杨家兴
- 作品数：3 被引量：9H指数：1
- 供职机构：中国科学院天津工业生物技术研究所更多>>
- 发文基金：天津市科技计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 一种内切葡聚糖酶及其应用
- 本发明涉及基因工程技术领域，具体提供了一种来源于粉红粘帚霉的新型内切葡聚糖酶。本发明构建的重组菌株黑曲霉G1‑245能高效重组表达所述新型内切葡聚糖酶，其发酵上清液酶活约为400U/mL，蛋白表达量约为0.99mg/mL...
- 王华明杨家兴
- 文献传递
- 一种内切葡聚糖酶及其应用
- 本发明涉及基因工程技术领域，具体提供了一种来源于粉红粘帚霉的新型内切葡聚糖酶。本发明构建的重组菌株黑曲霉G1-245能高效重组表达所述新型内切葡聚糖酶，其发酵上清液酶活约为400U/mL，蛋白表达量约为0.99mg/mL...
- 王华明杨家兴
- 文献传递
- 葡萄穗霉中β-甘露聚糖酶基因在黑曲霉中的表达及酶学性质被引量：9
- 2016年
- 【目的】以黑曲霉(Aspergillus niger)为宿主菌来表达葡萄穗霉(Stachybotrys chartarum)中的β-甘露聚糖酶(β-mannanase)基因。【方法】通过对葡萄穗霉全基因组进行比对分析,获得编码β-甘露聚糖酶基因s16942和s331的序列信息,通过设计引物,PCR扩增得到基因s16942和s331,连接到载体pGm上,并转化到黑曲霉中,获得的转化子经过amdS二筛平板复筛,测序验证,得到高效表达此基因的工程菌株G1-pGm-s16942和G1-pGm-s331。【结果】SDS-PAGE检测结果显示,G1-pGm-s16942和G1-pGm-s331表达的蛋白分子量大小分别约为48 kDa和60 kDa,且阴性对照中没有此条带。粗酶液的酶学性质表明,G1-p Gm-s16942表达的β-甘露聚糖酶的最适反应温度为60°C,最适反应pH为7,粗酶液的酶活最高达521 U/mL;G1-p Gm-s331表达的β-甘露聚糖酶的最适反应温度为50°C,最适反应pH为7,粗酶液的酶活最高达84 U/mL。【结论】本研究首次将葡萄穗霉的β-甘露聚糖酶基因转化到黑曲霉中并成功表达,并且具有较高的活性。
- 杨家兴王华明路福平
- 关键词：Β-甘露聚糖酶黑曲霉重组蛋白表达
