- 广州管圆线虫Galectin-1诱导巨噬细胞凋亡的机制研究
- 广州管圆线虫病 (Angiostrongyliasis) 是由于感染广州管圆线虫(Angiostrongylus cantonensis，Ac)而引起的。广州管圆线虫病并作为一种重要的人兽共患寄生虫疾病，主要发生在中国、...
- 史晓萌
- 关键词：广州管圆线虫巨噬细胞THP-1细胞凋亡机制
- 广州管圆线虫半乳糖凝集素-1基因的克隆、表达和凝集反应被引量：2
- 2017年
- 目的克隆、表达广州管圆线虫(Angiostrongylus cantonensis)半乳糖凝集素-1(galectin-1)基因并分析其凝集反应。方法用Swiss Model分析galectin-1的三维结构。提取广州管圆线虫雌性成虫总RNA,根据galectin-1基因编码序列(Gen Bank登录号为JN133961.1)设计引物,RT-PCR扩增目的基因,亚克隆至p ColdⅢ质粒,转化大肠埃希菌(Escherichia coli)BL21,取重组质粒进行双酶切、PCR鉴定和测序。阳性质粒经0.1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,镍柱亲和层析法纯化galectin-1重组表达蛋白后,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析重组蛋白表达情况。以广州管圆线虫全虫免疫的小鼠血清为一抗,蛋白质印迹(Western blotting)验证目的蛋白。将重组蛋白10倍稀释为5.55×10^(-1)~5.55×10^(-5)ng/μl,显微镜观察其与新鲜的ICR小鼠血液中红细胞的凝集反应。结果 Swiss Model分析结果显示,galectin-1以非二聚体形式发挥作用。galectin-1基因RT-PCR扩增产物约为850 bp,与预期结果一致。经双酶切、PCR和测序结果显示,重组质粒p ColdⅢ-galectin-1构建成功。SDS-PAGE结果显示,经IPTG诱导获得相对分子质量约36 000的可溶性重组融合蛋白。Western blotting分析结果显示,galectin-1蛋白能被全虫免疫的小鼠血清识别。凝集反应结果显示,galectin-1蛋白与小鼠红细胞发生明显凝集反应的最低浓度为5.55×10^(-4)ng/μl。结论克隆的galectin-1基因能在p ColdⅢ原核表达系统中呈可溶性表达,并与小鼠红细胞发生凝集反应。
- 李星潘赵梦静史晓萌闫兰竹闫宝龙黄慧聪
- 关键词：广州管圆线虫原核表达凝集反应
- Thp-1细胞膜蛋白Annexin A2在Ac-Gal-1诱导凋亡中的应用
- 本发明涉及一种Thp‑1细胞上的膜蛋白Annexin A2在广州管圆线虫(Angiostrongylus Cantonensis，Ac)蛋白Galectin‑1诱导凋亡中的应用。本发明为一种Thp‑1细胞上的膜蛋白Ann...
- 黄慧聪闫宝龙史晓萌
- 文献传递
- Thp-1细胞膜蛋白Annexin A2在Ac-Gal-1诱导凋亡中的应用
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- 黄慧聪闫宝龙史晓萌
- 广州管圆线虫蛋白酶体α5亚基基因免疫调节功能研究
- 目的:检测广州管圆线虫蛋白酶体α5亚基重组蛋白免疫小鼠血清抗体和细胞因子,研究其在宿主免疫应答中的调节作用。方法本研究的前期工作是应用蛋白组学双向荧光差异凝胶电泳和质谱技术对不同时期虫体蛋白进行分析和鉴定。在此基础上,我...
- 闫兰竹史晓萌闫宝龙梁韶晖黄慧聪
- 关键词：广州管圆线虫细胞因子免疫保护
- 文献传递
