张文新
- 作品数：4 被引量：8H指数：1
- 供职机构：天津医科大学总医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 外泌体靶向运载整合素αv/β3的小干扰RNA对未分化甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
- 2024年
- 目的探讨通过外泌体靶向运载整合素αv/β3小干扰(si)RNA(si-αv/β3)对未分化甲状腺癌(ATC)细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法采用蛋白质印迹法(Western blot)检测整合素αv/β3在ATC细胞系(8505C、Hth7)及人正常甲状腺细胞(上海生命科学院细胞所)中的表达;将含内化精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸多肽(iRGD)的质粒转染人源胚胎肾细胞HEK-293T后采用超高速离心法得到靶向外泌体,采用PKH26染色验证其靶向性;进一步通过转染获得靶向运载si-αv/β3的外泌体iRGD-exos-si-av/β3(载siRNA组),将其同8505C细胞共孵育后,采用荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和Western blot检测载siRNA组与空载外泌体组8505C细胞内整合素αv/β3的mRNA和蛋白表达水平。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、划痕实验和Transwell检测8505C细胞的增殖、迁移及侵袭能力。两样本间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果整合素αv/β3在8505C及Hth7细胞中的表达量显著高于人正常甲状腺细胞(αv:1.04±0.12、0.90±0.11比0.31±0.01,F=50.11,P<0.01;β3:0.93±0.23、0.89±0.16比0.33±0.27,F=6.81,P<0.05)。iRGD靶向外泌体在细胞中的荧光信号明显高于非靶向外泌体组(47.18±10.39比5.64±1.43,t=6.86,P<0.05)。转染si-αv/β3至8505C细胞后,mRNA水平表达显著低于对照组(αv:0.20±0.01比1.21±0.14,t=12.49,P<0.05;β3:0.21±0.02比1.01±0.18,t=7.90,P<0.05);蛋白表达水平亦显著低于对照组(αv:0.45±0.03比0.88±0.06,t=10.33,P<0.05;β3:0.48±0.09比1.10±0.11,t=9.02,P<0.05)。iRGD-exos-si-av/β3与空载外泌体组分别与8505C细胞共孵育后,前者mRNA水平表达明显低于空载组(αv:0.30±0.08比1.05±0.02,t=16.75,P<0.05;β3:0.27±0.05比1.29±0.20,t=8.71,P<0.05);蛋白水平表达亦低于对照组(αv:0.60±0.30比1.20±0.23,t=5.72,P<0.05;β3:0.24±0.11比1.26±0.14,t=16.23,P<0.05)。载si-αv/β3的靶向外泌体组的细胞增殖率在不同时间点均明显低于空载组[载si-αv组:12
- 张文新李宁王深常鹏鹏李伟健王慧贾强谭建张瑞国
- 关键词：外泌体甲状腺癌小干扰RNA
- 氟哌噻吨美利曲辛联合益生菌治疗肠易激综合征的疗效观察
- ：探讨黛力新(氟哌噻吨美利曲辛片)联合益生菌对肠易激综合征的疗效. 方法：采用前瞻性、随机、对照方法,2015年1月-2015年6月就诊于天津医科大学总医院的肠易激综合征患者120例,随机分为2组,联合治疗组(n=...
- 张文新孙玫
- 关键词：肠易激综合征氟哌噻吨美利曲辛益生菌临床药理
- 氟哌噻吨美利曲辛联合益生菌及促动力药治疗功能性便秘的临床观察被引量：7
- 2015年
- 目的探讨黛力新（氟哌噻吨美利曲辛片）联合益生菌及促动力药对功能性便秘的疗效。方法采用前瞻性、随机、对照方法,2015年1-6月就诊于天津医科大学总医院消化科的功能性便秘患者120例,随机分为2组,联合治疗组（n=60例）和对照组（n=60例）,对照组予双岐杆菌三联活菌,0.42g,3次/d,莫沙必利,5 mg,3次/d,联合治疗组在上述基础上加用黛力新,1片,2次/d,疗程8周;分别于入组、第8周末评估排便情况、情绪状态以及睡眠质量。结果治疗8周后,联合治疗组疗效显著优于对照组（P〈0.01）;联合治疗组焦虑及抑郁指数较对照组明显降低、睡眠质量显著改善（P〈0.01）。结论氟哌噻吨美利曲辛联合益生菌及促动力药能够有效治疗功能性便秘,且伴有情绪及睡眠质量改善。
- 张文新孙玫
- 关键词：便秘氟哌噻吨益生菌
- 构建多功能外泌体用于治疗未分化甲状腺癌被引量：1
- 2022年
- 目的观察131I标记、内化精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸多肽(iRGD)靶向的多功能外泌体(iRGD-Exo-131I)对未分化甲状腺癌(ATC)细胞的杀伤作用。方法蛋白印迹检测Hth7、Cal-62(购自上海生命科学院细胞所)两种ATC细胞中整合素αvβ3的表达;设计包含酪氨酸、iRGD肽段及外泌体膜蛋白(Lamp2b)基因的质粒,将其转染HEK-293T(天津医科大学肿瘤医院)细胞后利用超高速离心法得到靶向外泌体(iRGD-Exo);共聚焦显微镜观察Hth7细胞对靶向及无靶向外泌体的摄取情况;氯胺T法制备iRGD-Exo-131I;细胞毒性实验验证iRGD-Exo的细胞安全性,并比较131I标记的靶向及无靶向外泌体对Hth7细胞的毒性;构建Hth 7荷瘤鼠模型,当瘤体直径约8 mm时按随机数字表法分为4组(每组5只),分别尾静脉注射磷酸盐缓冲液、无靶向外泌体(blank-Exos)、blank-Exos-131I或iRGD-Exos-131I溶液,在注射后不同时间点(0、3、6、9、12、15、18 d)记录瘤体体积及荷瘤鼠体重。采用两样本t检验、单因素方差分析统计数据。结果整合素αvβ3在Hth7、Cal-62细胞中明显高表达。共聚焦实验显示外泌体经iRGD修饰后可增强Hth7细胞对其的摄取能力。iRGD-Exo-131I的标记率为(50.16±4.21)%,放化纯>95%。共孵育48 h后,131I标记的靶向与无靶向外泌体组Hth7细胞存活率均显著低于游离Na131I组[靶向组:(40.97±6.55)%比(83.80±5.21)%,t=12.531,P<0.05;无靶向组:(67.32±8.92)%比(83.80±5.21)%,t=3.912,P<0.05];且无靶向组高于靶向组[(67.32±8.92)%比(40.97±6.55)%,t=5.833,P<0.05];动物实验亦证实iRGD-Exo-131I能更有效地抑制ATC细胞的增殖。结论成功制备iRGD-Exo-131I,且该标志物较稳定,靶向性良好;体外及体内实验证实其能有效杀伤ATC细胞。
- 张瑞国王聪聪李宁侯莎莎张文新张如意申一鸣孟召伟贾强谭建
- 关键词：外泌体碘放射性同位素同位素标记未分化甲状腺癌
