杜晶春
- 作品数：28 被引量：57H指数：4
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- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广州市属高校科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- JNJ-7706621对阿霉素耐药乳腺癌细胞生长的抑制作用研究
- 2017年
- 目的研究JNJ-7706621对人阿霉素耐药MCF-7/ADR乳腺癌细胞生长的作用。方法采用MTT试验检测JNJ-7706621对MCF-7/ADR耐药细胞生长的影响;采用TUNEL染色试验分析JNJ-7706621对MCF-7/ADR耐药细胞凋亡的激活作用;Caspase酶活性检测分析JNJ-7706621处理后,MCF-7/ADR细胞中Caspase-8、Caspase-9活化程度;应用流式细胞周期分析检测JNJ-7706621对MCF-7/ADR耐药细胞周期的影响。结果 JNJ-7706621能有效抑制阿霉素耐药细胞MCF-7/ADR的生长,并呈现明显的浓度依赖性,作用48 h的IC50仅为0.83μmol/L。2μmol/L JNJ-7706621作用24 h后,TUNEL染色阳性的MCF-7/ADR细胞比率较对照组显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);MCF-7/ADR细胞中Caspase-8、-9酶活性均显著升高,差异亦具有统计学意义(P<0.05)。在1μmol/L JNJ-7706621作用24 h后,G2/M期细胞比率由对照(7.1±1.3)%升高至(23.8±3.1)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 JNJ-7706621能同时激活内外源性凋亡途径,诱导MCF-7/ADR细胞凋亡的发生,并将MCF-7/ADR细胞周期阻滞在G2/M期,从而对阿霉素耐药MCF-7/ADR细胞的生长发挥有效抑制作用。
- 谢闺娥杜晶春徐霞
- 关键词：乳腺癌细胞阿霉素耐药MCF-7/ADR凋亡细胞周期
- 雷公藤红素对紫杉醇耐药乳腺癌细胞生长的抑制作用被引量：4
- 2016年
- 目的研究雷公藤红素对紫杉醇耐药乳腺癌细胞生长的作用及其机制。方法用MTT法检测雷公藤红素对紫杉醇耐药MCF-7/TAX细胞生长的影响;Annexin V-FITC/PI染色检测雷公藤红素对MCF-7/TAX凋亡的诱导作用;Caspase酶活性测定分析雷公藤红素作用后,MCF-7/TAX细胞中Caspase-8、-9活化程度。结果 MCF-7/TAX对紫杉醇耐药指数达19.39;而雷公藤红素对MCF-7/TAX细胞的生长有高效抑制作用,且呈现明显的剂量依赖性,对其作用48 h的IC50为0.92μmol/L,MCF-7/TAX对雷公藤红素的敏感性高于MCF-7,耐药指数仅为0.77。雷公藤红素作用后,Annexin V染色阳性的MCF-7/TAX细胞较对照明显升高。Caspase酶活性测定结果显示,雷公藤红素作用24 h后,MCF-7/TAX细胞中Caspase-8、-9酶活性均显著升高。结论雷公藤红素能同时激活内外源性凋亡途径,诱导MCF-7/TAX细胞凋亡的发生,从而高效抑制紫杉醇耐药MCF-7/TAX乳腺癌细胞的生长。
- 谢闺娥杜晶春徐霞
- 关键词：紫杉醇耐药雷公藤红素凋亡
- 临床生化专业课程互动式教学的探索
- 本文主要围绕互动式教学的内涵、特征、互动式教学在临床专业课程中的应用、实施互动式教学的体会以及实施互动式教学存在的问题等内容探讨了临床生化专业课程互动式教学模式。
- 刘忠民刘利东肖洪广高俊杜晶春
- 关键词：教育改革互动式教学教学模式
- 文献传递
- 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体修饰的人羊水间充质干细胞
- 2013年
- 背景:以间充质干细胞为载体的基因治疗新方法具有广阔的应用价值。目的:利用慢病毒感染方法将肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体导入人羊水来源的间充质干细胞,以期获得稳定表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的人羊水间充质干细胞。方法:首先利用多位点Gateway技术构建慢病毒表达载体pLVpuro/EF1α-肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体,将该表达载体与慢病毒包装质粒同时转染293FT细胞,从而获得携带肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因的慢病毒颗粒。利用重组慢病毒颗粒感染人羊水间充质干细胞,并通过抗生素筛选的方法获得稳定表达目的基因-肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的羊水间充质干细胞,并对其稳定性进行鉴定。结果与结论:酶联免疫吸附法和Westernblot检测结果表明,肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体蛋白在感染的人羊水间充质干细胞内呈高表达,其表达量可达到72μg/L。说明实验成功制备了肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体修饰的人羊水间充质干细胞。
- 杜晶春朱蕊范婷婷王鹏鲲林勇平徐霞
- 关键词：干细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因修饰慢病毒载体目的基因国家自然科学基金
- CD73在人骨髓间充质干细胞免疫调节功能中的作用被引量：2
- 2012年
- 目的探讨CD73在人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)免疫调节功能中的作用。方法分离、培养hBMSCs,利用流式细胞分析技术检测hBMSCs上CD73分子的表达情况,同时检测CD73水解腺苷一磷酸(AMP)的能力。利用体外植物凝集素(PHA)刺激淋巴细胞增殖的方法检测CD73是否参与hBMSCs的免疫调节功能。结果 hBMSCs高表达CD73分子,并具有水解AMP的活力,特异性抑制剂APCP能够阻断CD73的水解酶活性并降低hBMSCs的免疫调节活性。体外混合培养实验结果显示CD73参与hBMSCs介导的抑制淋巴细胞增殖作用。结论 hBMSCs表达的CD73分子具有水解酶活性并参与hBMSCs的免疫调节功能。
- 杜晶春吴玉李雪燕
- 关键词：人骨髓间充质干细胞免疫调节
- 免疫传感器载体上SPA法固定抗体的条件探讨被引量：1
- 2007年
- 目的以乙肝病毒表面抗体为研究对象,摸索在免疫传感器载体上用葡萄球菌A蛋白(staphy lococcal protein,SPA)固定抗体的最佳条件。方法用SPA法在载体上固定系列浓度酶标记抗体,绘制抗体浓度-吸光度曲线,寻找SPA与抗体的最佳结合条件。结果实验表明5μl浓度为1mg/ml的SPA与10μl浓度为300mIU/ml的抗体固定效果最佳。结论用SPA法在免疫传感器载体上固定乙肝病毒表面抗体,能使检测达到较好的重现性、稳定性、线性和较宽的检测范围,为生物传感器用于临床免疫检测打下基础,具有实际的应用价值。
- 王丹廖伟娇杜晶春
- 关键词：免疫传感器葡萄球菌A蛋白
- 新型慢病毒载体的构建及其在人骨髓间充质干细胞基因转导中的应用被引量：1
- 2011年
- 背景:构建一个组成性表达某特定基因同时携带荧光报告基因和抗生素筛选基因的慢病毒载体目前未见报道。目的:观察新型慢病毒载体pLVpuro/EF1α-PEDF-IRES-EGFP在人骨髓间充质干细胞基因转导中的表达。方法:通过PCR在PEDF基因的两端加上attB位点,构建表达载体pLVpuro/EF1α-PEDF-IRES-EGFP,将表达载体与包装质粒(ViraPowerTM Lentiviral Packaging Mix)共转染293FT细胞。通过多次感染的方法将慢病毒载体导入人骨髓间充质干细胞,转导后第7天开始使用1～5mg/L嘌呤霉素筛选5d,得到表达PEDF和EGFP的人骨髓间充质干细胞,并进行Western、Elisa的鉴定分析。结果与结论:经PCR和测序证实,慢病毒表达载体pLVpuro/EF1α-PEDF-IRES-EGFP构建成功;将其成功导入人骨髓间充质干细胞,经过筛选获得纯化的过表达PEDF基因的绿色荧光细胞群。
- 卢晓芳杜晶春李磊赖文玉张秀明李伟强杨霞项鹏
- 关键词：慢病毒人骨髓间充质干细胞PEDFEGFP
- 中国青岛文昌鱼巨噬细胞迁移抑制因子的研究
- 该文综合应用现代分子生物学方法与技术,从核酸水平和蛋白质水平,对中国海洋珍稀物种青岛文昌鱼巨噬细胞迁移抑制因子(Bbt-MIF)进行较为系统的研究.以期阐明巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)在免疫系统进化过程中和其它生命活动...
- 杜晶春
- 关键词：青岛文昌鱼巨噬细胞迁移抑制因子基因结构酶学活性
- 文献传递
- 金钱鱼毒腺cDNA表达文库的构建及EST序列分析被引量：13
- 2004年
- 以金钱鱼 (Scatophagusargus)毒腺为出发材料 ,构建以真核表达载体pcDNA3 0为基础的金钱鱼毒腺cDNA表达文库 .应用SMARTTM cDNALibraryConstruction技术和生物信息学分析等方法 ,通过对文库克隆的序列测定和初步生物信息学分析 ,获得了 2 0 1个金钱鱼新表达序列标签 (ESTs) ,其中已确定全长cDNA的克隆有 2 7个 ,包括多个核糖体大小亚基蛋白 (ribosomalprotein)、细胞凋亡相关蛋白 (programmedcelldeath 10 ) ,G蛋白信号调控子 (Gproteinsignalingregulator)、胸腺素(thymosinbeta 4 )、延伸因子 (translationelongationfactor 1 alpha)和泛素 (ubiquitin)等 .金钱鱼毒腺cDNA表达文库的成功构建 ,为研究金钱鱼毒腺的活性组分及其作用机制奠定了基础 。
- 陈慧萍姜孝玉涂洪斌杜晶春卫剑文杨文利徐安龙
- 关键词：金钱鱼毒腺CDNA功能基因
- TAT-Apoptin对肿瘤细胞的促凋亡作用
- 2017年
- 目的构建TAT-Apoptin的原核表达载体,表达并纯化凋亡素蛋白,检测其对多种肿瘤细胞的抑制作用。方法利用PCR合成TAT-Apoptin序列,并将序列连接到pET-28b(+)原核表达载体的多克隆位点上,构建pET-28b-Apoptin载体,然后将重组载体转入E.coli BL21宿主菌,IPTG诱导表达,利用Ni-NTA亲和柱进行纯化获得目的蛋白。将TAT-Apoptin加入到肿瘤细胞中,用CCK8法检测TAT-Apoptin对肿瘤细胞的抑制作用。结果成功构建pET-28b-Apoptin质粒,IPTG诱导宿主菌表达TAT-Apoptin,经SDS-PAGE分析,在15×10~3Mr处发现目的蛋白条带,与预期一致。镜检、CCK8法检测发现纯化的TAT-Apoptin对肿瘤细胞A549、MDA-MB-231、SKB-R3均具有一定的促凋亡作用。结论 TAT-Apoptin原核表达载体构建完成,表达的TAT-Apoptin对肿瘤细胞生长有促凋亡作用。
- 周城波刘安琪杜晶春徐霞
- 关键词：凋亡素原核表达肿瘤凋亡
