);CXCL1蛋白表达水平随脂肪细胞分化时间延长而逐渐增加。结论小鼠肥胖状态下CXCL1表达明显增加,推测CXCL1在肥胖的发生发展过程中发挥重要作用。
- 马斐斐曹丁丁李伟唐认桥欧阳胜荣吴建新
- 关键词：肥胖脂肪细胞分化炎症趋化因子
- TGFBR1和FGF9蛋白参与miRNA-140-5p调控肾母细胞瘤细胞的增殖过程被引量：2
- 2016年
- 目的本研究拟探讨miRNA-140-5p在肾母细胞瘤增殖过程中的调控作用以及TGF—BR1和FGF9蛋白参与此过程的作用机制。方法采用miRNA芯片技术分析肾母细胞瘤患儿肿瘤组织和瘤旁正常组织的miRNA表达谱，结合生物信息学预测和文献报道，选取表达差异显著的miRNA-140-5p作为研究对象，扩大样本进行Real-time PCR验证；MTS方法检测miRNA-140—5p对细胞增殖率的影响；双荧光素酶实验验证miRNA-140—5p的直接下游靶基因；Western-blot法检测TGF—BR1蛋白表达；ELISA法检测细胞上清中FGF9蛋白表达。结果发现与瘤旁组织相比，miRNA-140—5p在肾母细胞瘤组织和瘤旁正常组织的相对表达量分别为1．69±0．83和6．37±3．25，肾母细胞瘤组miRNA-140-5p的表达量明显降低（P〈0．05）。在肾母细胞瘤细胞株G401及SK-NEP-1中，发现过表达miRNA-140-5p可有效降低G401及SK-NEP-1的增殖率，将miRNA无关序列（miRNA-con）转染组细胞增殖率设为100％，与其相比，转染miRNA-140-5p的G401细胞组的增殖率为（87±15）％比（100±20）％，SK-NEP-1细胞组为（91±12）％比（100±9）％，组间比较，差异均有统计学意义（P值均〈0．05）。利用生物信息学软件对miRNA-140—5p直接下游靶基因进行预测，结合肾母细胞瘤相关基因，选择TGFBR1和FGF9基因为miRNA-140—5p的直接下游靶基因；通过双荧光素酶实验证实miRNA-140—5p可直接靶向TGFBR1和FGF9基因。将miRNA-con转染组TGFBR1蛋白表达量设为1，与其相比，过表达miRNA-140-5p的G401及SK-NEP-1细胞内，TGFBR1蛋白表达量降低（G401细胞降为0．67；SK-NEP-1细胞降为0.87）（P〈0．05）。与miRNA-con转染对照组相比，G401及SK-NEP-1细胞上清中FGF9蛋白表达量下降，G401组为（478．66±66．32）pg／ml比（535．64±78．53）pg／ml，SK-NEP-1细胞组为（486．57±71．01）pg／ml比（601．26±77．68）pg／ml，组间比较，差异均有统计学�
- 刘卓李媛媛欧阳胜荣何峰吴建新常会波马斐斐
- 关键词：肾母细胞瘤基因表达调控增殖
