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封清川
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
供职机构:
中国医科大学
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发文基金:
辽宁省教育厅基金资助项目
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
李岩
中国医科大学附属盛京医院
崔刚
中国医科大学附属盛京医院
李小东
中国医科大学
王艳
中国医科大学附属盛京医院
李丰
中国医科大学
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中国医科大学
作者
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李丰
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王艳
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李小东
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封清川
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崔刚
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李岩
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中华消化杂志
年份
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2006
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癌胚抗原启动子调控的白细胞介素-2/干扰素β融合基因的原核及真核表达质粒的构建
被引量:3
2006年
目的根据细胞因子间协同作用特点,构建人白细胞介素-2(IL-2)与干扰素(IFN)β的融合基因,并用癌胚抗原(CEA)基因启动子调控其在结肠癌细胞株中的靶向表达。方法分别用原核及真核表达载体,检测融合蛋白的表达情况。PCR、RT-PCR法扩增得到CEA启动子、IL-2 cDNA、IFNβ cDNA,应用原核表达质粒pGEX-5X-1、真核表达质粒pcDNA3.1/HisA、绿色荧光蛋白质粒pEGFP-C1,构建出原核表达质粒和真核表达质粒;SDS-PAGE电泳检测原核表达;用脂质体法将真核表达质粒转入结直肠癌细胞株 Lovo(CEA高表达)、HT-29(CEA低表达)和对照Hela细胞(CEA阴性),转染后分别以流式细胞仪、荧光显微镜、Western印迹等方法检测肿瘤细胞凋亡情况及蛋白表达情况。结果融合基因可在大肠杆菌及肿瘤细胞内表达融合蛋白;对肿瘤细胞有明显的杀伤作用;由CEA启动子调控的融合基因在Lovo细胞的表达高于HT-29细胞,在CEA阴性的Hela细胞中几乎不表达。结论 CEA启动子可靶向性调控融合基因在肿瘤细胞的表达,具有协同作用的细胞因子融合蛋白可能有更强的抗肿瘤作用。
王艳
李岩
崔刚
封清川
李小东
李丰
LI Hong-jie
关键词:
癌胚抗原
启动子
融合基因
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