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16S rRNA基因高通量测序方法检测奶牛场常用干草表面微生物群落结构及多样性被引量：4: 2017年; 【目的】随着中国奶牛业的发展,干草需求量与日俱增。作为天然牧草,干草可以成为家畜传播病原体的载体。以干草表面附着物为研究对象,了解干草中细菌群落结构以及致病菌属特征。【方法】对来自6个不同奶牛场饲草舍的干草样本,应用Illumina Mi Seq高通量测序技术测定干草表面附着物细菌的16S r RNA基因V3-V4变异区序列,分析不同干草样本细菌群落组成。【结果】干草样本中的细菌在97%的相似水平下共得到OTU个数为15 416,涵盖了29门87纲144目219科323属的细菌。微生物多样性分析表明,干草样本具有很高的细菌多样性,不同样本多样性存在差异。对干草样本菌群中丰度较高的14种病原菌属进行分析,发现相较于人工种植牧草制备的干草,天然牧草制备的干草中病原菌属丰度较高。【结论】研究解析了干草样本中微生物的多样性、丰度及主要病原菌属的特征,对奶牛场疾病防控有一定指导意义。; 张阁孙翠丽彭永程汝佳杨宏军朱良全胡莉萍丁家波; 关键词：干草

两种不同保护剂冻干的仔猪副伤寒活疫苗质量比较被引量：1: 2017年; 【目的】系统比较两种不同保护剂冻干的仔猪副伤寒活疫苗(耐热苗和常规苗)质量指标,为科学评价两种疫苗质量提供参考。【方法】制备耐热苗和常规苗各3批,分别进行物理性状、纯粹性、活菌计数、安全性、剩余水分、真空度和保存期等参数测定和比较,同时比较冻干前后的活菌存活率及耐老化性能。任选耐热苗与常规苗1批,按3×109 CFU分别口服与肌肉注射仔猪各5头,设相同条件下不免疫对照5头,30 d后静脉注射致死量猪霍乱沙门氏菌,临床观察30 d后评估疫苗的效力。【结果】耐热苗及常规苗的物理性状、纯粹性、活菌计数、安全性、剩余水分、真空度均符合现行《中国兽药典》的要求。3批耐热苗冻干菌存活率分别为88.2%、83.1%和86.4%,耐老化试验后的活菌存活率为83.6%、82.9%和88.8%;然而3批常规苗冻干菌存活率分别为52.3%、56.2%和61.4%,耐老化活菌存活率分别为58.5%、60.2%和54.7%。经37°C、7 d耐老化试验结果显示,耐热苗物理性状良好,而常规苗原有团块表面凹陷1/4-1/2。保存期结果表明耐热苗4°C有效期可达24个月,常规苗仅为9个月。仔猪免疫攻毒结果表明,耐热苗肌肉注射及口服免疫均达100%(5/5)保护;常规苗肌肉注射达80%(4/5)保护,口服达100%(5/5)保护,不免疫对照0保护(5/5死亡)。【结论】耐热苗具有较高的冻干菌存活率和良好的耐老化性能,4°C可长期保存且不影响其免疫效力。; 朱良全孙晔孙翠丽孙翠丽彭永彭永叶俊贤高强丁家波

通过检测布鲁氏菌特异性抗体亚型鉴别布鲁氏菌疫苗免疫与自然感染: 布鲁氏菌是严重威胁我国公共卫生和动物健康的重要人畜共患病之一.在我国,布鲁氏菌病近年来呈现逐年严重的趋势,疫苗免疫被广泛应用于控制动物布鲁氏菌病.然而我国现行使用的布鲁氏菌活疫苗(S2株和A19株)均为光滑型菌株,对临床...; 冯宇蒋卉张阁孙翠丽朱良全刁有祥丁家波; 关键词：布鲁氏菌病疫苗免疫自然感染; 文献传递

一种用合成培养基分离培养禽结核分枝杆菌的方法: 本发明涉及一种合成培养基分离培养禽结核分枝杆菌的方法。禽结核分枝杆菌培养通常采用的是配氏(Petragnani)固体培养基，该培养基主要成分新鲜脱脂牛奶及鸡蛋的质量受奶牛及鸡蛋来源、新鲜程度、保存时间等因素影响大，造成批...; 朱良全张阁蒋卉冯宇丁家波彭小薇孙翠丽; 文献传递

绵羊红细胞敏感性对补体结合试验的最佳反应时间被引量：2: 2016年; 补体结合试验（CFT）是一种经典的抗原、抗体检测方法,其敏感性、特异性均较高,不仅可用于诊断各种传染病,也可用于鉴定病原体,是免疫学上一个应用较广泛的重要试验[1]。在布鲁氏菌病（布病）的血清学诊断方法中,CFT被世界动物卫生组织（OIE）认可为布病血清学确诊的经典标准方法[2]。在CFT实际操作中经常发现,使用不同保存时间的绵羊红细胞（SRBC）滴定同一批次溶血素和补体时,结果存在较大差异,; 蒋卉彭小薇张阁冯宇张振孙翠丽朱良全丁家波; 关键词：绵羊红细胞敏感性布鲁氏菌补体结合试验

一种布鲁氏菌诊断标识作用的基因表达产物BLSJ-1及其制备方法: 本发明涉及一种布鲁氏菌诊断标识作用的基因表达产物BLSJ‑1及其制备方法。该产物是由布鲁氏菌S2株基因编号(GI)为489054867的基因原核表达，并经谷胱甘肽S转移酶(GST)亲和层析柱与谷胱甘肽梯度洗脱法纯化获得。...; 朱良全丁家波蒋卉彭小薇张磊范学政孙翠丽; 文献传递

布鲁氏菌病荧光偏振抗体检测方法的建立被引量：17: 2017年; 【目的】布鲁氏菌病(Brucellosis)简称布病,是由布鲁氏菌引起的以感染家畜为主的人畜共患传染病,造成严重的公共卫生问题。目前全世界范围内消除该病的主要方法是扑杀与免疫相结合,所以建立快速准确的诊断方法对防治和清除布病非常必要。本文建立布鲁氏菌病荧光偏振(FPA)抗体检测方法,为布鲁氏菌病(布病)的快速高效诊断提供技术手段。【方法】提纯猪种布鲁氏菌S2株脂多糖O链(OPS),经异硫氰酸荧光素(FITC)标记后作为诊断抗原。通过对样品稀释液、抗原稀释度、反应时间等条件的优化,初步建立了布鲁氏菌荧光偏振诊断方法。用该方法对148份布病阳性血清(其中牛血清70份,羊血清78份)和155份布病阴性血清(其中牛血清82份,羊血清73份)进行检测,确定其敏感性和特异性。按确定的技术参数,制备3批布鲁氏菌FPA抗体检测试剂盒,使用质控阴、阳性血清分别评价试剂盒的批内和批间重复性。用400份临床样本比较本研究开发试剂盒与商品化进口FPA试剂盒的符合率。【结果】使用0.5%蔗糖磷酸缓冲液作为血清样品稀释液;标记抗原的使用浓度为90μg/m L;最佳反应时间为3-5 min。本检测方法的判定标准为:δm P值<20时为阴性,δm P值≥20时为阳性。按上述条件建立的FPA检测148份布病阳性血清和155份布病阴性血清,结果敏感性为98.6%,特异性为98.7%。对400份临床样本的比对检测显示,研究建立的FPA方法与进口商品化试剂盒的总符合率为94.0%。【结论】研究建立的布鲁氏菌PFA抗体检测方法具有良好的特异性和敏感性,可作为一种重要的布病诊断快速诊断方法。; 孙翠丽程汝佳张阁程君生朱良全蒋卉丁家波; 关键词：布鲁氏菌特异性敏感性

犬种布鲁氏菌单克隆抗体的制备及其鉴定: <正>[目的]制备抗犬种布鲁氏菌单克隆抗体,为建立犬布鲁氏菌病临床诊断方法奠定基础。[方法]以灭活的犬种布鲁氏菌疫苗株RM6/66免疫Balb/c小鼠后进行细胞融合,并通过微量凝集试验、间接ELISA实验等方法进行筛选,...; 孙翠丽程汝佳张阁冯宇丁家波; 文献传递

16S rRNA基因高通量测序方法检测奶牛场常用干草表面微生物群落结构及多样性: <正>【目的】本研究以干草表面附着物为研究对象,了解干草中细菌群落结构以及致病菌属特征。【方法】对来自7个不同奶牛场饲草舍的干草样本,应用IlluminaMiseq高通量测序技术测定干草表面附着物细菌的16S rRNA基...; 张阁孙翠丽彭永程汝佳彭小薇丁家波; 文献传递

布鲁氏菌病活疫苗(S2株)对不同强毒(M28、2308和S1330)的免疫效力研究: 布鲁氏菌病(布病)是危害严重的人畜共患病,其中牛、羊及猪种布鲁氏菌是人感染布病的主要病原.在我国主要采用猪种布鲁氏菌病活疫苗S2株预防和控制布病的传播,但国际上对S2株能同时诱导牛、羊和猪产生良好免疫保护力存在争议.因此...; 蒋卉冯宇张阁彭小薇张磊彭永孙翠丽朱良全丁家波; 关键词：组织病理攻毒

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孙翠丽

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