杨琰
- 作品数：14 被引量：75H指数：4
- 供职机构：浙江中医药大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金新世纪高等教育教学改革工程更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 黄芪甲苷上调miR-199a-5p表达抑制氧糖剥夺/再灌注诱导的神经干细胞凋亡被引量：1
- 2022年
- [目的]探讨黄芪甲苷是否通过上调miR-199a-5p抑制氧糖剥夺/再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)诱导的神经干细胞凋亡。[方法]分离14 d胎龄SD大鼠的大脑皮层神经干细胞并鉴定,随机分为正常对照组、模型对照组、黄芪甲苷组、黄芪甲苷+miR-199a-5p拮抗剂组(拮抗剂组)和黄芪甲苷+miR-199a-5p拮抗剂对照组(拮抗剂对照组)。除正常对照组外,其余组神经干细胞先行氧糖剥夺8 h,再灌注72 h,拮抗剂组和拮抗剂对照组分别采用脂质体2000转染miR-199a-5p拮抗剂和拮抗剂对照。采用2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐[2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfonic acid benzene)-2H-tetrazole monosodium salt,CCK-8]法检测神经干细胞活性,异硫氰酸荧光素标记磷脂结合蛋白/碘化丙啶(Annexin-fluorescein isothiocyanate isomer/propidium iodide,AnnexinⅤ-FITC/PI)双染法检测神经干细胞凋亡,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time qPCR)检测miR-199a-5p表达,免疫印迹法检测切割型半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)和半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)蛋白表达。[结果]分离培养的神经干细胞纯度为98.41%,黄芪甲苷能够提高OGD/R损伤的神经干细胞存活率,其中50μmol·L^(-1)黄芪甲苷效果最佳(P<0.01);与模型对照组比较,50μmol·L^(-1)黄芪甲苷能抑制OGD/R损伤的神经干细胞凋亡(P<0.01),上调miR-199a-5p表达(P<0.01),下调cleaved caspase-3蛋白表达(P<0.01),而miR-199a-5p拮抗剂能显著逆转上述效应(P<0.01)。[结论]黄芪甲苷能够促进OGD/R损伤的神经干细胞存活,抑制其凋亡,作用机制可能与其上调miR-199a-5p表达,抑制cleaved caspase-3蛋白表达有关。
- 李钰丁文倩李琳许家栋方燕杨琰胡小伟储利胜
- 关键词：黄芪甲苷神经干细胞存活
- 隐性分层小组合作学习在生理学教学中的应用被引量：3
- 2017年
- 目的:探讨隐性分层小组合作学习在生理学教学中的教学效果。方法:选取临床医学两个平行班作为实验班和对照班,运用案例式教学,教学效果采用形成性和终结性评价。结果:实验班期末成绩显著高于对照班(P<0.05),且实验班学生对该教学方法有较好的评价。结论:隐性分层小组合作学习教学效果优于未分层小组讨论学习。
- 杨琰储利胜方燕饶芳印媛君
- 关键词：小组合作学习生理学
- 补阳还五汤上调miR-199a-5p表达促进脑缺血大鼠神经发生和血管生成被引量：19
- 2020年
- 目的:探讨补阳还五汤促进脑缺血大鼠神经发生和血管生成的机制。方法:实验大鼠随机分为手术对照组、模型对照组、补阳还五汤组、拮抗剂组、拮抗剂对照组,各14只。除手术对照组外,其余组采用线栓法诱导大脑中动脉阻塞模型,缺血90 min后再灌注14 d;补阳还五汤组、拮抗剂组和拮抗剂对照组在缺血后24 h灌胃补阳还五汤(13 g/kg);所有大鼠腹腔注射5-溴脱氧尿苷(BrdU,50 mg/kg),1次/d,连续14 d;缺血后第5天,拮抗剂组和拮抗剂对照组分别于侧脑室注射miR-199a-5p拮抗剂和miR-199a-5p拮抗剂对照10 nmol。采用改良神经损伤严重程度评分(mNSS)和角试验评价神经功能缺损,甲苯胺蓝染色检测脑梗死体积,免疫荧光双标记法检测脑缺血大鼠神经发生和血管生成,实时逆转录PCR检测miR-199a-5p表达,蛋白质印迹法检测血管内皮生长因子(VEGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达。结果:补阳还五汤可促进脑缺血大鼠神经功能恢复(P<0.05或P<0.01),减小梗死体积(P<0.05),增加BrdU^+/DCX^+、BrdU^+/NeuN^+、BrdU^+/vWF^+细胞数(均P<0.01),上调miR-199a-5p表达(P<0.01),促进VEGF和BDNF蛋白表达(均P<0.05);侧脑室注射miR-199a-5p拮抗剂后则逆转上述效应。结论:补阳还五汤可促进脑缺血大鼠神经发生和血管生成,其机制可能与上调miR-199a-5p增加VEGF和BDNF表达有关。
- 诸葛陆杰方燕金华倩李琳杨琰胡小伟储利胜
- 关键词：微RNA脑缺血补阳还五汤神经发生SPRAGUE-DAWLEY
- CBL结合情景教学法在生理学教学中的探索与实践被引量：1
- 2021年
- 目的:探讨CBL结合情景教学法在生理学教学中的效果。方法:选取我校临床医学专业2018级学生为实验组,2017级为对照组,教学效果采用学习过程性评价和终结性评价。结果:实验组期末成绩显著高于对照组(P<0.01),学习过程表现优秀学生期末成绩显著高于表现一般学生(P<0.01)。结论:在生理学教学中采用CBL结合情景教学法教学效果良好。
- 杨琰方燕岳明储利胜
- 关键词：生理学
- 补阳还五汤调控小胶质细胞/巨噬细胞极化抑制大鼠脑缺血后炎症反应研究被引量：26
- 2019年
- [目的]研究补阳还五汤(Buyang Huanwu Decoction, BYHWD)对大鼠脑缺血后小胶质细胞/巨噬细胞M1/M2极化及神经炎症的影响。[方法]采用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型,缺血90 min后再灌注。将大鼠随机分为假手术组、模型组和BYHWD组,BYHWD组缺血后24h开始予BYHWD(13g·kg-1)灌胃,连续给药14d。缺血后第14天处死大鼠,分别采用Iba1/CD16/32、Iba1/CD206免疫荧光双标染色检测缺血区M1型和M2型小胶质细胞/巨噬细胞表型,qRT-PCR检测M1型小胶质细胞/巨噬细胞表面标记物CD86、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)及促炎因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的m RNA表达;M2型小胶质细胞/巨噬细胞表面标记物CD206、精氨酸酶-1(arginase-1,Arg-1)及抗炎因子白细胞介素-10(interleukin-10, IL-10)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)的mRNA表达。[结果]免疫荧光双标染色结果表明,与模型组比较,BYHWD显著减少缺血区M1型小胶质细胞/巨噬细胞(CD16/32+)数量(P<0.01),增加M2型小胶质细胞(CD206+)数量(P<0.05)。qRT-PCR结果表明,与模型组比较,BYHWD显著下调M1型小胶质细胞/巨噬细胞表面标记物CD86、iNOS和促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达(P<0.01),上调M2型小胶质细胞/巨噬细胞表面标记物CD206、Arg-1和抗炎因子IL-10、TGF-βmRNA表达(P<0.01)。[结论] BYHWD可能通过促进激活的小胶质细胞/巨噬细胞从M1型向M2型转换,从而抑制大鼠脑缺血后炎症反应。
- 甘海燕李琳杨琰诸葛陆杰储利胜
- 关键词：补阳还五汤小胶质细胞极化炎症脑缺血
- 补阳还五汤含药血清对人脑微血管内皮细胞增殖和迁移的影响被引量：3
- 2016年
- 目的观察不同浓度补阳还五汤(BYHWD)含药血清对人脑微血管内皮细胞(HBMECs)增殖和迁移影响。方法补阳还五汤灌胃SD大鼠后腹主动脉取血,制备含药血清;体外培养人脑微血管内皮细胞(HBMECs),随机分为空白组(正常大鼠血清)及补阳还五汤含药血清组,血清浓度分为5%、10%和20%3个浓度,共6组;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测HBMECs增殖;细胞划痕法检测HBMECs迁移的相对距离。结果与空白组比较,5%、10%和20%含药血清均显著促进HBMECs增殖,差异有统计学意义(0.71±0.03比0.65±0.03、0.84±0.05比0.75±0.03、0.71±0.05比0.67±0.05,P<0.05);与10%含药血清组比较,5%含药血清组和20%含药血清组细胞增殖显著减少,差异有统计学意义(0.71±0.03、0.71±0.05比0.84±0.05,P<0.05)。与空白组比较,各含药血清组细胞迁移的相对距离均显著增加,差异有统计学意义(0.58±0.03比0.50±0.01、0.63±0.03比0.45±0.05、0.53±0.05比0.45±0.04,P<0.05);与10%含药血清组比较,5%含药血清组和20%含药血清组细胞迁移的相对距离显著减小,差异有统计学意义(0.58±0.03、0.53±0.05比0.63±0.03,P<0.05)。结论补阳还五汤含药血清可促进HBMECs增殖和迁移,10%含药血清作用最佳。
- 叶淑静孙斯琪李琳方燕杨琰储利胜
- 关键词：人脑微血管内皮细胞血清补阳还五汤增殖迁移
- 研究性教学在生理学教学中的探索和实践
- 2020年
- 目的探讨研究性教学在生理学教学中的应用效果。方法选取临床医学4个班学生作为研究对象,生理学前半部分内容采用研究性教学法,后半部分内容采用传统教学法,比较研究性教学与传统教学的效果。结果采用研究性教学法,学生课堂测试成绩显著高于采用传统教学法(P<0.05),且学生对研究性教学法有较好的评价。结论研究性教学法在生理学教学中的应用效果优于传统教学法,值得推广应用。
- 杨琰储利胜方燕印媛君饶芳
- 关键词：研究性教学生理学医学教育
- 川芎嗪预处理增强骨髓间充质干细胞外泌体对脑缺血大鼠的神经保护和抗神经元凋亡作用被引量：3
- 2023年
- [目的]探讨川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)预处理的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)源性外泌体(exosomes, Exos)对脑缺血大鼠的神经保护和抗神经元凋亡作用。[方法] TMP预处理BMSCs 48 h,采用超高速离心法分离提取外泌体并鉴定。采用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,实验分为假手术组、模型组、BMSCs源性Exos(BMSC-Exos)组和TMP预处理的BMSCs源性Exos(exosomes from TMP-pretreated BMSCs,TMP-BMSC-Exos)组。脑缺血90 min后,给药组分别经尾静脉注射BMSC-Exos(100μg/500μL)和TMP-BMSC-Exos(100μg/500μL)。采用Longa评分和角实验评价大鼠神经功能,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazole chloride,TTC)染色检测大鼠脑梗死体积,神经元特异性核蛋白(neuronal nuclei,NeuN)和原位末端转移酶标记(terminal-deoxynucleoitidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)免疫荧光双标检测神经元凋亡,免疫印迹法检测B细胞淋巴瘤-2 (B cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bcl-2associated X,Bax)、磷酸化蛋白激酶B(phosphophorylated-protein kinase B,p-Akt)及蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)的表达水平。[结果] BMSC-Exos和TMP-BMSC-Exos的形态、表面标记蛋白和粒径大小无显著差异。与BMSC-Exos比较,TMP-BMSC-Exos显著促进神经功能恢复(P<0.05),减小脑梗死体积(P<0.01),增加缺血周边区NeuN阳性细胞数量(P<0.05),减少凋亡神经元数量(P<0.05),提高Bcl-2和p-Akt蛋白表达水平,降低Bax蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01)。[结论] TMP预处理可以提高BMSC-Exos对脑缺血的神经保护作用,其机制可能与TMP-BMSC-Exos抑制神经元凋亡有关。
- 毛诗慧李琳孙逸梅梁慧琦江伟锋许家栋杨琰储利胜
- 关键词：脑缺血川芎嗪骨髓间充质干细胞外泌体凋亡AKT
- 补阳还五汤激活PI3K-AKT通路促进氧糖剥夺再灌注损伤的脑微血管内皮细胞血管生成被引量：3
- 2022年
- 目的:探讨补阳还五汤促进氧糖剥夺再灌注(OGD/R)损伤的大鼠脑微血管内皮细胞(RBMEC)血管生成的机制。方法:RBMEC经补阳还五汤含药血清孵育24 h后,构建OGD/R细胞损伤模型。将细胞随机分为正常对照组、模型对照组、补阳还五汤组(给予补阳还五汤含药血清)和LY294002组[给予补阳还五汤含药血清前使用磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂LY294002预处理1 h]。采用CCK-8法、细胞划痕实验和Transwell迁移实验、管腔形成实验分别检测细胞增殖、迁移和形成管腔能力。蛋白质印迹法检测PI3K、蛋白激酶B(AKT)、低氧诱导因子(HIF)-1α及血管内皮生长因子(VEGF)等蛋白的表达。结果:与模型对照组比较,补阳还五汤组RBMEC存活率、迁移能力及管腔形成能力显著增强(均P<0.01),磷酸化PI3K、磷酸化AKT、HIF-1α和VEGF蛋白表达增加(均P<0.05),而LY294002可阻断上述效应。结论:补阳还五汤含药血清可促进OGD/R损伤的RBMEC血管生成,其机制可能与其激活PI3K-AKT信号通路上调HIF-1α和VEGF表达有关。
- 胡小伟李琳龚荧荧方燕杨琰许家栋储利胜
- 关键词：补阳还五汤脑微血管内皮细胞血管生成低氧诱导因子-1Α
- 基于“互联网+”构建生理学线上线下混合课堂教学实践与研究被引量：7
- 2021年
- 目的:为了促进学生学习生理学及后续课程,利用“互联网+”,创建线上线下混合课堂教学模式。方法:创建丰富的线上资源,利用“互联网+”,开展线上线下相结合的课堂教学模式。结果:分析2017级、2018级临床医学专业学生网络课程得分及期末考试卷面得分,结果显示对照组和实验组两组存在显著差异。结论:混合课堂在鼓励学生积极学习,提高学生学习效率方面具有积极的意义。
- 印媛君李琳方燕饶芳杨琰岳明李天一储利胜
