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mirRNA-17-5p抑制物对骨肉瘤细胞系SOSP_9607增殖和凋亡的影响被引量：1: 2010年; 目的:探讨miR-17-5p抑制物对于骨肉瘤细胞系SOSP_9607细胞增殖和凋亡的影响。方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖,进一步计算抑制率,流式细胞仪测定细胞凋亡。将SOSP_9607细胞分为对照组和实验组,对照组分为阴性对照和正常细胞对照组。实验组采用miR-17-5p抑制物(hsa-miR-17-5pinhibitors)抑制SOSP_9607细胞内miR-17-5p的活性。结果:与对照组相比,实验组显著抑制SOSP_9607细胞的增殖,有明显的剂量依赖性(P<0.01)。随着浓度从50nmol/L逐渐增加至200nmol/L,抑制率逐渐增高(P<0.01)。实验组凋亡率(9.6±1.8)%与阴性对照组凋亡率(3.5±0.4)%相比明显增高(P<0.01)。结论:miR-17-5p抑制物通过抑制SOSP_9607细胞中miR-17-5p的活性对SOSP_9607细胞的增殖和凋亡发挥重要作用。; 赵广义赵健高杰许啸闫康吴家昌杨彤涛马保安; 关键词：骨肉瘤细胞增殖细胞凋亡

当前我国循证护理中存在的问题分析及对策: 目的探讨当前我国循证护理中存在的问题。方法采用中文版循证护理实践障碍量表对西安市4所三级甲等综合医院100名护士(包括骨科、麻醉科、儿科、心内科、普外科、神经外科、神经内科、消化科、呼吸科、妇产科共10各科室，各医院每个...; 张子茹赵健; 关键词：循证护理护理素质

miR-21真核表达载体的构建及其活性鉴定被引量：4: 2009年; 目的:构建miR-21的真核表达载体,并使其在骨肉瘤MG63细胞中表达,为研究miR-21对骨肉瘤细胞MG63的作用打下基础。方法:根据miRNA的成熟序列以及附近约200多碱基共433个碱基序列,设计PCR引物,PCR扩增,退火后用T4连接到线性化的pcDNA3.1(+)质粒中,并对重组质粒进行双酶切、菌落PCR及测序分析,鉴定完全正确的重组质粒转染骨肉瘤细胞MG63,G418(400 mg/L)筛选4周获得miR-21稳定表达细胞系,用Northern blot及real time RT-RCR法鉴定pcDNA3.1(+)-miR-21可在真核细胞中过表达。结果:成功构建了miR-21的真核表达载体,并获得稳定转染重组质粒的细胞系。结论:miR-21的真核表达载体在骨肉瘤细胞MG63中稳定高表达,为进一步研究miR-21在骨肉瘤MG63中的功能及基因调控机制奠定了实验基础。; 赵健闫康高杰赵广义杨彤涛范清宇马保安; 关键词：PCDNA3.1(+)真核表达载体 MIR-21 转染

microRNA-192抑制物对骨肉瘤细胞系SOSP_9607增殖和凋亡的影响被引量：5: 2010年; 目的:探讨miR-192抑制物对于骨肉瘤细胞系SOSP_9607细胞增殖和凋亡的影响。方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率,流式细胞仪测定细胞凋亡和周期。将SOSP_9607细胞分为对照组和实验组,对照组分为阴性对照和正常细胞对照组。实验组采用miR-192抑制物(hsa-miR-192inhibitors)抑制SOSP_9607细胞内miR-192的活性。结果:与对照组相比,实验组显著抑制SOSP_9607细胞的增殖,有明显的剂量依赖性(P<0.01)。随着浓度从50nmol/L逐渐增加至200nmol/L,抑制率逐渐增高(P<0.01)。与对照组相比,实验组细胞周期G_0/G_1细胞比例显著增加,G_2/M期细胞比例显著减少,S期细胞比例显著减少(P<0.01)。实验组凋亡率(13.6±2.1)%与阴性对照组凋亡率(7.1±0.5)%相比明显增高(P<0.01)。结论:miR-192抑制物通过抑制SOSP_9607细胞中miR-192的活性对SOSP_9607细胞的增殖和凋亡发挥重要作用,可能成为骨肉瘤生物治疗的新靶点。; 赵广义赵健李伟高杰杨彤涛裘秀春范清宇马保安; 关键词：骨肉瘤细胞增殖细胞凋亡

人miR-34a真核表达载体的构建及其表达被引量：5: 2009年; 目的:构建人miR-34a的真核表达载体,并使其在骨肉瘤SOSP-9607细胞中表达。方法:从人骨肉瘤SOSP-9607细胞基因组DNA中用PCR法扩增出miR-34a的前体序列,并引入酶切位点和保护碱基,双酶切后定向插入真核表达载体pcD-NA3.1(+)中,构建miR-34a真核表达载体pcD-NA-miR34a,然后进行菌落PCR、酶切和测序鉴定。同时用构建好的载体pcDNA-miR34a转染骨肉瘤细胞SOSP-9607细胞,筛选miR-34a稳定表达细胞系,用Northern blot及realtimeRT-RCR法鉴定pcD-NA-miR34a可于真核细胞中过表达miR-34a的生物学特性。结果:成功构建了人miR-34a真核表达载体pcDNA-miR34a。pcDNA-miR34a可于骨肉瘤SOSP-9607细胞中上调miR-34a的表达,获得了miR-34a高表达骨肉瘤细胞系。结论:miR-34a的真核表达载体可在骨肉瘤细胞SOSP-9607细胞中有效表达,为进一步研究miR-34a在骨肉瘤中的功能及基因调控机制奠定了实验基础。; 闫康赵健高杰许啸杨彤涛裘秀春范清宇马保安; 关键词：微RNAS MIR-34A 基因表达骨肉瘤

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赵健