黄颖
- 作品数：10 被引量：8H指数：2
- 供职机构：东北林业大学林学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省青年科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 刺激植物响应蛋白基因Epl1的载体构建及酵母转化
- 2014年
- [目的]构建刺激植物响应蛋白Epl1基因的真核表达载体,筛选多拷贝酵母转化子。[方法]以深绿木霉(Trichoderma atroviride)ACCC30153的cDNA为模板进行PCR获得Epl1基因片段,并将目的片段插入表达载体pPIC9K的相应位置,获得重组表达载体,并将pPIC9K-Epl1转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中,并用不同中终浓度的遗传霉素G418筛选多拷贝重组酵母菌株。[结果]对重组载体进行PCR及双酶切检测为阳性;在含有终浓度为2 mg/ml遗传霉素G418的YPD平板上筛选得到7株多拷贝的转化子GS115-Epl1,经PCR鉴定1株转化子呈阳性。[结论]Epl1基因的载体构建及多拷贝酵母转化子筛选为以后大量分离纯化Epl1蛋白并研究其功能奠定基础。
- 遇文婧刘志华王志英古丽吉米拉米吉提黄颖刁桂萍
- 关键词：毕赤酵母
- 毛果杨YABBY基因家族生物信息学分析被引量：1
- 2023年
- YABBY基因家族是仅存在于植物中的一类含有C2C2锌指结构域和YABBY结构域的转录调控因子,与植物的形态发育有关,在植物的茎、叶和花等器官的生长发育过程中起到重要的调控作用。本研究通过对毛果杨(Populus trichocarpa)YABBY基因家族生物信息学分析,共筛选出12个YABBY家族成员,分别位于第1、2、3、6、8、9、10、14、16和18号染色体。这些成员结构域保守,且具有低亲水性的特点。通过亚细胞定位预测,所有成员都定位在细胞核中。基因组织表达分析表明,毛果杨YABBY家族成员在不同组织中的表达有明显不同,在雌花、雄花和芽中表达量较高。
- 苗嘉琪黄颖宁蕊刁桂萍
- 关键词：生物信息学基因功能
- 山新杨响应细链格孢菌侵染的转录组分析及PdbMYB85基因功能的研究
- 由细链格孢(Alternaria alternata)引起的杨树叶枯病,致使发病树木叶早落,影响其正常生长,严重者或致幼苗枯死,树木早衰,造成严重的经济损失。然而,目前针对杨树响应链格孢侵染的分子机制尚不清楚,阻碍了林木...
- 黄颖
- 关键词：山新杨抗病机制MYB转录因子脂氧合酶
- 毛果杨丝氨酸蛋白酶抑制子PtrSPI的抗虫能力分析
- 2021年
- 【目的】研究毛果杨丝氨酸蛋白酶抑制子PtrSPI的抗虫功能,为开发新型林木抗虫生物农药奠定基础。【方法】本研究通过研究毛果杨丝氨酸蛋白酶抑制子基因PtrSPI的启动子及其在舞毒蛾幼虫取食胁迫下的表达模式,分析PtrSPI基因功能;利用真核重组蛋白PtrSPI饲喂舞毒蛾幼虫,观察记录幼虫的取食量、体质量和死亡率,并测定取食后的幼虫体内丝氨酸蛋白酶活性,探讨PtrSPI蛋白的抗虫能力。【结果】结果表明毛果杨丝氨酸蛋白酶抑制子基因PtrSPI的启动子区域共包含5个与植物抗病虫相关的元件;经舞毒蛾幼虫取食后,毛果杨叶片的PtrSPI基因呈先降后升的表达模式,且在取食30 h达到峰值,为空白对照的2.03倍;高质量浓度重组蛋白PtrSPI(300和500 mg/mL)对舞毒蛾幼虫的取食量和体质量有显著的抑制作用,而且分别在取食4和6 d后舞毒蛾幼虫死亡率均达到60%以上,而幼虫体内丝氨酸蛋白酶的活性在取食初期显著上升。【结论】本研究验证了毛果杨丝氨酸蛋白酶抑制子PtrSPI的抗虫能力,可为进一步研发新型无公害抗虫生物农药提供理论基础和研究材料。
- 遇文婧杨帅黄颖刁桂萍
- 关键词：生物农药舞毒蛾
- 刺激植物响应蛋白基因TatEpl1的克隆及原核表达载体构建被引量：1
- 2015年
- 以深绿木霉(Trichoderma atroviride)ACCC30153为试材,采用PCR技术克隆到刺激植物响应蛋白基因TatEpl1,并构建TatEpl1的原核表达载体。结果表明:经测序得到的cDNA和DNA序列长度分别为417bp和487bp,接受号分别为JN695780和JN695781。以cDNA为模板进行PCR获得TatEpl1基因片段,并将目的片段插入原核表达载体pGEX-4T-2的相应位置,获得重组表达载体pGEX-TatEpl1,并将其转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中获得重组菌株BL21-TatEpl1,经检测均呈阳性。
- 遇文婧刘志华刁桂萍黄颖王金杰王志英
- 关键词：原核表达
- 农杆菌介导棘孢木霉转化系统优化及突变体分析
- 木霉菌(Trichoderma spp.)是世界公知公认的植物真菌病害生防真菌。目前,木霉菌生防制剂是国际生物农药市场占有率最高的生防因子。然而,随着环境问题的加剧,在木霉菌剂施用于田间时,不可避免的会受到逆境因子的胁迫...
- 黄颖
- 关键词：突变体库生物防治逆境
- 文献传递
- 毛果杨丝氨酸蛋白酶抑制剂基因PtrSPI的克隆及真核表达被引量：1
- 2020年
- 利用PCR技术从毛果杨(Populus trichocarpa)中分离得到1条丝氨酸蛋白酶抑制剂基因PtrSPI,该基因cDNA编码区全长为1176 bp,可编码391个氨基酸。BlastP预测结果显示,该丝氨酸蛋白酶抑制剂属于SERPIN超家族。多序列比对结果表明,毛果杨PtrSPI基因的氨基酸序列与已报道的胡杨(P.euphratica)丝氨酸蛋白酶抑制剂氨基酸序列XP_011030699同源性最高,相似性为92%,且蛋白的C端氨基酸序列都含有高度保守的反应中心环(RCL)。在此基础上,成功构建了PtrSPI基因的重组真核表达载体pPICK-PtrSPI并获得了重组毕赤酵母菌株GS115-PtrSPI。利用终质量分数为0.5%甲醇诱导重组真核蛋白表达,SDS-PAGE电泳结果显示,在42648.45处出现了重组蛋白,与预期值一致。
- 杨帅黄颖王志英刁桂萍
- 关键词：丝氨酸蛋白酶抑制剂异源表达
- 木霉菌的生物防治分子机理被引量：3
- 2013年
- 木霉菌是重要的植物病害生物防治菌,该文在简要介绍木霉菌及其生防机制的基础上,综述了木霉与病原菌的互作关系,通过对营养和空间的竞争来抑制病原真菌的生长和繁殖,木霉菌对病原真菌的重寄生机制、木霉菌产生抗生素抑制或杀死病原真菌的抗生机制、以及木霉菌促进植物生长诱导植物系统抗病性机制等几方面阐述了木霉的生物防治机制,以期为全面了解木霉对植物真菌病害生物防治机制提供理论指导。
- 古丽吉米拉米吉提王志英王娜窦恺黄颖刘志华
- 关键词：木霉植物病害生物防治
- 棘孢木霉T4小分子疏水蛋白基因hyb2克隆及序列分析被引量：2
- 2012年
- 为了深入研究生物防治菌棘孢木霉T4菌株小分子疏水蛋白hyb2的功能,基于已知小分子疏水蛋白基因hyb2部分cDNA序列设计引物,分别以棘孢木霉T4菌株菌丝体总mRNA和基因组DNA为模板,进行PCR扩增,克隆获得hyb2的全长cDNA和DNA序列,其GenBank接受号分别为JX014433和JX185070,cDNA序列编码区长度为321bp,编码106个氨基酸。BlastP相似性分析表明该基因与深绿木霉的Tahyd5a(ABS59366)基因同源性最高为87%,SignalP信号肽分析表明N端第16和17个氨基酸中间有一个信号肽剪切位点(AFA||AP)。Pfam蛋白家族分析表明它属于hydrophobin_2 superfamily家族。将棘孢木霉T4菌株小分子疏水蛋白基因hyb2对深绿木霉ATCC74058基因组和绿色木霉Gv29-8基因组进行同源性搜索,在2个近缘种的基因组上分别获得9个和8个同源序列。其中,深绿木霉ATCC74058的hyb-a-7和绿色木霉Gv29-8的hyb-v-5疏水蛋白与棘孢木霉hyb2相似性最高分别为87%和70%,2个序列分别位于深绿木霉ATCC74058染色体骨架5和绿色木霉Gv29-8染色体骨架22上。
- 古丽吉米拉米吉提范海娟刘志华王娜窦恺黄颖王志英
- 关键词：基因克隆生物信息学
- 一株含有刺激植物响应蛋白Epl1基因的大肠杆菌工程菌及其构建方法
- 一株含有刺激植物响应蛋白Epl1基因的大肠杆菌工程菌及其构建方法，它涉及一株含有刺激植物响应蛋白Epl1基因的大肠杆菌工程菌及其构建方法。本发明一株含有刺激植物响应蛋白Epl1基因的大肠杆菌工程菌BL21-Epl1为革兰...
- 刘志华遇文婧王志英刁桂萍张荣沭范海娟黄颖宋小双
- 文献传递
