陈竞
- 作品数：12 被引量：16H指数：3
- 供职机构：延边大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 气肿疽梭菌多克隆抗体的制备及Dot-ELISA检测方法的建立被引量：3
- 2018年
- 为建立快速有效的气肿疽检测方法,制备气肿疽梭菌多克隆抗体。以斑点酶联免疫吸附方法,筛选出最佳工作条件,确定抗体最佳稀释度为1∶1 024;可检测到最低菌体抗原量为3.125μg,最低分泌抗原量为1.89μg;最适酶标二抗浓度为1∶4 000。应用该方法检测20份死于气肿疽的豚鼠脏器,其中肝脏、脾脏、心脏、肺脏、肾脏、肌肉阳性率分别为95%、95%、90%、90%、85%和90%;与琼脂免疫扩散试验(AGID)法相比,灵敏度是其40倍。该试验成功建立了检测气肿疽病原体的Dot-ELISA方法。
- 张皓姜永越陈竞于建华金鑫
- 关键词：气肿疽梭菌多克隆抗体DOT-ELISA
- 气肿疽梭菌NanA基因克隆及生物信息学分析被引量：1
- 2020年
- 为了对气肿疽梭菌NanA基因进行克隆及生物信息学分析,试验根据GenBank中已发表的气肿疽梭菌NanA基因序列设计并合成1对特异性引物,以气肿疽梭菌总DNA为模板,扩增出NanA目的基因并克隆至pMD18-T载体中,对测序正确的NanA基因进行序列对比分析,对NanA蛋白进行理化性质分析与二级结构预测,同时使用在线软件预测NanA蛋白三级结构。结果表明:成功扩增出气肿疽梭菌Nan A基因,与参考序列相比,共存在3处核苷酸突变,核苷酸序列和氨基酸序列与NCBI公布的JF4135 NanA基因序列的同源性均为99.8%。NanA蛋白分子质量约为71 ku,具有较高的抗原指数,二级结构以β-折叠和无规则卷曲为主,有多个抗原表位区域。
- 于成东罗永仁姜永越马玉腾张皓陈竞李成辉方程金鑫
- 关键词：气肿疽梭菌基因扩增克隆
- 猪源IFN-λ3的克隆、表达及抗病毒活性分析被引量：1
- 2019年
- 为了解猪源IFN-λ3的体外抗病毒活性,本研究利用RT-PCR技术从猪肺巨噬细胞(CRL2845)中扩增获得猪源IFN-λ3基因(pIFN-λ3),并将pIFN-λ3基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1,构建重组质粒pCDNA3.1-pIFN-λ3,利用脂质体转染293细胞。48 h后通过Western blot分析pIFN-λ3瞬时表达情况,取转染后上清分别作用于PK15、MDCK细胞进行pIFN-λ3抗病毒活性分析。结果显示,本研究成功扩增获得pIFN-λ3基因,并在293细胞内成功表达;瞬时表达能够抑制表达绿色荧光蛋白的重组水泡性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus-green fluorescent protein,VSVG)在PK15、MDCK细胞上的增殖。本研究结果为深入研究猪源IFN-λ3在宿主抗病毒免疫和黏膜免疫中的作用机理及其应用提供参考和依据。
- 陈竞许汪宋利娜郝鹏飞姜宇航付婷婷金鑫金鑫李昌
- 关键词：抗病毒活性
- 动物病毒性疾病疫苗的研究进展
- 2018年
- 畜禽养殖在农业经济的发展和建设中有着非常重要的地位,畜禽病毒性疾病也是目前造成畜禽养殖业损失的一大类疾病,因此,畜禽病毒性疾病防治水平的发展和提高对畜禽养殖的效益具有积极意义。目前来看,疫苗接种仍然是防控疾病的最有效措施之一。本文对动物病毒性疾病疫苗的研究方法做了整理和归纳,以期为今后的研究提供参考。
- 陈竞
- 关键词：动物病毒性疾病疫苗
- 气肿疽梭菌NanA基因核酸疫苗的免疫效果评价被引量：2
- 2019年
- 为了检测气肿疽梭菌NanA基因核酸疫苗的免疫效果,在成功构建pVAX1-NanA真核表达重组质粒的基础上将其转染至Vero细胞,通过间接免疫荧光鉴定其表达,并将成功构建的pVAX1-NanA质粒大量提取后免疫Balb/c小鼠,设置pVAX1-NanA核酸疫苗组、pVAX1空载体组和PBS对照组。对小鼠采血并分离血清,用ELISA测定血清中的IgG、IgG1、IgG2a抗体水平和IFN-γ、IL-4细胞因子水平;第3次免疫2周后,用流式细胞仪测定小鼠脾脏中的CD4^+和CD8^+T细胞水平。结果表明,pVAX1-NanA核酸疫苗免疫Balb/c小鼠后,小鼠血清中IgG、IgG1、IgG2a的抗体水平极显著高于pVAX1空载体组和PBS对照组(P<0.01);IFN-γ和IL-4细胞因子水平极显著高于pVAX1空载体组和PBS对照组(P<0.01);CD4^+、CD8^+T细胞分析表明,pVAX1-NanA免疫组的CD4^+和CD8^+T细胞水平显著高于pVAX1组和PBS对照组(P<0.05),pVAX1-NanA核酸疫苗组的CD4^+/CD8^+T细胞比值高于pVAX1空载体组与PBS对照组(P<0.05),pVAX1空载体组和PBS对照组之间无显著差异(P>0.05)。试验成功制备了pVAX1-NanA核酸疫苗,且pVAX1-NanA核酸疫苗可刺激Balb/c小鼠产生体液免疫和细胞免疫。
- 陈竞张皓马玉腾于成东齐强金鑫
- 关键词：气肿疽梭菌核酸疫苗免疫原性
- 气肿疽梭菌CctA基因的真核表达被引量：1
- 2018年
- 为了控制延边地区气肿疽病的发病率,制备出有效的核酸疫苗,根据NCBI上气肿疽梭菌细胞毒素A(CctA)的基因序列设计出一对特异性引物。将PCR扩增的CctA基因克隆到pMD19-Tsimple载体,对测序正确的基因进行序列分析,再次克隆至pcDNA3.1-1真核表达载体,并且将其转染Vero细胞。结果表明,pcDNA3.1-CctA组通过转染后的细胞存在绿色荧光的现象,同时pcDNA3.1-CctA重组质粒表达的产物大小约19ku,说明Vero细胞中的pcDNA3.1-CctA质粒成功表达了CctA蛋白。
- 陈竞齐强罗永仁张皓李成辉任春宇车达姜永越于建华金鑫
- 关键词：气肿疽梭菌真核表达
- 气肿疽研究综述被引量：2
- 2018年
- 近年来,国内外对于气肿疽的研究逐渐深入,尤其在构建气肿疽快速诊断检测方法方面取得了很大进展。为了提高人们对气肿疽的认识与了解,笔者结合国内外与气肿疽相关的参考文献,从病原学特点、主要临床症状及病理变化、流行病学特点、致病机理、检测方法、防控措施等方面进行了详细的综述。
- 于建华张皓陈竞金鑫
- 关键词：气肿疽病原学特点临床症状病理变化防控措施
- 一例犬胫骨骨折的诊断及髓内针联合外固定支架的治疗被引量：3
- 2018年
- 骨折是骨组织的整体性、连续性由于外力和病理性因素破坏,使软组织受到不同程度的伤害,如神经血管、肌肉断裂挫伤、皮肤破裂等,但一般以血肿为主。骨折的固定有两种方法,第一种是外固定,第二种是内固定。内固定治疗骨折所需要的手术器材有髓内针、骨螺钉、金属丝和接骨板等,外固定需要硬化绷带、夹板绷带、改良托马斯绷带等,在正常情况下都应使用内固定对骨折进行开放复位治疗。
- 陈竞张皓李成辉于建华金鑫
- 关键词：骨折胫骨骨组织
- 蓝舌病毒RT-PCR检测方法的建立及对云南省库蠓蓝舌病流行病学检测被引量：1
- 2019年
- 建立蓝舌病毒(bluetongue virus,BTV)RT-PCR检测方法,用于2018年云南省库蠓的蓝舌病(BT)流行病学检测。设计2对保守引物,优化RT-PCR方法的退火温度、循环次数、退火时间和延伸时间,并进行灵敏性和特异性评价。采集了昭通市3个县及普洱市澜沧县的BT传播媒介库蠓共25万余只,进行研磨后,用建立的RT-PCR方法检测样本。筛选出1对引物BTVS10-F和BTVS10-R作为蓝舌病毒RT-PCR检测引物,敏感度达到10^(2.5) TCID_(50)/0.1 mL,通过对BTV16型的阳性病毒检测,证实该方法的可行性。
- 李成辉肖朋朋赵冠宇张克龙李卓昕南福龙陈竞陈竞张涵韩继成金鑫金鑫鲁会军金宁一
- 关键词：蓝舌病RT-PCR库蠓
- 猪口蹄疫的发生与治疗被引量：4
- 2018年
- 生猪常见病害是影响生猪质量的主要原因,也是造成养殖户经济效益下降甚至是带来严重损失的关键性因素。例如猪口蹄疫病,具有很强的流行性,一旦发病,后果不堪设想。本文主要就猪口蹄疫病的诊断预防进行了总结,仅供广大养殖户借鉴参考。
- 程一丹张皓陈竞金鑫
- 关键词：猪口蹄疫
