杨一凡 作品数:9 被引量:12 H指数:2 供职机构: 复旦大学附属儿科医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
MicroRNA在胆道闭锁中的研究进展 被引量:3 2016年 小分子核糖核酸(microRNA,miRNA,miR)是一类约22个核苷酸的单链非编码RNA,在转录后水平调节基因的表达。miRNA广泛存在于人体各个组织器官中,在细胞增殖、分化、凋亡、胚胎发育、信号传导、肿瘤发生及代谢等过程中发挥着重要作用。近年来研究表明,某些miRNA表达的改变在胆道闭锁的发生发展中起着重要作用,在该过程中体现出极其复杂的调控机制,同时miRNA的研究也为胆道闭锁的早期诊断和治疗带来了新的希望和思路。本文就miRNA在胆道闭锁中的研究进展做一综述。 杨一凡 郑珊关键词:微RNAS 胆道闭锁 肝纤维化 第50届太平洋小儿外科医师协会年会会议纪要 2017年 第50届太平洋小儿外科医师协会(Pacific Associationof Pediatric Surgery,PAPS)年会于2017年5月28至6月2日在美国西雅图举行。此次大会由由WalterChawls教授出任大会主席,地区主席JohnMeehan教授主持工作。共有来自26个国家和地区的444位小儿外科医生参加,其中中国代表38名。本次会议的学术交流共有大会发言(FullOral)15篇、短篇发言(ShortOral)160篇、展板(poster)136篇和视频演示(Vedio)18篇。自2011年起PAPS设立了“PAPS青年奖(PAPsPrize)”,奖励来参加会议并进行大会发言的35岁以下的青年住院医师,共设2个奖项。 李凯 陈功 沈桢 朱海涛 孙松 王作鹏 万柔 杨一凡 张斌 郑珊关键词:小儿外科 医师协会 SURGERY PAPS 第52届太平洋小儿外科医师协会年会会议纪要 2019年 第52届太平洋小儿外科医师协会(Pacific Associationof Pediatric Surgery. PAPS)年会于 2019年3月10~15日在新西兰基督城举行。此次人会由复旦人学附属儿科医院郑珊教授担任大会主席.地区主席Spencer Beasley教授主持工作。共有来自25个国家和地区的400余位小儿外科医生参加。其中中国代表53名,人数仅次于美国和日本,共发言68次。本次会议的学术交流共有大会发言153篇、短篇发言160篇、视频演示24篇和壁报52篇。今年的Coe Medal奖颁发给了新西兰小儿外科先驱Kevin Pringle教授。 李凯 沈桢 朱海涛 汤梁峰 王婧 姜璟滢 杨一凡 叶纯静 王军锋 郑珊关键词:小儿外科 医师协会 外科医生 合成胆道毒素诱导斑马鱼胆道闭锁模型的建立 被引量:2 2019年 目的观察胆闭素化合物对斑马鱼幼体胆道系统发育的影响.方法通过化学方法合成胆闭素化合物,设置对照组及不同浓度胆闭素组(0.10、0.15、0.20、0.25 mg/L),观察各组斑马鱼幼体处理后6、24、48 h大体发育及胆道系统发育的变化.结果成功合成胆闭素化合物,其纯度达98%.检测胆闭素化合物活性发现,对照组及0.10 mg/L组48 h内均无斑马鱼死亡;胆闭素培养液从0.15 mg/L开始,随着作用时间增长和处理浓度升高,斑马鱼死亡率逐渐升高,0.25 mg/L胆闭素处理至48 h时斑马鱼全部死亡.0.15 mg/L胆闭素处理48 h或0.20 mg/L处理24h以上,各组斑马鱼肝外胆道结构均出现严重畸形,胆囊外观及其他肝外胆管均无法辨认,同时荧光标记的脂肪酸排泄实验示胆囊显影消失,且肠道内荧光明显减弱.与对照组比较,不同浓度胆闭素处理后斑马鱼大体发育均未出现明显改变.结论合成胆闭素具有胆道毒性,可诱导斑马鱼胆道发生胆道闭锁,胆闭素的深入研究将为探讨胆道闭锁发病机制提供新的切入点. 杨一凡 董瑞 刘佳 李强 郑珊关键词:斑马鱼 胆道闭锁 肝外胆道毒素Biliatresone及其制备方法、药物组合物和用途 本发明属医药技术领域,涉及植物中分离纯化的肝外胆道毒素Biliatresone及其制备方法、药物组合物和用途。本发明的肝外胆道毒素Biliatresone还包括其顺反异构体、对映异构体、非对映异构体、外消旋体、溶剂合物、... 郑珊 董瑞 杨一凡文献传递 第51届太平洋小儿外科医师协会年会会议纪要 2018年 51届太平洋小儿外科医师协会(Pacific Association of Pediatric Surgery,PAPS)年会于2018年5月13~17日在日本札幌举行。此次大会由美国Cynthia Reyes教授出任大会主席,地区主席Tatsuo Kuroda教授主持工作。共有来自20个国家和地区的408位小儿科医生参加。 李凯 陈功 沈桢 沈剑 朱海涛 杨少波 刘翔琪 杨一凡 韩祺蕾 郑珊关键词:医师协会 小儿外科 SURGERY 儿科医生 DNA甲基化修饰Shh/Bmp4信号通路与先天性肛门直肠畸形患儿肠管神经系统发育异常的临床研究 被引量:4 2018年 目的通过对先天性肛门直肠畸形(anorectal malformation,ARM)患儿末端直肠的组织病理学研究,探索Shh/Bmp4信号通路基因甲基化修饰对ARM末端直肠神经系统(enteric nervous system,ENS)的调控作用。方法收集复旦大学附属儿科医院收治的20例ARM及8例非胃肠道疾病死亡患儿直肠末端组织标本。通过PCR、免疫组织化学和Western blot等方法检测末端直肠组织中DNA甲基转移酶(DNMT1、DNMT3a、DNMT3b)含量及活性、Shh基因启动子区甲基化状态、Shh/Bmp4信号通路关键组分的表达及ENS发育情况。结果ARM组患儿直肠组织中DNMTs(DNMT1、DNMT3a、DNMT3b)的表达在mRNA和蛋白水平上分别为3.54±1.08、2.37±0.75和2.00±0.14,均较对照组的1.00±0.17、1.00±0.30和1.00±0.44明显升高,且差异有统计学意义(P=0.0141、0.0413、0.0120)。ARM组Shh基因启动子区甲基化水平为3.31±0.53,明显高于对照组的5.47±2.20;蛋白表达水平为27655.03±9032.63,较对照组的73738.36±22061.03明显降低,组间比较,差异均有统计学意义(P=0.0435和0.0052)。ARM组Shh/Bmp4信号通路关键组分Bmp4表达水平为1.00±0.16,较对照组3.84±0.71明显降低,组间比较,差异有统计学意义(P=0.0022)。ARM组直肠组织中S-100标记的神经丛分布稀疏分散,其在黏膜下层和肌间神经丛的阳性神经丛染色密度分别为1.23±0.24和1.31±0.11,与对照组相同位置的值(4.21±0.36和4.36±0.65)比较,表达均明显减少,差异均有统计学意义(P<0.0001)。ARM组直肠中c-kit标记的cajal间质细胞和NSE标记的神经节细胞未见明显表达。结论先天性ARM末端直肠组织整体处于高甲基化水平,且Shh基因启动子区处于高甲基化状态,Shh/Bmp4关键组分在ARM组织中表达下降,提示Shh高甲基化状态可能抑制Shh/Bmp4信号通路的表达。 周莹 杨一凡 董瑞 黄焱磊关键词:先天性肛门直肠畸形 DNA甲基化 肠神经系统 胆道闭锁患儿来源原代胆管类器官体的初步研究 被引量:2 2021年 目的探究原代胆管细胞培养胆道闭锁患儿胆囊来源的胆管类器官体进行实验研究的可行性。方法选取2017年9月至2018年3月期间在复旦大学附属儿科医院4例Ⅲ型胆道闭锁患儿行Kasai手术及4例胆总管囊肿患儿行胆总管囊肿切除术获得的部分胆囊胆管细胞,采用三维原代胆管细胞培养方法培养胆道闭锁患儿胆囊来源的胆管细胞(实验组)和胆管扩张症(对照组)胆囊来源的胆管细胞类器官体;利用实时荧光定量PCR检测胆管相关的基因表达水平;利用HE染色、免疫荧光染色初步观察类器官体形态与基因表达特点;观察人工合成胆闭素对该胆管类器官体的影响。参数检验采用Student's t检验、方差分析,非参数检验采用Spearman检验、Kruskal-Wallis检验。结果胆道闭锁患儿胆囊来源的胆管细胞和胆管扩张症胆囊来源的胆管细胞均可形成有结构的胆管类器官体,呈现空心球状或管状,均表达胆管标志基因,且两种来源的类器官体在形态和胆管标志基因表达水平上差异无统计学意义。P0、P1、P2代的胆道闭锁来源的胆管细胞的基因表达水平差异无统计学意义,表明胆管类器官体在体外培养时可以长期维持较稳定的基因表达水平。在培养基中加入人工合成的胆闭素后,与对照组相比,胆管类器官体细胞出现明显死亡现象。结论利用胆道闭锁患儿来源的胆管细胞类器官体研究胆道闭锁的发病机制有一定的科学意义。 王雨晴 孙露露 杨一凡 姜璟㼆 董瑞 惠利健 郑珊关键词:胆道闭锁 先天性肛门直肠畸形中DNA甲基化修饰Shh/Bmp4通路调控胎鼠肠管神经系统发育的实验研究 被引量:1 2019年 目的 研究Shh/Bmp4信号通路基因甲基化修饰对肛门直肠畸形(anorectal malforma-tion,ARM)胎鼠末端直肠神经系统(enteric nervous system,ENS)发育的影响.方法 SD孕鼠15只,按照数字表法随机分成模型组(ET U)、干预组(ET U+5-azaC)与正常组(NC).孕10 d,ET U组和ET U+5-azaC组均经胃管注入乙烯硫脲,ET U+5-azaC组同时腹腔注射5-azaC(3 mg/kg).孕20 d,剖宫取子鼠.观察ARM发生率,用PCR、免疫组化和Western blot等方法检测子鼠末端直肠组织中DNA甲基转移酶(DNM T1、DNM T3a、DNM T3b)含量及活性、Shh基因启动子区甲基化状态及Shh/Bmp4信号通路关键组分的表达水平.结果 ①ETU组和ETU+5-azaC组的ARM发生率分别为98.3% 、64.9%,两组之间差异有统计学意义(P<0.0001);②ET U组和ET U+5-azaC组末端直肠组织中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的表达水平较对照组均明显升高(P<0.01);ETU组DNMT1、DNMT3a的表达水平较ETU+5-azaC组明显升高(P<0.01),而两组DNMT3b表达水平未发现明显差异;③ET U组末端直肠组织中Shh启动子区甲基化水平明显高于ET U+5-azaC组和对照组(P<0.05),ETU+5-azaC组亦较对照组明显升高(P=0.05);④ETU组和ETU+5-azaC组末端直肠组织中Shh和Bmp4表达水平较对照组均明显降低(P<0.0001),同时ETU组较ETU+5-azaC组间相比Shh和Bmp4表达水平亦降低(P<0.05);⑤ETU组直肠组织中S100标记的黏膜下层、肌间神经丛明显较正常组表达减少(P<0.0001),ETU+5-azaC组与ETU组相比差异有统计学意义(P<0.0001);ETU组和ETU+5-azaC组直肠中c-kit标记的cajal间质细胞和NSE标记的神经节细胞未见明显表达.结论 ARM大鼠模型直肠末端组织甲基化状态可通过干预发生变化,Shh基因低甲基化可促使Shh/Bmp4通路关键组分表达上调,S-100标记的神经丛数量明显增多,可能介导直肠ENS的发育. 周莹 杨一凡 董瑞 黄焱磊关键词:肠神经系统