董悦
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：佳木斯大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林大学研究生创新基金资助更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 聚乙烯亚胺介导miR-2861模拟物转染MC3T3-E1细胞的体外成骨分化被引量：1
- 2016年
- 目的:通过非病毒载体聚乙烯亚胺(PEI)介导miRNA-2861(miR-2861)模拟物转染MC3T3-E1细胞系,探讨miR-2861/PEI复合物在前成骨细胞中的转染效率及其对细胞增殖和成骨向分化的影响。方法:将适量的PEI分别与miR-2861和阴性对照(NC)以元素N/P=10的比例混合形成基因/载体复合物。将miR-2861/PEI复合物作为实验组,NC/PEI复合物作为阴性对照组以排除人工合成的双链基因对成骨作用的干扰。采用MTT法筛选PEI复合miR-2861模拟物的最佳使用浓度;应用荧光成像和茎环法RT-PCR技术分别检测10、30、50和100nmol·L^(-1) miR/PEI复合物对MC3T3细胞的瞬时转染效率和miR-2861的表达情况;采用qRT-PCR技术和茜素红染色检测用选定浓度瞬时转染miR-2861/PEI复合物作用下MC3T3细胞的成骨能力。结果:与空白对照组比较,100nmol·L^(-1) miR-2861/PEI复合物作用72h时MC3T3细胞增殖率明显下降(P<0.05)。随转染浓度增加,miR-2861/PEI复合物在MC3T3细胞中的转染效率逐渐升高。茜素红染色及定量分析,实验组诱导21d后出现较多的钙盐沉积结节,而空白对照组和阴性对照组均较少。结论:以PEI作为载体可使miR-2861模拟物有效转染MC3T3-E1细胞并在细胞中高表达,miR-2861模拟物具有一定的促MC3T3-E1细胞成骨向分化的作用。
- 方滕姣子刘杰顾中一宫海环布文奂董悦孙宏晨
- 关键词：聚乙烯亚胺成骨分化
- 碳点在成骨细胞系内跨膜转运机制的研究被引量：1
- 2017年
- 目的探讨碳点(carbon dots,CDs)在MC3T3-E1内的跨膜转运机制与其特点。方法抗坏血酸(ascorbic acid,AA)和聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)采用一步微波法制备出荧光CDs。使用MTT法检测CDs对MC3T3-E1增殖的影响,流式细胞术观察MC3T3-E1对CDs的细胞摄取过程,同时观察时间、浓度、温度、跨膜抑制剂及能量抑制剂对CDs跨膜转运的影响。应用原子力显微镜观测在CDs跨膜转运的过程中细胞膜表面形态结构变化。结果 CDs在加入后15min被MC3T3-E1摄取,分布均匀,受时间、浓度、温度和各抑制剂影响,细胞摄取率随时间延长和剂量递增而变化。与对照组相比,低温4℃组能量抑制剂-叠氮化钠(sodium azide,SA)组细胞摄取率显著降低(P<0.01),网格蛋白抑制剂-氯丙嗪(chlorpromazine,CPZ)组细胞摄取率明显降低(P<0.05),无血清培养基(serum-free medium,SFM)组细胞摄取率显著升高(P<0.01)。在细胞摄取15min时细胞膜表面出现大小均匀的凹陷。结论 CDs在MC3T3-E1内的细胞摄取是一个时间、剂量依赖性且耗能的动态过程。血清抑制细胞摄取。CDs主要通过网格蛋白途径进入细胞。
- 董悦郑嵘布文奂刘杰余彦衡高旭广孙宏晨吴立鹏
- 关键词：成骨细胞系
