徐丽
- 作品数：4 被引量：12H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学检验医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 葫芦素B抑制骨肉瘤143B细胞的增殖和侵袭并促进其凋亡被引量：7
- 2019年
- 目的 :研究葫芦素B(cucurbitacin B,CuB)对骨肉瘤143B细胞增殖、凋亡和侵袭的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 :采用不同浓度的CuB处理143B细胞,结晶紫染色和克隆形成实验检测细胞的增殖能力;Transwell小室法检测细胞的侵袭能力;FCM法检测细胞周期及凋亡率的变化。实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测143B细胞中上皮-间质转化相关标志物基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、波形蛋白(Vimentin)以及Snail mRNA和蛋白的表达水平;蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白剪切型聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(cleaved-polyadenosine diphosphate ribose polymerase,cleavedPARP)、剪切型caspase3(cleaved-caspase3)和Bad以及细胞周期相关蛋白cyclin B1的表达水平;以及蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称Akt)信号通路中Akt、磷酸化Akt(phospho-Akt,p-Akt)、第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homolog deletedonchromosometen,PTEN)、磷酸化PTEN(phospho-PTEN,p-PTEN)蛋白的表达水平。结果 :与空白对照组相比,用不同浓度的CuB处理后,143B细胞的增殖和侵袭能力受到不同程度的抑制(P值均<0.05);30和40 nmol/L CuB浓度组中,细胞的凋亡率明显增加(P值均<0.01),细胞周期被阻滞在G2/M期(P值均<0.01)。上皮-间质转化相关标志物MMP-9、Vimentin以及Snail mRNA和蛋白表达水平下调(P值均<0.05);凋亡相关蛋白Bad、cleaved-caspase3和cleaved-PARP的表达上调(P值均<0.05),细胞周期相关蛋白cyclin B1的表达水平明显下调(P值均<0.01);143B细胞中p-Akt蛋白的表达水平降低(P值均<0.05),且伴有p-PTEN蛋白的表达水平增高(P值均<0.05)。结论 :CuB能抑制骨肉瘤143B细胞的增殖和侵袭,并促进其凋亡;这一作用可能与CuB抑制143B细胞中Akt信号通路的活性及上皮-间质转化的发生有关。
- 喻婷婷徐丽董超群袁晓慧张平罗小辑罗进勇
- 关键词：骨肉瘤细胞增殖上皮-间质转化
- Hmox1促进BMP9诱导C3H10T1/2细胞向成骨分化
- 2017年
- 目的:研究血红素加氧酶1(hemeoxygenase 1,Hmox1)在骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic proteins 9,BMP9)诱导下间充质干细胞C3H10T1/2向成骨分化过程中发挥的作用。方法:用Ad-BMP9感染C3H10T1/2,分别用Q-PCR和Western blot检测Hmox1mRNA和蛋白水平的变化;Hmox1激动剂COPP处理BMP9诱导的C3H10T1/2细胞,碱性磷酸酶(ALP)染色和活性测定检测早期成骨指标ALP的变化;过表达Hmox1的重组腺病毒(Ad-Hmox1)处理BMP9诱导的C3H10T1/2细胞,ALP染色和活性测定早期成骨指标ALP,茜素红染色检测晚期成骨指标钙盐沉积,Western blot检测成骨相关基因COL1A1。结果:Ad-BMP9感染C3H10T1/2后,Hmox1的mRNA及蛋白水平均升高;BMP9与Hmox1激动剂COPP联用与BMP9组相比ALP的活性增强;Ad-Hmox1可以增强BMP9诱导下C3H10T1/2细胞的ALP活性和钙盐沉积,以及成骨相关基因COL1A1表达。结论:Hmox1可以促进BMP9诱导下C3H10T1/2细胞的成骨分化。
- 刘晓骅吉彩霞徐丽董超群罗进勇
- 关键词：血红素加氧酶1成骨分化
- Runx1促进BMP9诱导的间充质干细胞MEFs的成骨分化被引量：4
- 2017年
- 目的:研究Runx1在骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic proteins 9,BMP9)诱导小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)成骨分化中的作用。方法:用BMP9腺病毒感染MEFs细胞,利用RT-PCR和Western blot分别在mRNA和蛋白质水平检测Runx1的内源性表达;构建过表达Runx1的重组腺病毒Ad-Runx1,并在mRNA和蛋白质水平验证Ad-Runx1的效果;用Ad-Runx1和BMP9条件培养基共处理MEFs,检测成骨早期指标碱性磷酸酶(ALP)染色和活性,茜素红S染色检测成骨晚期指标钙盐沉积;RT-PCR和Western blot分别检测成骨关键转录因子Runx2在mRNA和蛋白质水平的变化。结果:Ad-BMP9处理MEFs细胞后,可使Runx1在mRNA和蛋白质水平表达上调;构建的Ad-Runx1处理MEFs后,可使Runx1在mRNA和蛋白质水平表达上调;Ad-Runx1处理BMP9诱导的MEFs细胞后,增强了ALP活性和钙盐沉积以及Runx2在mRNA和蛋白质水平的表达。结论:Runx1可以促进BMP9诱导的间充质干细胞MEFs的成骨分化。
- 吉彩霞刘晓骅徐丽董超群罗进勇
- 关键词：MEFSRUNX1成骨分化
- DLX1对BMP9诱导的间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化的影响被引量：1
- 2017年
- 目的:分析和确认转录因子DLX1在骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导的间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化中的作用。方法:首先,BMP9腺病毒感染C3H10T1/2细胞,RT-PCR和Western blot检测DLX1表达变化;随后,利用重组腺病毒技术分别过表达DLX1和RNA干扰(RNA Intenference,RNAi)抑制DLX1的表达,并利用碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)染色、钙盐沉积实验(茜素红染色),免疫细胞化学检测骨钙素(osteocalcin,OCN)表达和裸鼠皮下异位成骨实验分析DLX1对于BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化的影响。荧光素酶报告基因实验和Western blot分析DLX1对于BMP9诱导的C3H10T1/2细胞Smad1/5/8信号途径的影响。结果:BMP9可以促进C3H10T1/2细胞中DLX1基因和蛋白表达水平;过表达DLX1在体外可进一步促进BMP9诱导的C3H10T1/2细胞的ALP活性、钙盐沉积以及OCN的表达,过表达DLX1亦可促进BMP9诱导的裸鼠皮下异位成骨;反之,RNAi抑制DLX1表达后,由BMP9诱导的C3H10T1/2细胞的ALP活性、钙盐沉积、OCN表达和裸鼠皮下异位成骨均相应受到抑制。过表达DLX1可进一步增强BMP9诱导的C3H10T1/2细胞中Smad/1/5/8的转录调控活性,RNAi降低DLX1表达则可抑制BMP9诱导Smad/1/5/8的转录调控活性。但是,无论过表达DLX1和RNAi降低DLX1表达均不会对BMP9诱导的Smad/1/5/8磷酸化造成影响。结论:DLX1可以调节BMP9诱导的间充质干细胞C3H10T1/2细胞成骨分化,其调节作用可能是通过影响Smad1/5/8信号的转录调控活性而实现的。
- 徐丽吉彩霞刘晓骅喻婷婷罗进勇
- 关键词：间充质干细胞骨形态发生蛋白成骨分化
