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致病疫霉拮抗菌株YR-7的分离鉴定及其活性物质被引量：6: 2016年; 【目的】从黄河边的农田土壤中分离筛选拮抗致病疫霉的粘细菌,鉴定目标菌株,分析其发酵上清液的稳定性及对马铃薯晚疫病菌的抑制效果,为活性物质分离鉴定及抗马铃薯晚疫病菌生物农药的研发奠定基础。【方法】采用兔粪诱导法分离菌株,通过平板对峙法筛选对马铃薯晚疫病菌有拮抗作用的粘细菌,通过形态特征、生理生化特征以及16S r RNA基因序列分析对菌株进行鉴定。采用称重法测定菌株生长曲线,通过平皿法测定菌株不同生长时期发酵上清液对致病疫霉的菌丝生长抑制率和浓缩发酵上清液的稳定性。通过马铃薯离体叶片涂布浓缩发酵上清液和接种病原菌孢子悬浮液法,测定该菌株对马铃薯晚疫病的防病作用。【结果】从土壤样品中共分离获得7株粘细菌,其中4株拮抗致病疫霉,拮抗效果最强的为YR-7菌株,菌丝的生长抑制率为96%,该菌株被鉴定为Myxococcus xanthus。培养7 d后,菌株发酵上清液对致病疫霉的抑制活性趋于稳定。浓缩发酵上清液经30-50°C处理后,对致病疫霉菌丝的生长抑制率可达50.90%,高于50°C时抑菌活性逐渐下降,90°C处理后菌丝的生长抑制率仍可达25.45%。浓缩发酵上清液在p H 4.0-9.0条件下比较稳定,保持40.21%以上菌丝的生长抑制率,当p H<4.0或p H>9.0时,抗菌活性显著降低。活性物质不能被蛋白酶降解,其抗菌活性不受紫外线、自然光照射的影响。对马铃薯离体叶片的生防效果检测表明,YR-7的浓缩发酵上清液处理组叶片相对病斑面积仅为0.35%,对照组的相对病斑面积高达68.19%。【结论】粘细菌菌株YR-7可以产生抗马铃薯晚疫病菌的次生代谢产物,抗菌活性物质具有较好的稳定性,可以有效抑制致病疫霉侵染马铃薯叶片,具有开发成抗马铃薯晚疫病生物农药的潜在价值。; 任兴波武志华崔海辰高向红冯福应刘惠荣; 关键词：致病疫霉拮抗菌株活性物质

马铃薯晚疫病菌拮抗粘细菌YR–35的分离鉴定及其代谢产物稳定性被引量：9: 2016年; 从乌拉山镇的农田土壤中分离获得致病疫霉的高效拮抗菌株YR-35,通过形态特征、生理生化特征以及16S rDNA序列分析将其鉴定为变绿色粘球菌Myxococcus virescens。菌株YR-35对马铃薯晚疫病致病菌菌丝生长抑制率高达96.67%。抗菌活性物质在30～80℃处理1 h后菌丝生长抑制率可达21.70%,高于80℃时活性逐渐下降,90℃处理后菌丝生长抑制率仍然可达15.38%。活性物质在pH 5.0～9.0条件下菌丝生长抑制率保持在25.27%以上,当pH〈5.0或pH〉9.0时,抗菌活性显著降低。活性物质不能被蛋白酶降解,不受紫外线、自然光照射的影响。对马铃薯离体叶片的生防效果检测表明,菌株YR-35的发酵无菌液处理组叶片相对病斑面积仅为0.57%,对照组的相对病斑面积高达87.72%。菌株YR-35的发酵无菌液可以有效抑制致病疫霉侵染马铃薯叶片。本研究首次发现变绿色粘球菌对致病疫霉有显著拮抗活性,为研发有效防治马铃薯晚疫病的生物农药奠定了基础。; 任兴波张子良赵璞钰武志华崔海辰刘惠荣; 关键词：致病疫霉拮抗菌株

由一株紫色杆菌产生的聚乙烯醇降解酶的酶学特性研究: 2017年; 从岱海水样中筛选出一株可以生产聚乙烯醇降解酶的菌株,该菌株可以以聚乙烯醇(PVA)为唯一碳源生长。根据该菌株的形态学特征及其16S r DNA序列分析结果,鉴定其属于詹森菌属(Janthinobacterium sp.),实验室编号为DH-01。从该菌株的发酵液中提取聚乙烯醇降解酶的粗酶液,并对其酶学特性进行研究,考察该酶在细胞内外的分布情况及其适宜的环境条件。实验结果表明:该菌株产生的PVA降解酶在细胞内外均有分布,但PVA降解酶绝大部分分泌至细胞外。该菌株所产的PVA降解酶最适的反应条件为:底物浓度为1.0 g/L,p H为6.5,温度为45℃。该菌株所产的PVA降解酶的酶活在p H值为6.5,温度为35℃时相对比较稳定。粗酶液对浓度为1.0 g/L的PVA溶液有较好的降解作用,反应10 h后,降解率达到82%。; 武志华丁一秀孙志宁郭维维马强刘惠荣; 关键词：聚乙烯醇酶活

大兴安岭地区粘细菌资源的多样性及其生物活性被引量：4: 2018年; 【背景】粘细菌是一类具有社会性行为的高等原核生物,其代谢产物具有丰富、多样、新颖的生物活性,是筛选天然药物的良好资源,具有很大的研究开发应用价值。【目的】分析大兴安岭地区粘细菌资源的多样性;分离纯化可培养的粘细菌,分析其抗菌活性并从中筛选对马铃薯晚疫病菌具有拮抗作用的菌株。【方法】通过变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术对从大兴安岭地区采集的15个土样中粘细菌资源的多样性进行分析,利用兔粪诱导、大肠杆菌划线诱导和滤纸诱导3种方法从土样中分离可培养的粘细菌,结合形态观察、生理生化特征和16S rRNA基因序列分析确定这些菌株的分类地位,通过平板对峙法对其进行抗菌活性分析。【结果】DGGE的分析结果显示,15个土样中共鉴定到13个属的粘细菌,基本覆盖了大部分已知的粘细菌种属以及部分未分类的粘细菌,表现出了丰富的多样性。共分离得到88株菌,从中得到22株纯菌,经鉴定属于2个属(粘球菌属与珊瑚球菌属)8个种(黄色粘球菌、橙色粘球菌、变绿粘球菌、珊瑚粘球菌、具枝粘球菌、大孢珊瑚球菌、弱小珊瑚球菌和珊瑚状珊瑚球菌)。抗菌结果显示:22株纯菌均表现出可以对一种甚至多种指示菌产生抗性,其中19株抑制大肠杆菌的生长,14株抑制马铃薯晚疫病菌的生长,8株抑制金黄色葡萄球菌的生长,13株抑制酿酒酵母菌的生长,7株抑制枯草芽孢杆菌的生长。【结论】内蒙古大兴安岭地区蕴藏着丰富的粘细菌资源,粘球菌属及珊瑚球菌属可能为该地区粘细菌菌群中的优势菌。分离纯化出的粘细菌菌株均表现出抑制一种甚至多种指示菌生长的活性,其中64%的纯菌对马铃薯晚疫病菌产生抗性,具有进一步研究的潜在价值。; 武志华李娜马秀枝董晔郭子文刘惠荣; 关键词：粘细菌多样性 DGGE 抗菌活性

利用PCR-DGGE技术分析内蒙古西部地区土壤细菌的多样性被引量：6: 2019年; 为明确内蒙古西部地区土壤细菌的多样性,利用聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳PCR-DGGE(polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis)技术对170份土壤样品中的细菌丰度和群落结构组成进行了分析,并研究了土壤细菌多样性与肥力参数的关系。结果表明:内蒙古西部地区土壤细菌的多样性是比较丰富的,丰富度指数处于4到60之间,香浓指数处于1.38到4.09之间。不同土壤类型,其细菌的多样性有明显差异。其中,新积土、棕钙土、栗钙土和灰钙土中的细菌多样性指数均高于其他类型土壤,而灰漠土的多样性指数最低。且土壤的不同利用方式也会对土壤细菌多样性有所影响,其中耕地土壤细菌多样性指数最高,而未利用土壤的多样性指数最低。细菌多样性与土壤肥力参数的相关性分析结果显示二者之间并无显著的相关性。内蒙古西部地区土壤中的优势种群包括Proteobacteria(变形菌门)、Bacteroidetes(拟杆菌门)、Firmicutes(厚壁菌门)、Actinobacteria(放线菌门)、Acidobacteria(酸杆菌门)、Gemmatimonadetes(芽单胞菌门)、Nitrospira(硝化螺旋菌门)。可为该地区的土壤生态系统治理与恢复及未来该地区特有微生物资源的开发利用、农业生产指导等提供一定的科学依据。; 武志华夏冬双王雪寒马强唐凯刘惠荣; 关键词：变性梯度凝胶电泳土壤细菌多样性群落结构

粘细菌的活性检测及与环境因子的相关性被引量：1: 2017年; 为筛选具有抗菌活性的粘细菌,利用兔粪诱导、大肠杆菌划线诱导和滤纸诱导3种方法从内蒙古凉城地区采集的20种土样中分离粘细菌,结合形态观察、生理生化特征和分子鉴定方法确定这些菌株的分类地位,通过平板对峙法分析抗菌活性,并采用统计学方法分析其与环境因子的相关性.共分离得到140株菌,包括39株纯粘细菌,经鉴定分别为黄色粘球菌(17株)、橙色粘球菌(13株)、变绿粘球菌(5株),还有4株只鉴定到粘球菌属(Myxococcus sp.).抗菌结果显示:39株纯菌均表现出可以对一种甚至多种指示菌产生抗性,其中37株抑制大肠杆菌的生长,35株抑制马铃薯晚疫病菌的生长,26株抑制金黄色葡萄球菌的生长,20株抑制酿酒酵母菌的生长,19株抑制枯草芽孢杆菌的生长.在分析环境因子与粘细菌分布情况的关系时发现,分离出的溶细菌类群的菌株数、溶纤维素类群的菌株数及总的菌株数与土壤p H和速效钾的含量呈正相关,与含水量呈负相关,与其它参数无明显相关性.综上,内蒙古凉城地区粘细菌的优势菌群为粘球菌属,且绝大多数都有不同程度的抗菌活性;结果可为丰富内蒙古地区粘细菌资源及抗马铃薯晚疫病农药研发奠定基础.; 武志华丁一秀任兴波赵璞钰苏力特刘惠荣; 关键词：粘细菌抗菌活性环境参数

内蒙古凉城地区粘细菌的分离鉴定及活性分析: 粘细菌是一类具有社会性行为的高等原核生物，具有复杂的多细胞行为和形态发生，在细胞分化、发育以及生物进化研究中占有重要的地位。其代谢产物具有丰富、多样、新颖的生物活性，是筛选天然药物的良好资源，具有很大的研究开发应用价值。...; 武志华; 关键词：粘细菌抗菌活性生理生化特征马铃薯晚疫病新药研发; 文献传递

内蒙古中部地区粘细菌分离及其抑制马铃薯晚疫病菌的活性和成分研究: 粘细菌(Myxobacteria)是一类具有社会性行为的高等原核生物,具有复杂的多细胞行为和形态发生,在细胞分化、发育以及生物进化研究中占有重要的地位。其代谢产物具有丰富、多样、新颖的生物活性,是筛选天然药物的良好资源,...; 武志华; 关键词：粘细菌马铃薯晚疫病生防机制; 文献传递

内蒙古西部地区土壤放线菌的多样性分析被引量：1: 2018年; 为明确内蒙古西部地区放线菌的多样性,为未来该地区放线菌资源的开发利用及生态系统的稳定性提供一定的理论基础。本研究从内蒙古西部地区采集土壤样品,提取土壤样品的总DNA,通过巢式PCR扩增放线菌16S rRNA基因片段,利用DGGE （denaturing gradinent gel electrophoresis）技术进行分析,切胶回收,再利用不带GC夹子的引物进行扩增,将PCR产物送往公司测序后对16S rRNA基因序列进行比对,分析内蒙古西部地区放线菌的多样性及其与土壤理化性质之间的相关性。对内蒙古西部地区放线菌多样性分析发现,内蒙古西部地区土壤放线菌的多样性较为丰富,丰富度指数处于10～28之间,其中,棕钙土的丰富度最高,栗褐土的最低;同一地区相同类型土壤中草地的放线菌数量比耕地丰富。放线菌的多样性与有效磷的含量呈显著正相关。经过16S rRNA基因序列比对共得到了7个属的放线菌,包括Saccharopolyspora （糖多孢菌属）、Thermomonospora （高温单孢菌属）、Streptomyces （链霉菌属）、Iamiaceae （酸微菌属）、Corynebacterium （棒杆菌属）、Timonella、Pseudonocardia （假诺卡氏菌属）。通过研究得出内蒙古西部地区的放线菌资源较为丰富,作为应用于抗细菌、抗真菌和抗肿瘤的新型药物中的重要微生物资源,具有进一步研究的价值,继而推动内蒙古西部地区放线菌资源的开发与利用。; 王雪寒夏冬双武志华任兴波丁一秀马强刘惠荣; 关键词：PCR-DGGE 土壤放线菌

三株微枝形杆菌属菌株的分离鉴定及其抗马铃薯晚疫病菌活性分析被引量：3: 2017年; 针对分离自内蒙古自治区巴彦淖尔地区的3株形态一致的菌株BM-9、BM-12和BM-15进行鉴定并分析其抗马铃薯晚疫病菌活性。形态鉴定结果表明,三个菌株菌落形态呈透明或半透明状,颜色为乳白色或肉粉色,表面凸起,边缘光滑,出现完整菌膜,在涂有大肠杆菌的培养基上培养6 d左右可观察到棕色颗粒状物质。细胞呈短杆状,(0.425~0.51)μm×(0.425~1.7)μm。16S r DNA序列分析表明,这三个菌株的16S r DNA序列同微枝形杆菌属(microvirga sp.)的序列相似度均达到98%以上。结合形态特征及16S r DNA序列分析结果,菌株BM-9、BM-12和BM-15属于微枝形杆菌属。三个菌株均有明显的溶大肠杆菌活性及不同程度的抗马铃薯晚疫病菌活性。其中菌株BM-9抗马铃薯晚疫病菌活性最强,平板对峙抑制距离为15 mm,菌丝的生长抑制率达到60%。本研究进一步加深了对微枝形杆菌属的了解,为未来微枝形杆菌属针对性的研究提供了一定的参考。; 赵璞钰任兴波丁一秀武志华刘惠荣; 关键词：拮抗活性马铃薯晚疫病菌

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武志华

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