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基质金属蛋白酶3在晶状体上皮细胞中的表达及其意义被引量：1: 2012年; 背景后发性白内障是现代白内障囊外摘出术后导致视力下降的常见并发症。基质金属蛋白酶（MMPs）是参与降解除多糖以外全部细胞外基质（ECM）的重要蛋白酶，探讨MMP-3对后发性白内障的基因治疗一直是研究热点，而纤连蛋白（FN）是MMP-3的主要降解底物，能间接反映MMP-3的表达情况。目的构建pEGFP—N1-MMP-3真核重组质粒并转染晶状体上皮细胞（LECs），观察MMP-3在LECs中的表达，探讨后发性白内障基因治疗的可能性。方法取6只新鲜猪晶状体，将囊膜用组织块法进行原代培养，获得LECs。用E．coli DH5α MMP-3和E．coli DH5α pEGFP—N1质粒构建MMP-3的真核表达重组质粒pEGFP—N1-MMP-3，通过双酶切，DNA测序分析鉴定人MMP-3片段的准确性。将构建的pEGFP—N1-MMP-3转染至猪LECs中，通过绿色荧光蛋白（GFP）间接观察MMP-3在猪LECs中的表达，用Westernb lot法检测pEGFP—N1-MMP-3真核重组质粒转染后LECs表达产物FN的相对表达量，间接评估MMP-3的表达量。结果双酶切鉴定结果符合质粒pEGFP—N1及目的片段MMP-3大小。软件分析测序结果表明，重组质粒pEGFP—N1-MMP-3中的MMP-3基因与GenBank中的人MMP基因序列相似性达99．6％，表示目的片段已正确插入pEGFP—N1载体。原代培养猪LECs，将重组质粒pEGFP—N1-MMP-3转染人猪LECs，荧光显微镜下可见明显的GFP绿色荧光。Western blot检测表明，FN在pEGFP—N1-MMP-3真核重组质粒转染组的表达量为0．666±0．008，空质粒转染组FN的表达量为0．326±0．071，差异有统计学意义（P=0．000）。结论成功构建了pEGFP—N1-MMP-3质粒，并能够在猪LECs中表达，为进一步研究该蛋白在LECs中的表达与功能奠定了基础。; 杨晶晶何湘珍向浩天周晓敏王云蔡素萍; 关键词：基质金属蛋白酶3 晶状体上皮细胞后发性白内障转染基因疗法

基质金属蛋白酶-3（MMP-3）在晶状体上皮细胞的表达: 目的本实验通过构建MMP-3真核表达质粒，探究pEGFP-N1与MMP-3能否成功构建真核重组质粒。通过原代培养的方法培养猪晶状体上皮细胞，进而将构建的真核重组质粒pEGFP-N1-MMP-3转染入培养好的晶状...; 杨晶晶; 关键词：MMP-3 PEGFP-N1 晶状体上皮细胞转染; 文献传递

基质金属蛋白酶与眼科疾病的研究进展被引量：2: 2011年; 基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)属于Zn2+和Ca2+依赖性内肽酶家族,是参与降解细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的最重要的蛋白酶。因其参与了多种眼科疾病的病理过程,故对其活化与抑制,以及如何高表达进行研究,可为预防和控制各类眼科疾病的发生发展提供崭新的研究方向,现就其最近的科研进展做一综述。; 杨晶晶何湘珍; 关键词：基质金属蛋白酶基质金属蛋白酶组织抑制剂眼科疾病

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杨晶晶

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