潘博
- 作品数：14 被引量：28H指数：4
- 供职机构：河南科技学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划河南省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 2012年春北京抽检的啮齿类实验动物健康状况的病理学调查和分析被引量：7
- 2012年
- 2012年5月本实验室对北京16家实验动物单位的啮齿类实验动物的心、肝、脾、肺、肾、大肠和小肠进行组织病理学观察,通过石蜡切片HE染色、冰冻切片油红O染色、PAS染色等方法对啮齿类实验动物的健康状况进行鉴定。结果显示,绝大多数啮齿类实验动物为健康状态,部分非健康动物主要有肝脏脂肪变性、轻度肺脏病变、心脏颗粒变性和肾脏蛋白管型。这可能与饲养环境、饲料状况以及采样运输的应激有关,通过加强饲养管理可以使这种情况改善。
- 刘进姚皓王敏林竹王继宏彭云宋志琦康静静潘博王运盛杨利峰尹晓敏周向梅赵德明
- 关键词：病理学诊断脏器病变
- 用于大容量人源天然噬菌体抗体库的表达载体的构建及鉴定被引量：5
- 2012年
- 目的构建一个应用于大容量Fab段天然噬菌体抗体库的表达载体。方法用定点突变技术将表面呈现噬菌粒载体pDF上的BssHⅡ酶切位点改为BglⅡ酶切位点,然后分别在抗体轻链和重链位置插入自杀基因SacB,构建含自杀基因的噬菌粒载体pDF-D-SacB;利用抗乙肝表面抗原抗体的基因为模板,PCR扩增重链和轻链基因片段。将PCR扩增的轻链基因和重链基因分别插入载体pDF-D-SacB内,利用电转化的方法将其转入Trans1-Blue大肠杆菌,构建2个初级质粒,再利用初级质粒超感染BSl365菌,使其轻链与重链发生重组,获得重组质粒,进一步获得抗乙肝表面抗原抗体的噬菌体。之后利用该噬菌体感染大肠杆菌Trans1-Blue进行扩增,得到大量抗乙肝表面抗原的噬菌体抗体。最后,通过酶联免疫吸附剂测定检测所获得的抗体。结果通过向pDF重轻链区域插入SacB基因,改造抗体基因克隆位点,构建了pDF-D-SacB载体;经检测,pDF-D-SacB可以表达具有功能的Fab噬菌体抗体,可以在分泌Cre蛋白酶的细菌胞内发生预期的Cre-Loxp介导的定点重组。结论所获得的含自杀基因的噬菌粒载体pDF-D-SacB适用于构建大容量噬菌体抗体库。
- 潘博付文卓王晓娜张宝中米志强安小平刘大斌李存姜焕焕陈斌童贻刚
- 关键词：噬菌体抗体库乙肝表面抗原
- 小鼠Bax基因实时荧光定量PCR标准品质粒的构建被引量：2
- 2013年
- 为了能够快速、准确定量小鼠Bax基因的mRNA,构建了小鼠Bax基因的标准品质粒和标准曲线。根据GenBank中小鼠基因编码区保守序列,设计特异性引物,从N2a细胞中提取总RNA,利用RTPCR技术扩增该基因162bp的核苷酸片段,经纯化、连接和转化后,提取质粒并进行酶切、测序鉴定;将阳性重组质粒10倍递减稀释作为标准模板,通过SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,建立了Bax标准曲线及直线回归方程。结果表明产物熔解曲线峰值单一,引物特异性高;标准曲线相关系数R2=0.999,表明线性关系好。本试验成功构建了目的基因Bax的标准品质粒和标准曲线。
- 潘博蔡青鲁强付文卓王继宏潘耀谦
- 关键词：BAX基因实时荧光定量PCR
- 构建大容量噬菌体抗体库
- 噬菌体抗体库是把体外随机组合的全套抗体基因呈现在丝状噬菌体表面，通过抗原的亲和力选择和噬菌体扩增获得特异性抗体基因的技术。该技术已广泛用于制备人源单克隆抗体及免疫学研究中。
本研究通过构建噬粒载体并利用噬菌体抗体库...
- 潘博
- 关键词：噬菌体抗体库人源单克隆抗体FAB抗体
- 文献传递
- 噬菌体抗体库技术及其应用研究进展被引量：4
- 2010年
- 噬菌体呈现抗体库是近年发展的一项分子生物学新技术,它的建立是抗体技术领域中的一次革命性进展。它以其独特的构建和筛选系统,彻底改变了抗体制备的传统途径,使抗体工程技术进入了一个新的发展阶段,并对生物学领域中许多技术的发展起到了巨大的推动作用。该技术是迄今发展最成熟、应用最广泛的制备抗体技术。我们简要综述此项技术的研究应用进展。
- 潘博童贻刚
- 关键词：噬菌体抗体库
- 抗禽流感病毒H5N1分泌型IgA在中国仓鼠卵巢细胞中的表达被引量：1
- 2011年
- 分泌型IgA(SIgA)在机体的粘膜免疫中具有重要作用,在外分泌道中比单体IgA和IgG抗体具有更好的抗感染活性。为了表达抗禽流感病毒H5N1人-鼠嵌合分泌型IgA抗体,首先以本室先前构建的稳定表达IgA的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞系为基础,共转染分泌片和J链表达质粒,然后用抗生素Zeocin选择阳性克隆细胞,利用倍比稀释的方法筛选分泌SIgA的单克隆细胞,通过Western blotting分析培养上清中SIgA的表达情况。结果表明,在CHO细胞中成功表达了SIgA抗体,上述研究为研制分泌型IgA抗体制剂奠定了良好的基础。
- 李存张宝中安小平米志强刘大斌姜焕焕潘博王盛陈斌黄芬王娟王晓娜童贻刚
- 关键词：WESTERNBLOTTING
- 一种检测兔豆状囊尾蚴囊液抗体的阻断ELISA方法
- 一种检测兔豆状囊尾蚴囊液抗体的阻断ELISA方法，用于对兔豆状囊尾蚴病的早期检测和临床诊断，解决了目前兔豆状囊尾病还不能用血清学方法进行诊断的问题，为兔豆状囊尾蚴病的特异性诊断和综合防治提供有效的检测方法。本发明所述阻断...
- 潘耀谦潘博李瑞珍孙玉倩银梅唐海蓉张慧辉
- 文献传递
- 几株益生菌的体外抗新城疫病毒作用被引量：6
- 2010年
- 【目的】探讨益生菌的抗新城疫病毒(NDV)作用并分析其可能的机制。【方法】采用NDV血凝试验和MTT比色法,分别在体外和鸡胚成纤维细胞(CEF)上评价益生菌对NDV血凝价和抑制率的影响。【结果】所选择的5株益生菌及其代谢产物都极显著地降低了NDV的血凝价,而2株致病菌及其代谢产物对NDV的血凝价均没有影响,这一结果说明益生菌可能对NDV具有直接破坏的作用,并且具有菌株特异性。益生菌可以显著地提高CEF对NDV的抑制率,并且这种作用具有量效关系(P<0.01)。益生菌与细胞作用后再感染病毒,对NDV抑制率升高的结果反映了益生菌对NDV吸附细胞的阻断作用;从益生菌与病毒同时接入细胞后降低病毒对细胞侵害的现象,可以看出益生菌可能对病毒具有直接破坏作用;在细胞感染病毒后再接入益生菌对NDV抑制率极低的现象说明,病毒感染后益生菌再很难起作用。【结论】益生菌对NDV既具有直接破坏的作用,又可以阻断NDV对细胞的感染、抑制其在细胞内的增殖。
- 王占锋张萍付文卓张颖李甜甜潘博魏萍
- 关键词：益生菌抗病毒作用
- 2011年秋季实验用鼠健康状况的病理学调查和分析被引量：6
- 2012年
- 2011年10月本实验室对14家实验动物单位的实验用鼠进行了病理学抽检。主要内容是对实验动物的心、肝、脾、肺、肾、大肠和小肠进行取材,通过甲醛固定,石蜡切片HE染色、冰冻切片油红O染色、PAS染色等方法对实验用鼠的健康状况进行鉴定。结果显示,绝大多数实验用鼠为健康状态,而非健康动物主要以肝脏脂肪变性和轻度肺脏病变为主。这可能与饲养环境和饲料有关,通过加强饲养管理可以使这种情况得到改善。
- 王敏刘进林竹潘博王运盛康静静唐娜张嘉嘉胡凤娇杨利峰尹晓敏赵德明周向梅
- 关键词：病理学诊断脂肪变性PAS染色
- 构建应用于高质量噬菌体抗体库的表达载体
- 本发明公开了一种构建应用于高质量噬菌体抗体库的表达载体。本发明提供的载体，按照如下方法制备：1)将轻链区域SacB的编码基因插入到pDF的多克隆位点间，得到中间载体PSBX；2)将步骤1)得到的中间载体PSBX的BssH...
- 童贻刚安小平米志强潘博王晓娜张宝中
