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实时荧光定量PCR对兔戊型肝炎病毒(HEV)的检测及评估被引量：4: 2015年; 目的兔戊型肝炎病毒(HEV)是近年来新发现的,根据其分子生物学特征可能成为HEV的新基因型。为提高对兔HEV的检出率,本研究设计了针对兔HEV RNA的特异性引物和TaqMan探针并对其进行考评。方法 1)从GenBank中下载14条兔HEV全长序列,分别在其ORF1、ORF3片段的保守区域设计一条TaqMan探针和一对上、下游特异性引物,其中ORF1片段的探针及引物为C组,ORF3片段的为B组;A组的探针及引物为Jothikumar N等所报道的通用引物;2)制备相应的质粒标准品来构建定量标准曲线,并利用上述3套引物、探针对49份兔粪便及44份兔血液样品进行检测,将B、C组检测结果与A组的检测结果进行比较。结果新建立了两套兔HEV定量PCR的TaqMan探针及引物(B、C组),其标准曲线的斜率分别为-3.455和-3.469;使用上述3套引物及探针(A、B、C组)对49份粪便标本进行荧光定量PCR检测,其HEV RNA阳性率分别为67.35%(33/49)、67.35%(33/49)、57.14%(28/49),平均HEV RNA(log copies/g)拷贝数为6.18、5.90、6.11;44份血液标本的HEV RNA阳性检出率分别为65.90%(29/44)、56.82%(25/44)、50.00%(22/44),平均HEV RNA(log copies/mL)拷贝数为3.62、3.43、3.03;结果显示以上3组探针及引物均可用于粪便和血液标本的定量检测。结论兔HEV虽然有其独特的基因结构,但使用HEV通用引物检测不影响检出率。; 曾航张玉林王麟刘鹏王玲; 关键词：TAQMAN探针引物实时荧光定量PCR

乙型肝炎病毒与戊型肝炎病毒重叠感染研究进展被引量：9: 2011年; 乙型肝炎（乙肝）是一种常见的严重肝脏疾病。据世界卫生组织（WHO）2008年报告,全球约有20亿人曾感染过乙肝病毒（HBV）,其中3.5亿人为慢性HBV感染者。戊型肝炎（戊肝）是由戊型肝炎病毒（HEV）引起的一种自限性疾病,它主要在发展中国家流行,但在发达国家也有散发病例[1]。; 刘鹏王玲庄辉; 关键词：乙型肝炎病毒戊型肝炎病毒慢性肝病失代偿

不同抗-HCV酶联免疫试剂性能指标评价被引量：3: 2013年; 目的用已知参比血清评价国内外6种抗-丙型肝炎病毒(HCV)酶免疫试验(EIA)的灵敏度、特异度、符合率等性能。方法从献血员中筛查出抗-HCV阳性和阴性的血清标本,建立抗-HCV参比血清;应用该参比血清评价2种进口(Murex和Ortho)和4种国产抗-HCV EIA试剂的灵敏度、特异度、符合率等指标。结果 6种抗-HCV EIA试剂对参比血清的检测结果灵敏度分别为92.16%、92.16%、90.20%、94.12%、90.20%和92.16%,特异度分别为94.44%、64.81%、90.74%、88.89%、96.30%和79.63%,符合率为85.71%～93.33%;对参比血清的检测结果,4种国产试剂与Murex一致性较好,Kappa值>0.6,且国产试剂与Murex的符合率普遍高于与Ortho试剂的符合率。结论改进后的4种国产和2种进口抗-HCV EIA试剂灵敏度接近,但6种国内外试剂的特异性差异较大。; 卜秋宁王玲刘鹏王晓娟韩建陈香梅鲁凤民庄辉; 关键词：丙型肝炎诊断试剂

189例急性病毒性肝炎患者的血清学调查被引量：2: 2011年; 目的研究我国部分地区189例急性病毒性肝炎患者5种病毒性肝炎的分型构成。方法用酶免疫法（EIA）检测2007-2008年吉林（59例）、河北（54例）、山东（28例）、江苏（28例）、新疆（20例）等地急性病毒性肝炎门诊及住院的189例患者抗-HAV IgM、抗-HBc IgM、抗-HCV IgM、抗-HDV IgM和抗-HEV IgM。结果 189例急性病毒性肝炎患者甲型肝炎（HA）7例（3.70%）,乙型肝炎（HB）65例（34.39%）,丙型肝炎（HC）17例（8.99%）,戊型肝炎（HE）71例（37.57%）,未分型肝炎11例（5.82%）,重叠感染18例（9.53%）。重叠感染以HBV/HEV常见。甲、乙、丙、戊及未分型肝炎患者的平均发病年龄分别为39.43、36.42、45.23、50.24及32.91岁。各型肝炎男女性发病比为1.83∶1-6.00∶1。结论在本研究群体中HBV和HEV是急性散发性病毒性肝炎最主要的病原体。各型急性病毒性肝炎男女性发病性别比均为男性多于女性,平均发病年龄与以往相比有后移现象,其中HE最为明显,集中在中老年人群。; 王晓娟王玲卜秋宁刘鹏耿家宝付红伟朱永红; 关键词：急性病毒性肝炎肝炎病毒血清学

HepG2.2.15细胞模型功能的重新评价:分泌HBVDNA、cccDNA及血清学标志物的动态变化研究被引量：4: 2013年; 目的研究HepG2.2.15细胞分泌特点及动态变化,建立稳定的抗HBV药物筛选平台。方法采用微量细胞培养法培养HepG2.2.15细胞株,于第3、6、9、12、15d收集培养上清液,采用ELISA方法检测preS1、HBsAg和HbeAg,采用Abbot试剂盒定量检测HBVDNA,采用Roche荧光定量PCR试剂盒检测HBVcccDNA。结果 HepG2.2.15细胞分泌preS1、HBsAg、HBeAg、HBVDNA的量随着细胞培养时间的延长逐渐增加,其中HBsAg在第9d达到分泌高峰,其余均在第12d达到分泌高峰。HBVcccDNA在第9d检测值仍为0,第12d时检测值达24×103copies/ml。结论 HepG2.2.15细胞具有稳定的分泌HBV病毒及相关抗原的生物学功能,是比较理想的病毒复制及抗HBVDNA药物筛选的细胞模型。本研究所用细胞株及实验方法可靠、稳定且重复性好,适用于抗HBV药物筛选等研究。; 韩建王晓娟刘鹏卜秋宁朱永红王玲; 关键词：前S1抗原乙肝病毒表面抗原乙肝病毒E抗原乙肝病毒DNA

兔抗戊型肝炎病毒抗体定量线性标准品的标定及初步应用被引量：1: 2015年; 目的建立兔抗戊型肝炎病毒（hepatitis E virus,HEV）抗体定量线性标准品并对其应用效果进行评价。方法利用抗-HEV抗体检测试剂盒筛选出本实验室的抗-HEV抗体阳性兔血清S26。用世界卫生组织（World Health Organization,WHO）抗-HEV Ig标准品对其进行标定并检测其稳定性。将S26血清稀释至其线性范围,再倍比系列稀释5个稀释度作为定量线性标准,进行多次实验考评其重复性和应用效果。结果经3次标定,S26血清抗-HEV水平为39.54IU/ml,95%CI为39.47~39.62IU/ml,变异系数〈0.1%,稳定性好。从3.95IU/ml开始的5个倍比系列稀释度可作为兔抗-HEV抗体定量线性标准品,其重复性好且可有效地反映兔血清抗体水平变化趋势。结论本研究建立的兔抗-HEV抗体定量线性标准品,稳定性、重复性好,可用于兔HEV的疫苗原性评价及流行病学调查。; 张玉林刘琳夏俊珂曾航王麟刘鹏邹清华王玲庄辉

兔戊型肝炎病毒(HEV)感染性cDNA克隆的构建及复制特点研究: 目的：兔戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)是一种新发现的人畜共患病原体,至今已在世界多个地区的兔群中分离到。前期研究报道在所有已发现的兔HEV ORF1的MacroDomain编码区域均有一个31...; 刘鹏王玲庄辉; 关键词：病毒复制

国产丙型肝炎诊断试剂评价质控体系的建立被引量：5: 2012年; 目的建立丙型肝炎诊断试剂考评用质控体系.方法收集自2009年2至6月期间4080份献血员血清标本,用酶免疫实验检测筛选出抗-HCV阳性和抗-HCV阴性的146份标本.分别使用2种进口（Murex、Ortho）和4种国产抗-HCV EIA试剂（分别为英科新创、中山生物、万泰和科华公司）对筛选出的标本进行重复检测；使用Chiron的RIBA HCV 3.0和HCV RNA PCR试剂进行确认试验；采用Roche和Abbott HCV RNA定量试剂进行HCV RNA定量检测,RNA阳性标本进行HCV基因型检测.选择不同强度的或不同含量的确认阳性和阴性的标本及系列稀释标本建立抗-HCV和HCV RNA诊断试剂评价质控体系.结果构建了抗-HCV和HCV RNA诊断试剂评价质控体系.每种质控体系均由50份标本组成.分别包括20份抗-HCV/HCV RNA阳性标本、20份抗-HCV/HCVRNA阴性标本及10份用于灵敏度评价的系列稀释标本.阳性标本包括强、中和弱阳性,并包含国内常见HCV基因型和亚型.阴性标本包括样本吸光度值/临界值接近临界值的标本.结论本研究所建立的质控体系背景资料丰富、检测结果稳定可靠,为新研制和改进后国产丙肝诊断试剂的性能评价提供参考数据.; 卜秋宁王玲刘鹏王晓娟韩建陈香梅朱永红鲁凤民; 关键词：丙型肝炎诊断试剂质控体系

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刘鹏

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