吕峰
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- MicroRNA-155在肝细胞癌对索拉非尼抗药中的作用研究被引量：3
- 2017年
- 目的探讨微小RNA155(microRNA-155,miR-155)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)对索拉非尼(sorafenib)抗药中的作用。方法将miR-155抑制慢病毒(miR-155 inhibitor)转染miR-155表达相对较高的SMMC-7721细胞,而miR-155过表达慢病毒(miR-155)转染miR-155表达相对较低的Hep G2细胞;用荧光定量PCR(qPCR)检测经慢病毒转染的SMMC-7721细胞及HepG2细胞miR-155表达量,以验证慢病毒转染效果;通过CCK-8法及流式细胞术检测各组细胞经索拉非尼作用后的存活率及凋亡情况;用Western blot检测凋亡相关蛋白活性caspase-3表达量,从而进一步探究各组细胞凋亡情况。结果与对照组相比,转染miR-155抑制慢病毒的SMMC-7721细胞表达miR-155明显下调(P<0.01),经索拉非尼处理后其存活率明显降低(P<0.05),而索拉非尼诱导其凋亡明显增加(P<0.01),其活性caspase-3表达量明显上调(P<0.01);miR-155过表达慢病毒转染HepG2细胞后,则相反。结论 miR-155参与肝细胞癌对索拉非尼的抗药,有希望成为一个肝癌治疗的新靶标。
- 吕峰王伟艾麦提.牙森金鑫李德卫
- 关键词：肝细胞癌索拉非尼抗药慢病毒
- 小鼠胚胎肝祖细胞的分离和扩增培养
- 2017年
- 目的从胎龄14.5 d的C57小鼠胚胎肝脏中分离、培养小鼠胚胎肝祖细胞(m HPCs),并将其诱导分化为胆管细胞。方法用荧光激活细胞筛选法(FACS)分选DLK1表面抗原阳性的小鼠胚胎肝细胞,并和小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)Transwell共培养或者单独培养。细胞免疫荧光检测刚分选和共培养4和6 d的DLK1^+细胞的甲胎蛋白(AFP)、白蛋白(ALB)及细胞角蛋白19(CK19)抗原的表达。结果体外共培养时,大部分DLK1^+细胞分裂增殖明显,呈葡萄状聚集生长。第4天,部分细胞开始贴壁增殖,形态开始变成梭形。结果显示,分选的DLK1^+细胞表达AFP和少量ALB,但不表达CK19;在共培养的第4天其开始表达CK19,和微弱表达ALB;第6天,其高表达CK19,而几乎不表达的ALB。结论应用FACS技术成功从E14.5胎肝细胞中分选出DLK1^+细胞并鉴定其大部分为mHPCs,并可在体外与MEFs Transwell共培养的条件下,诱导培养其分化为胆管细胞。
- 王伟吕峰金鑫艾麦提.牙森李德卫
- 关键词：小鼠胚胎成纤维细胞胆管细胞
