周晓敏
- 作品数：5 被引量：18H指数：2
- 供职机构：暨南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 目标区域捕获技术鉴定-RP家系USH2A基因的新复合杂合突变被引量：1
- 2016年
- 背景RP为遗传性致盲眼病，其遗传方式和临床表型呈高度异质性，对患者的突变基因进行筛查和诊断对于进一步的基因治疗研究有重要意义。目的利用目标区域捕获技术确定中国一常染色体隐性遗传RP家系成员的临床表型及基因突变方式。方法收集2013年暨南大学附属深圳眼科医院1个汉族RP家系，对该RP家系的4个成员进行眼科检查，抽取家系成员的外周血后，利用华大基因眼科芯片目标区域捕获技术对先证者进行基因突变检测，利用PCR以及Sanger测序法对RP家系中正常表型的成员进行基因突变点验证。结果该家系共3代5名成员，I1、I2、Ⅱ2和Ⅲ1均为表型正常者，Ⅱ1为先证者，自18岁出现夜盲及视力下降，呈管状视野缺损。先证者眼底检查发现视盘呈蜡黄色和视网膜骨细胞样色素沉积，荧光素血管造影可见片状遮蔽荧光和周边视网膜透见荧光。该家系遗传方式符合常染色体隐性遗传。芯片分析发现先证者USH2A基因存在由C．9958G〉T（P．Gly3320Cys）错义突变和C．11156G〉A（P．Arg3719His）错义突变组成的复合杂合突变，而其表型正常的父亲（I1）为C．9958G〉T（P．Gly3320Cys）杂合突变，表型正常的母亲（I2）为c．11156G〉A（P．Arg3719His）杂合突变，表型正常的女儿（Ⅲ1）为c．9958G〉T（P．Gly3320Cys）杂合突变。结论该RP家系可能由USH2A基因的C．9958G〉T和C．11156G〉A复合杂合突变导致。眼科芯片技术可以快速准确地筛查RP常见候选基因。
- 王瑛黄辉樊宁吴静周晓敏殷燕王云刘旭阳
- 关键词：视网膜色素变性常染色体隐性遗传
- 眼病候选基因芯片在一汉族视网膜色素变性家系分子遗传学中的应用被引量：3
- 2015年
- 背景 视网膜色素变性（RP）是一种累及视网膜光感受器细胞及色素上皮细胞的遗传性致盲眼病.RP的发病机制及临床特征较复杂,具有遗传异质性和临床异质性.随着基因组学的迅猛发展,越来越多的研究手段应用于RP致病基因筛查.目的 通过眼科基因芯片测序方法探讨一常染色体遗传RP家系临床表型及其基因突变情况.方法 于2013年6月在重庆市荣昌县收集一汉族RP家系,对该家系所有患者进行眼科检查确诊后,抽取12名家系成员外周静脉血各1 ml,应用华大基因眼科芯片目标区域捕获技术进行基因突变检测.该基因芯片覆盖了眼病相关的基因编码区（包括59个RP候选基因）,选择家系内2例RP患者（Ⅱ5、Ⅱ7）的DNA样本进行目标区域捕获测序.通过生物信息学技术对测序结果进行分析,对共有的变异位点进行Sanger测序验证.结果 该家系为常染色体遗传的RP家系.通过基因芯片分析发现该家系Ⅱ5和Ⅱ7患者存在2个共有基因突变：USH2A （c.3065T＞C,p.Phe1022Ser）突变和PDE6A（c.1699G＞A,p.Ala1319Gly）突变,家系其他成员检测结果表明2个基因突变未与疾病共分离.该眼科基因芯片高通量测序技术虽然未定位该家系致病基因,但快速排除了RP常见候选基因,为进一步分析奠定了研究基础.结论 采用基于目标区域捕获测序的眼科基因芯片技术可以快速、准确地筛查RP常见候选基因,是眼科疾病遗传研究的一项适用且高效的新方法.
- 周晓敏黄辉王瑛吴静樊宁蒋善明刘旭阳
- 关键词：视网膜色素变性基因分子遗传学家系分析
- 基质金属蛋白酶3在晶状体上皮细胞中的表达及其意义被引量：1
- 2012年
- 背景后发性白内障是现代白内障囊外摘出术后导致视力下降的常见并发症。基质金属蛋白酶（MMPs）是参与降解除多糖以外全部细胞外基质（ECM）的重要蛋白酶，探讨MMP-3对后发性白内障的基因治疗一直是研究热点，而纤连蛋白（FN）是MMP-3的主要降解底物，能间接反映MMP-3的表达情况。目的构建pEGFP—N1-MMP-3真核重组质粒并转染晶状体上皮细胞（LECs），观察MMP-3在LECs中的表达，探讨后发性白内障基因治疗的可能性。方法取6只新鲜猪晶状体，将囊膜用组织块法进行原代培养，获得LECs。用E．coli DH5α MMP-3和E．coli DH5α pEGFP—N1质粒构建MMP-3的真核表达重组质粒pEGFP—N1-MMP-3，通过双酶切，DNA测序分析鉴定人MMP-3片段的准确性。将构建的pEGFP—N1-MMP-3转染至猪LECs中，通过绿色荧光蛋白（GFP）间接观察MMP-3在猪LECs中的表达，用Westernb lot法检测pEGFP—N1-MMP-3真核重组质粒转染后LECs表达产物FN的相对表达量，间接评估MMP-3的表达量。结果双酶切鉴定结果符合质粒pEGFP—N1及目的片段MMP-3大小。软件分析测序结果表明，重组质粒pEGFP—N1-MMP-3中的MMP-3基因与GenBank中的人MMP基因序列相似性达99．6％，表示目的片段已正确插入pEGFP—N1载体。原代培养猪LECs，将重组质粒pEGFP—N1-MMP-3转染人猪LECs，荧光显微镜下可见明显的GFP绿色荧光。Western blot检测表明，FN在pEGFP—N1-MMP-3真核重组质粒转染组的表达量为0．666±0．008，空质粒转染组FN的表达量为0．326±0．071，差异有统计学意义（P=0．000）。结论成功构建了pEGFP—N1-MMP-3质粒，并能够在猪LECs中表达，为进一步研究该蛋白在LECs中的表达与功能奠定了基础。
- 杨晶晶何湘珍向浩天周晓敏王云蔡素萍
- 关键词：基质金属蛋白酶3晶状体上皮细胞后发性白内障转染基因疗法
- 青光眼的分子遗传学研究进展被引量：13
- 2015年
- 青光眼是主要致盲眼病,青光眼性视神经退行性病变的特征表现为视网膜神经节细胞（RGCs）凋亡、视神经萎缩和视野缺损,眼压升高是青光眼视神经结构和功能损害主要的危险因素.原发性开角型青光眼（POAG）、慢性闭角型青光眼（CACG）以及剥脱性青光眼（XFG）是全球范围常见的青光眼类型.青光眼受遗传因素、环境因素的共同影响,其中遗传因素在几种主要类型的青光眼发病中均发挥重要作用.近年来,随着人类遗传学研究的快速发展和研究技术的不断提高,人们对青光眼的发病基础有了更多的认识,在青光眼发病相关的基因研究方面取得了较大的进步,一些致病基因及其致病机制相继被揭示.本文中对POAG、CACG、XFG及其他类型青光眼的分子遗传学研究进展进行综述.
- 周晓敏樊宁刘旭阳
- 关键词：突变
- 自媒体商业化平台的客户关系管理策略与潜在问题研究——以“罗辑思维”为例
- 自媒体又称“公民媒体”或“个人媒体”，是指私人化、平民化、普泛化、自主化的传播者，以现代化、电子化的手段，向不特定的大多数或者特定的单个人传递规范性及非规范性信息的新媒体的总称。自媒体的平台包括：博客、微博、微信、百度官...
- 周晓敏
- 关键词：自媒体客户关系管理
