王健
- 作品数：6 被引量：70H指数：4
- 供职机构：三峡大学生物技术研究中心天然产物研究与利用湖北省重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金宜昌市科学技术研究与开发项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 一株高产蛋白酶芽孢杆菌的鉴定被引量：17
- 2009年
- 通过经典生理生化实验和16S rRNA序列分析,对新分离出的1株高产蛋白酶的芽孢杆菌进行系统鉴定。研究发现该菌卵磷脂酶试验和马尿酸盐反应均为阳性,并在60℃仍有蛋白酶活性。将该菌16S rRNA序列在Genbank中进行blast,发现其与枯草芽孢杆菌EHFS1-S02Hc的16S rRNA序列同源性高达99.63%,分离出的高产蛋白酶芽孢杆菌可能为一新亚种或生物型。
- 刘海军乐超银邵伟王健李金鞠梁薇
- 关键词：菌种鉴定芽孢杆菌蛋白酶水解特性
- 花魔芋组织培养的研究被引量：10
- 2009年
- [目的]筛选适合花魔芋生长的诱导、分化和生根培养基。[方法]以湖北省秭归县的花魔芋球茎和鳞片作为外植体，以MS培养基为基本培养基，添加不同激素，分别组配成10种诱导培养基和分化培养基进行组织培养，然后将诱导的魔芋丛芽切成单株后接入MS＋NAA0．1—0．5mg／L生根培养基。研究不同激素配比对愈伤组织形成和芽分化以及生根的影响。[结果]球茎和鳞片在MS＋6-BA1.0mg／L＋NAA1．0mg／L培养基上容易诱导愈伤组织，诱导效率分别为92％和90％，且愈伤组织容易分化。球茎在MS＋6-BA1．5mg／L＋NAA0．15mg／L培养基上分化效率为86．7％，鳞片在MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．2mg／L培养基上分化效率为83．3％。将球茎和鳞片分化出的不定芽转至MS＋NAA0．5mg／L的培养基上，生根率可达94％，20d后培养出完整植株。[结论]该试验初步建立魔芋的再生体系，为进行大规模生产魔芋种苗提供良好技术支持。
- 郭政宏乐超银王健刘海军李金鞠郭春绒
- 关键词：魔芋外植体激素再生植株
- 重组人粒细胞集落刺激因子在大肠杆菌中的表达(英文)被引量：3
- 2008年
- 背景:粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(human granulococyte-macrophage colony stimulating factor,hGM-CSF)是刺激造血前体细胞分化及增殖的细胞因子,同时在机体免疫调节过程中具有重要作用。大肠杆菌表达系统所具有的低成本、高产量等优点则是其他体系无法比拟的,因此仍是目前最常用的外源基因表达系统。目的:观察重组人粒细胞集落刺激因子在大肠杆菌中的表达。设计、时间及地点:观察性实验,于2007-02/06在三峡大学生物技术研究中心实验室完成。材料:质粒pBR322hGM-CSF购自美国ATCC菌种保藏中心。hGM-CSF抗体购自Sigma公司,IPTG、X-gal和载体pMGT-18,购自上海生物工程技术公司。方法:根据hGM-CSF基因序列设计出引物,以克隆载体质粒pBR322-hGM-CSF为模板,得到hGM-CSF基因并重组入原核表达载体pGEX-4T-1中,将经酶切和测序鉴定正确的重组质粒转化大肠杆菌DH5α,用IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE鉴定并用Western bloting检测。主要观察指标:hGM-CSF在大肠杆菌中的表达。结果:SDS-PAGE显示,得到相对分子量为40500的目的蛋白,表达量可达菌体总蛋白的17.9%。Western bloting检测表明,抗hGM-CSF单抗可与相对分子量为40500大小的电泳条带发生特异性反应。结论:实验构建了原核表达载体pGEX-hGM-CSF,并在大肠杆菌中诱导表达,得到hGM-CSF融合蛋白。
- 谢伟乐超银王健刘敏何光源
- 关键词：重组人粒细胞集落刺激因子大肠杆菌原核表达
- 魔芋软腐病致病机理及其生物防治被引量：17
- 2009年
- [目的]报道国内外学者关于魔芋软腐病生物防治的研究成果。[方法]通过近几年国内外文献调研,综述国内外学者在致病机理和生物防治方面的研究进展,并就今后魔芋软腐病防治提出几点设想。[结果]在对软腐欧文氏菌病原菌致病机理的深入研究中,明确了软腐欧文氏菌的群体调节系统,即细菌可根据特定信号分子浓度监测周围环境中自身或其他细菌的数量变化,能启动菌体中相关基因的表达来适应环境中的变化;明确欧文氏菌有一系列分泌系统,系统Ⅰ将蛋白酶从细胞质分泌到胞外空间一步完成,系统Ⅱ可分2步分泌果胶酶和纤维素酶,在致病中起重要作用;果胶酶是致病过程中最重要的酶。近年来生物防治魔芋软腐病初见成效,主要是利用生防细菌、生防真菌和植物活性物质以及利用植物基因工程防治魔芋软腐病。[结论]该研究为软腐病的有效防治提供了新的思路和手段。
- 王健乐超银郭政宏刘海军李金鞠
- 关键词：魔芋软腐病生物防治
- 魔芋细胞悬浮培养生产葡甘露聚糖的研究被引量：3
- 2010年
- [目的]对影响魔芋细胞悬浮培养及其次生代谢物葡甘露聚糖产生的主要影响因子进行研究。[方法]利用3,5-二硝基水杨酸测定葡甘露聚糖含量。[结果]在魔芋细胞悬浮液体培养葡甘露聚糖的过程中,采用MS培养基为基本培养基,pH值为6.0时有利于葡甘露聚糖的合成,25g/L乳糖可作为最适碳源;2,4-D在1.0mg/L时葡甘聚糖的积累效果明显;细胞分裂素6-BA使葡甘露聚糖积累明显高于KT,且1.5mg/L时葡甘露聚糖积累量较高,培养15d左右葡甘露聚糖含量达到最大。[结论]MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA1.5mg/L+乳糖25g/L,pH6.0,为魔芋细胞悬浮培养生产葡甘聚糖的较优培养基。
- 王健郭政宏刘海军李金鞠乐超银
- 关键词：魔芋细胞悬浮培养葡甘露聚糖
- 兰花香味相关基因的RAPD分子标记被引量：20
- 2006年
- 采用简化的CTAB法提取了16种有香和无香春兰的基因组DNA,并以此为模板,采用BA系列的100条随机引物,进行RAPD分析,其中引物BA0088(G08)对香花春兰的扩增产物中具有一条特异性的370 bp的条带,带型清晰,重复性较好,为进一步确定与香味成分相关基因连锁的RAPD标记打下了基础。
- 王健乐超银谢伟梁薇林直郭政宏
- 关键词：兰花RAPD分子标记
