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双功能短肽偶联壳聚糖介导microRNA-140对兔关节软骨损伤的修复: 目的:小RNA-140(microRNA-140,miR-140)在软骨细胞的分化、代谢等过程中发挥重要作用,而miR-140在软骨损伤修复过程中的作用及其机制尚有待深入研究。本课题探讨核定位信号肽偶联核激酶底物短肽修饰...; 张洋洋; 关键词：软骨损伤信号肽; 文献传递

形成性评价在临床生物化学检验教学中的应用被引量：10: 2018年; 目的探讨形成性评价在临床生物化学检验教学中的应用。方法将我院医学检验学系医学检验技术专业2014级100名本科生作为对照组,采用传统终结性评价方法;将2015级97名本科生作为实验组,采用形成性评价方法。比较两组教学效果。结果实验组期末考试成绩为良好和中等的学生比例明显高于对照组。结论在临床生物化学检验教学中应用形成性评价,有利于学生对知识的掌握及应用,有利于提高课程教学质量。; 彭效祥张霞孟祥英官旭俊张洋洋赵荣兰; 关键词：临床生物化学检验医学检验技术专业

甲状腺激素受体βΔ对大鼠乳腺癌SHZ-88细胞增殖及凋亡的影响被引量：2: 2016年; 目的探讨甲状腺激素受体βΔ(thyroid hormone receptorβΔ,TRβΔ)对大鼠乳腺癌SHZ-88细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法将真核表达载体pcDNA3.1-TrβΔ及空载体pcDNA3.1分别转染体外培养的SHZ-88细胞,并给予10 nmol/L T3干预。CCK-8(Cell Counting Kit-8)法分析细胞的增殖活力;Annexin V/PI和JC-1荧光染色,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞线粒体膜电位变化;ELISA法检测细胞组蛋白/DNA碎片;定量PCR检测细胞半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-9(Cysteinyl aspartate specific proteinase-9,Caspase-9)、Caspase-3基因表达;比色法检测Caspase-9和Caspase-3活性。结果与空载体pcDNA3.1转染组相比,pcDNA3.1-TrβΔ转染组明显抑制SHZ-88细胞的增殖、增加细胞组蛋白/DNA碎片和凋亡细胞百分比、降低线粒体膜电位、上调Caspase-9、Caspase-3基因的表达并促进Caspase-9及Caspase-3的活化(P<0.05);给予T3后可明显增强上述作用(P<0.05)。结论TRβΔ可抑制SHZ-88细胞的增殖并促进其发生凋亡,该作用可能通过降低线粒体膜电位,激活Caspase-9及Caspase-3蛋白,启动内源性细胞凋亡途径实现,且该作用受T3调节。; 张洋洋彭效祥孙艳丽宋伟赵荣兰; 关键词：甲状腺激素受体乳腺癌增殖凋亡

双功能短肽修饰壳聚糖介导miR-140基因修复兔关节软骨损伤的效果: 2018年; 目的观察核定位信号肽偶联核激酶底物短肽（NNS）修饰的壳聚糖（CS）（NNSCS）介导人miR-140基因，局部转染促进兔关节软骨损伤修复的效果。方法构建GV268-miR-140真核表达质粒，将NNSCS分别与阴性对照质粒GV268及重组质粒GV268-miR-140复合形成NNSCS／GV268及NNSCS／GV268-miR-140复合物。选取健康雄性新西兰大耳白兔18只，单侧右后肢按随机数字表法分成转基因组（A组）、阴性对照组（B组）、假手术组（C组），每组6只。A组与B组均制备股骨滑车全层软骨损伤模型；C组仅暴露股骨滑车关节面。术后1周，A组给予NNSCS／GV268-miR-140复合物，B组给予NNSCS／GV268复合物，C组给予等量等渗盐水，每周2次，持续7周。术后8周末，处死动物并取材。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测缺损区软骨组织内miR-140、Sox9、Aggrecan和Hdac4表达；HE染色、番红O-固绿染色及Aggrecan免疫组化染色评估缺损区软骨修复情况。结果RT-qPCR检测结果显示，A组miR-140表达水平（3．16±0．37）较B组（1．00±0．24）和C组（1．24±0．18）明显升高（P〈0．05）；A组Sox9表达水平（4．38±0．66）较B组（1．04±0．04）和C组（1．19±0．30）明显上调（P〈0．05）；A组Aggrecan表达水平（3．63±0．58）较B组（1．21±0．14）和C组（1．34±0．13）明显上调（P〈0．05）。A组Hdac4表达水平（0．37±0．06）较B组（0．81±0．06）明显下调（P〈0．05）。HE染色、番红O-固绿染色及Aggrecan免疫组化染色显示，A组缺损处呈现明显的软骨性修复，B组缺损处出现大量纤维组织增生和炎性细胞浸润，未见软骨性修复。结论NNS可携带外源基因进入软骨细胞并在局部大量表达；高表达的miR-140可能通过上调Aggreean和Sox9表达及下调Hdae4表达，从而明显促进损伤软骨的修复，可为其今后用于治疗软骨损伤提供实验基础。; 彭效祥张洋洋宋伟孙艳丽王鲁娟刘庆赵荣兰; 关键词：微RNAS 软骨关节信号肽

核定位信号肽偶联核激酶底物短肽修饰壳聚糖介导微小RNA-140对兔关节软骨细胞作用的研究被引量：2: 2017年; 目的探讨核定位信号肽偶联核激酶底物短肽(nucleus localization signal linked nucleic kinase substrate short peptide,NNS)修饰壳聚糖(chitosan,CS)(^(NNS)CS),介导人微小RNA-140(micro RNA-140,miR-140)基因转染,对体外培养的兔关节软骨细胞的作用。方法将重组质粒GV268-miR-140和空质粒GV268分别与^(NNS)CS复合形成^(NNS)CS/pDNA纳米复合物。取新生新西兰大耳白兔膝关节软骨,采用胰蛋白酶和胶原酶联合消化法分离培养原代软骨细胞。取第2代软骨细胞分为3组:正常细胞对照组(A组)、^(NNS)CS/GV268空质粒转染组(B组)、^(NNS)CS/GV268-miR-140转染组(C组),B、C组细胞分别以^(NNS)CS/GV268及^(NNS)CS/GV268-miR-140纳米复合物瞬时转染。转染后,实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,RT-qPCR)检测外源mi R-140的表达;AnnexinⅤ-FITC/PI双染色法及MTT法分别检测外源miR-140对软骨细胞凋亡及增殖活力的影响;RT-qPCR检测软骨细胞中Sox9、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、组蛋白去乙酰化酶4(histone deacetylase 4,Hdac4)基因表达。结果 RT-qPCR检测示,C组外源miR-140表达水平较A、B组明显上调(P<0.05)。与A、B组比较,C组软骨细胞凋亡率明显降低,细胞增殖活力明显增加,细胞内Sox9、Aggrecan基因相对表达量明显上调、Hdac4基因相对表达量明显下调(P<0.05);A、B组间以上指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 ^(NNS)CS可携带外源基因进入软骨细胞并高效表达,高表达的miR-140能提高体外培养软骨细胞的生物活性,为其用于治疗软骨损伤性疾病提供了实验依据。; 张洋洋彭效祥宋伟孙艳丽王鲁娟李倩赵荣兰; 关键词：软骨细胞信号肽

microRNA-140真核表达载体的构建及鉴定: 2017年; 目的构建miR-140真核表达载体并检测其在兔软骨细胞中的表达情况。方法以人全血标本基因组为模板,PCR扩增出带有酶切位点的miR-140序列,将该序列定向克隆入pBudCE4.1载体中,构建pBudCE4.1-miR-140真核表达载体。将核定位信号肽偶联核激酶底物短肽(nucleus localization signal linked nucleic kinase substrate short peptide,NNS)修饰的壳聚糖(^(NNS)CS)分别与pBud CE4.1-miR-140重组质粒及pBudCE4.1空质粒形成纳米复合物,分别瞬时转染体外分离培养的正常兔原代关节软骨细胞,实时荧光定量PCR方法检测miR-140的表达情况。结果构建的pBudCE4.1-miR-140真核表达质粒酶切鉴定和测序结果均正确,表明miR-140成功克隆入pBudCE4.1载体中。实时荧光定量PCR结果表明,与^(NNS)CS/pBudCE4.1对照组相比,^(NNS)CS/pBudCE4.1-miR-140转染组软骨细胞中miR-140表达升高约14.5倍(P<0.05)。结论成功构建了pBudCE4.1-miR-140真核表达载体,瞬时转染后软骨细胞可以有效地高表达miR-140,为将来探究miR-140在软骨损伤修复中的作用机制奠定了基础。; 张洋洋彭效祥张绪美赵荣兰; 关键词：软骨细胞真核表达载体定量PCR

带教本科临床生物化学检验实验教学体会被引量：2: 2017年; 临床生物化学检验是我国医学检验专业学生必修的专业课程之一,实验课在整门课程教学中占有极其重要的地位。随着医学检验相关新设备、新仪器的不断出现,临床生物化学检验成为具有极强实践性的医学检验专业。而如何调整实验教学内容与方法,培养实用型检验技术人员,则显得尤为迫切与重要。本文对多年实验带教经验和体会进行总结,旨在对临床生物化学检验实验教学改革有所帮助。; 彭效祥张洋洋赵荣兰; 关键词：临床生物化学检验实验教学临床带教

组织工程化软骨修复关节软骨损伤研究进展被引量：2: 2017年; 关节软骨自身修复能力差,其损伤后的有效治疗成为临床难题。软骨组织工程中种子细胞、支架及生物活性因子是目前研究的热点。体内软骨生长的微环境中含有多种生物活性因子,各因子间相互影响构成纵横交错的关系网。然而,外源性因子半衰期短,易降解,很难达到修复损伤软骨需要的浓度。转基因技术在组织工程中的应用实现了外源性生物活性因子在局部持续并高效的表达,促进了损伤软骨修复。该文就组织工程化软骨修复关节软骨损伤研究进展作一综述。; 张洋洋彭效祥赵荣兰; 关键词：关节软骨

本科临床生物化学检验教学改革初探: 2017年; 伴随医学检验技术的快速发展，临床生物化学检验已向高理论、高科技和高水平的方向快速发展。同时，临床生物化学检验作为医学检验专业重要的主干专业课程之一，临床生物化学检验教学也需要不断改革更新，以适应社会与市场变化的需求。本文作者在医学检验学系多年的教学工作过程中，在理论教学内容、实验教学内容和师资培养三方面进行了初步改革，并取得了一定的效果。; 彭效祥张洋洋宋伟赵荣兰; 关键词：临床生物化学检验教学改革实验教学内容本科医学检验专业医学检验学

甲状腺激素受体β与肿瘤关系研究进展: 2017年; 甲状腺激素受体(thyroid hormone receptors,TRs)是一种配体依赖性转录因子,由TRα和TRβ基因编码。在哺乳动物中已发现多个不同的TR亚型,分别由TRα和TRβ基因由于转录起始位点的不同或选择性剪接而产生的若干同工体。近年来被越来越多的研究证实TRs除参与调控机体正常的发育和代谢平衡外,还具有对肿瘤发生的调节作用,尤其是TRβ亚型在肿瘤的发生、发展及转移等过程中发挥重要的生物学作用,表现出了明显的肿瘤抑制功能。在多种肿瘤组织中可检测到TRβ表达的降低甚至缺失。TRβ参与调控细胞内多个信号转导通路,与肿瘤的发生发展密切相关。对TRβ参与的细胞内调控机制的研究有助于在分子水平上对肿瘤的发生发展作更深入的了解,以发掘新的肿瘤治疗靶点。本文主要对TRβ与肿瘤关系的研究进展进行综述。; 张洋洋彭效祥孙艳丽赵荣兰; 关键词：甲状腺激素受体肿瘤

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张洋洋

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