吴毓
- 作品数:29 被引量:125H指数:7
- 供职机构:辽宁师范大学更多>>
- 发文基金:辽宁省教育厅科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 重组日本七鳃鳗口腔腺分泌L-250蛋白抗凝血功效
- 日本七鳃鳗口腔腺分泌具组胺释放因子活性的TCTP模体蛋白-L-250的基因克隆与表达属于生物技术领域。涉及日本七鳃鳗口腔腺分泌L-250蛋白的cDNA序列及克隆,与其对应的蛋白质氨基酸序列及其在大肠杆菌或毕赤酵母中的表达...
- 李庆伟孙晶吴毓王继红白洁
- 文献传递
- 白眉蝮蛇去整合素Adinbitor的基因克隆、表达及其部分生物学活性被引量:20
- 2004年
- 为了寻找去整合素家族的新成员 ,研究其在抗血栓与抗肿瘤等方面的作用 ,从中国白眉蝮蛇毒腺中提取总RNA进行RT PCR扩增 ,获得了 2 19bp的白眉蝮蛇去整合素基因 .测序结果显示 ,其与韩国的同为蝮蛇去整合素的saxatilin的DNA序列同源性为 95 8% ,蛋白质序列同源性为 91 8% ,且蛋白质中含有去整合素的特征模体 RGD .将去整合素基因进行克隆、转化与诱导后 ,得到了该蛋白的可溶性高效表达 .经组氨酸亲和层析纯化 ,获得了分子量为 9kD的均质蛋白 ,并将其命名为adinbitor .活性测定结果显示 ,adinbitor能明显抑制由碱性成纤维细胞生长因子诱导的人脐静脉血管内皮细胞ECV30 4的增殖 ,诱导ECV30 4细胞发生凋亡 。
- 王继红任凤吴毓田晓光吴妍宁赵宝昌
- 关键词:去整合素基因克隆细胞增殖细胞凋亡血小板聚集
- 重组日本七鳃鳗口腔腺分泌具抗炎功效L-251蛋白
- 重组日本七鳃鳗口腔腺分泌PR-1蛋白L-251中性粒细胞抑制活性鉴定属于生物技术领域,涉及日本七鳃鳗口腔腺分泌L-251蛋白cDNA的序列及克隆,与cDNA对应的氨基酸序列及其在工程菌中的表达,以及L-251蛋白作为CD...
- 李庆伟吴毓白洁王继红
- 文献传递
- 人白细胞介素18在毕氏酵母细胞中的分泌表达被引量:3
- 2004年
- 目的 在酵母细胞中表达IL-18。方法 用Sac I 将pPIC9K-IL18线性化后,电转化毕氏酵母GS115,筛选后得到His+Mut+转化子,在BMGY和BMMY培养基中进行诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE和Western blot 分析。结果 SDS-PAGE和Western blot印迹杂交结果证实表达蛋白的相对分子量为21 000,与预期的分子量一致。结论 在毕氏酵母中成功的表达了IL-18。
- 徐跃飞吴毓张春鹏赵宝昌
- 关键词:白细胞介素毕氏酵母
- 重组日本七鳃鳗口腔腺分泌具抗炎功效L-251蛋白
- 重组日本七鳃鳗口腔腺分泌PR-1蛋白L-251中性粒细胞抑制活性鉴定属于生物技术领域,涉及日本七鳃鳗口腔腺分泌L-251蛋白cDNA的序列及克隆,与cDNA对应的氨基酸序列及其在工程菌中的表达,以及L-251蛋白作为CD...
- 李庆伟吴毓白洁王继红
- 文献传递
- N端缺失突变对核糖核酸酶抑制因子活性的影响被引量:2
- 2004年
- 人胎盘核糖核酸酶抑制因子(HRI)是一种存在于细胞浆中的50 kD的酸性蛋白质,富含亮氨酸和半肤氨酸.作为胞浆蛋白可保护细胞不受外来胰RN白s。侵袭.HRI主要结构是由7个富含亮氨酸的重复序列组成,7个亮氨酸重复单位有规律环状排列使N端、c端在空间上较为接近.用PcR方法在HRI cl〕NAS,端去除30个核普酸,并将此缺失突变的HRI的cl〕NA片段构建于质粒pPIcgK,电击转化入毕赤酵母(Pi峨i。 Pasto汀S)Gslls中,进行分泌型表达.对表达产物进行亲和层析纯化.实验结果表明,N端缺失突变的HRI与RN白s。A的亲合力较野生型HRI降低1倍,但依然具有竞争性抑制RNas。A的活性,表明HRIN端10个氨基酸残基缺失后并未丧失其抑制活性.
- 吴毓赵宝昌王继红任风吴妍宁赵鹏崔秀云
- 关键词:核糖核酸酶抑制因子缺失突变毕赤酵母蛋白质-蛋白质相互作用
- 真核细胞非经典蛋白分泌途径被引量:13
- 2009年
- 在生物体中,细胞间的信息传递是细胞生长、分化、发育、增殖、凋亡等生命活动的基本保证,而蛋白分泌是细胞间信息传递的重要方式。大多数分泌蛋白都是通过内质网-高尔基体(ER-Golgi)途径分泌的。然而越来越多的研究表明,存在着一类无信号肽的分泌蛋白,这类蛋白不依赖ER-Golgi途径就能分泌到细胞外发挥功能,被称为非经典分泌蛋白。非经典蛋白的分泌有其特有的机制,它对ER-Golgi分泌途径是一种必要和有益的补充。非经典分泌与细胞增殖、免疫反应、肿瘤形成、传染病病理学等密切相关。文章旨在对非经典分泌蛋白的特点、分泌机制及生物学意义进行概述。
- 张楠楠刘欣孙晶吴毓李庆伟
- 关键词:分泌蛋白信号肽
- 可溶性耐药相关钙结合蛋白被引量:2
- 2006年
- 可溶性耐药相关钙结合蛋白(sorcin)是一个21·6kD的胞浆蛋白,具有典型的EF手臂(EF-hand)钙结合位点,广泛存在于多种组织中,在心肌细胞中含量最丰富.Sorcin可与肌浆网钙离子通道RyR相互作用,影响心肌细胞兴奋——收缩偶联.另一方面,sorcin在肿瘤耐药细胞中大量表达,它可以与细胞中钙离子结合,引起细胞内游离钙离子浓度下降,然后导致钙离子所介导的磷酸酶活性降低,使得具有排药功能的P-gp糖蛋白磷酸化水平下降,最终导致耐药.一旦明确引发和维持细胞耐药的作用机制,就可为克服肿瘤耐药提供新的靶点.同时随着RyR活性抑制作用研究的深入,有望通过sorcin转基因技术治疗心力衰竭.本文主要对sorcin的结构特点和生物学特性进行综述,并初步分析其耐药机制.
- 张蓓蓓吴毓李庆伟
- 关键词:钙离子通道多药耐药
- 蛋白质泛素化降解途径被引量:4
- 2007年
- 泛素系统(UPS)广泛存在于真核生物中,是精细的特异性的蛋白质降解系统。它由泛素、26S蛋白酶体、多种酶(如E1、E2、E3、去泛素酶)构成。在泛素系统中,泛素(Ubiquitin,Ub)是一种序列保守的小分子蛋白,蛋白质与泛素结合后,被蛋白酶体以ATP依赖的方式降解。E1、E2酶分别称为泛素活化酶和泛素载体酶,使泛素通过Ub-腺苷酸中间产物形成E2-Ub巯基酯。泛素连接酶E3负责连接泛素和特异性的底物,这样泛素化的底物可以被26S蛋白酶体降解为若干肽段。泛素系统通过特异性的降解蛋白质,调节细胞分化、免疫反应,参与转录、离子通道、分泌的调控及神经元网络、细胞器的形成等等,泛素系统还与人类某些疾病有关。现对泛素系统的成员、作用机制和功能的研究进展作一介绍。
- 白洁吴毓李庆伟
- 关键词:泛素E326S蛋白酶体
- N-端缺失突变核糖核酸酶抑制因子在毕赤酵母中的克隆与表达
- 2004年
- 人胎盘核糖核酸酶抑制因子(HRI)是一种存在于细胞浆中的50kDa的酸性蛋白质,富含亮氨酸和半胱氨酸。作为胞浆蛋白可保护细胞不受外来的胰RNase的侵袭,同时做为RNase抑制剂在各实验室广为应用。HRI主要结构是由7个富含亮氨酸的重复序列组成,7个亮氨酸重复单位有规律环状排列使N-末端、C-末端在空间上较为接近。本文用PCR的方法在HRIcDNA5'端去除30个碱基,并将此缺失突变的HRI的cDNA片段构建于质粒pPIC9K,PCR和双酶切鉴定结果为阳性,测序结果证实在HRIcDNA5'端成功引入30个碱基的缺失突变。电击转化入毕赤酵母(Pichiapastores)GS115中,进行分泌型表达。对表达产物进行亲和层析纯化。经SDS-PAGE和Western-blot免疫印迹杂交,证实表达产物为N-端缺失突变的核糖核酸酶抑制因子。
- 吴毓王继红吴妍宁崔秀云赵宝昌
- 关键词:核糖核酸酶抑制因子缺失突变毕赤酵母