乐易林
- 作品数：14 被引量：90H指数：5
- 供职机构：江苏大学环境与安全工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目江苏高校优势学科建设工程项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程农业科学更多>>
- 微生物遗传转化筛选标记及其生物安全性的研究进展被引量：5
- 2016年
- 在分子生物技术中,筛选标记基因是遗传转化载体所必备的基本元件之一,其主要功能是在基因操作中进行目标克隆的筛选,以及在应用过程中通过选择压力维持基因重组性状。抗药基因是微生物遗传转化中常用的筛选标记,大肠杆菌载体和一般穿梭载体中通常带有抗药基因。带有抗药基因的工程菌可以被广泛地应用于酶和有机化学品的发酵生产,因为工业发酵过程是在封闭系统中进行的,并且最终产品需要经过提炼。但是当人们需要用基因改良的菌株进行食品和饲料加工、环境修复、病虫害生物防治时,抗药基因类筛选标记应该被禁止使用。因此,发展生物安全性筛选标记成为遗传转化技术推广应用中的一个技术关键。本文介绍常用作筛选标记的抗药基因,以及针对抗药基因的安全性问题而发展的无选择标记的遗传转化技术及生物安全性筛选标记的基因工程技术。葡萄糖胺合成酶基因是近年发展起来的新型生物安全性筛选标记,它弥补了其他营养缺陷互补型和功能附加型筛选标记的缺陷,具有广阔的应用前景。
- 乐易林孙宇王洪成邵蔚蓝
- 关键词：筛选标记基因生物安全性
- 里氏木霉以稻草和麸皮为基质产木聚糖酶的研究被引量：2
- 2005年
- 以稻草和麸皮为主要基质,对里氏木霉RutC-30产木聚糖酶的固体发酵条件进行研究。试验表明:固态发酵培养基中添加麸皮不利于产木聚糖酶,最适氮源为(NH4)2SO4,干料与水分的比例为1∶3·5,并分析了无机盐对里氏木霉RutC-30产木聚糖酶的影响:MgSO4·7H2O>MnSO4·H2O>ZnSO4·H2O>FeSO4·7H2O。酶粗酶液的最适作用pH为4·8,最适反应温度为55℃。
- 熊涛乐易林程池曾哲灵
- 关键词：木聚糖酶里氏木霉麸皮基质稻草(NH4)2SO4
- 纤维素乙醇高温发酵的研究进展与展望被引量：3
- 2013年
- 利用高温细菌发酵,纤维素乙醇生产有望实现"生物质降解-乙醇发酵-乙醇蒸馏"过程的同步化,从而最大限度地降低纤维素乙醇的生产成本;这是一个目标更高、道路更远、科学性更强的可再生能源发展策略。纤维素乙醇高温发酵研究已经取得了重要进展,目前面临的主要挑战包括发酵乙醇的高温细菌的遗传转化系统不够稳定、缺少内源的高活性和耐热性纤维素酶,以及乙醇代谢调控机理有待进一步解析。这些科技难题将会在DNA生物合成和进化技术、细胞生物学技术,以及合成生物学技术的发展中得到解决。
- 乐易林邵蔚蓝
- 关键词：纤维素乙醇代谢调控遗传转化系统合成生物学
- 红色亚栖热菌耐热木聚糖酶的克隆表达及生物信息学分析被引量：1
- 2015年
- 从自主分离的Meiothermus.rubber菌株的基因组中克隆到木聚糖酶基因,并进行了超量表达、重组酶的纯化和酶学性质研究。结果表明,重组木聚糖酶Mru是热稳定性酶,最适反应温度为65℃,能够有效降解木聚糖产生木糖和木二糖。生物信息学分析发现,木聚糖酶Mru与数据库中来自亚栖热菌的木聚糖酶的同源性为60%~100%。在木聚糖酶Mru的结构模型中,GH10木聚糖酶的保守位点大多位于β折叠,α螺旋保守性很低。本研究揭示,木聚糖酶Mru代表一类新型热稳定性GH10木聚糖酶。
- 俞洁琼王洪成何正文乐易林邵蔚蓝
- 关键词：木聚糖酶生物信息学分析
- 大肠杆菌热激反应研究及其在重组蛋白表达中的应用被引量：3
- 2013年
- 当大肠杆菌所处的环境温度忽然升高时,细胞体内会激发热激反应,体内会迅速合成多种热激蛋白,由热激转录因子调控的热激蛋白主要包括一些分子伴侣、蛋白降解酶、折叠辅助蛋白等。热激蛋白可以促进蛋白正确折叠,降解错误折叠的蛋白。主要介绍大肠杆菌热激蛋白的表达调控及其功能,利用热激转录因子发展的新型温控分泌表达系统及其在蛋白可溶性表达中的应用,以及热激分子伴侣与重组蛋白共表达的研究进展。
- 乐易林
- 关键词：大肠杆菌热激反应
- 里氏木霉Rut C-30产非淀粉多糖酶系分析及木聚糖酶优良菌株选育
- 本文以里氏木霉Rut C-30为出发菌株,对其产生的非淀粉多糖酶系进行分析,通过UV诱变选育出产木聚糖酶的优良菌株。
里氏木霉Rut C-30以稻草和麸皮为基质进行固体发酵,通过不同碳源及添...
- 乐易林
- 关键词：非淀粉多糖酶木聚糖酶
- 文献传递
- 生物保鲜技术的研究进展被引量：56
- 2004年
- 生物保鲜材料因为无毒、无副作用、可降解等特点已成为人们关注的热点。文中简述生物保鲜的特点 ,分类介绍了 6种生物保鲜技术 ,并对人们用于开发生物保鲜技术的微生物种类进行归纳 ,以及对生物保鲜的一般机理和应用前景进行了介绍。
- 熊涛乐易林
- 关键词：生物保鲜技术食品保鲜
- 原位构建基因突变文库的方法及试剂盒
- 本发明为基因定向进化提供一种快速、通用的原位构建基因突变文库的新方法，以及应用该方法构建基因突变文库的试剂盒。该方法具有以下特点：(1)极耐热性DNA连接酶在PCR过程中介导环状质粒的扩增；(2)在小型表达载体中对目标基...
- 邵蔚蓝乐易林裴建军
- 文献传递
- 嗜热真菌纤维素酶的CBD与海栖热袍菌的纤维素酶融合表达被引量：6
- 2009年
- 将嗜热真菌毛壳菌纤维素酶Cel7A的纤维素结合结构域编码区与极端嗜热厌氧菌海栖热袍菌的纤维素酶CelB基因进行融合,构建重组质粒pHsh-CBD-CelB,并在大肠杆菌中表达。对融合蛋白进行纯化,通过热处理和离子交换层析,纯化到的融合蛋白SDS-PAGE电泳图谱显示为单一条带。对融合蛋白的特性研究,结果表明融合蛋白降解CMC的最适反应温度为90°C,结晶纤维素吸附实验表明该融合蛋白具有结合结晶纤维素的能力,并且融合蛋白降解CMC与结晶纤维素的能力得到提高。
- 乐易林邵蔚蓝
- 关键词：海栖热袍菌嗜热毛壳菌融合蛋白
- 超嗜热神袍菌介导的碳水化合物转化被引量：1
- 2015年
- 超嗜热神袍菌生活在高温海洋环境或地下油田,最适生长温度为76-82℃,是分解和代谢复杂多糖能力最强、生长温度最高的以H2、CO2、乙酸为主要代谢产物的细菌.本文以海栖热袍菌为例对超嗜热神袍菌介导的碳水化合物转化进行综述.超嗜热神袍菌具有多重的碳代谢中心途径以及高活性的能量代谢和发酵途径,显现出极强的碳水化合物转化能力.超嗜热神袍菌能够分解和利用各种多聚糖,海栖热袍菌基因组中与糖和多糖的代谢有关的编码基因占7%,会产生各种海藻水解酶、纤维素酶、淀粉酶、果胶裂解酶和半纤维素酶等,这种完善的多聚糖水解酶系能够使超嗜热神袍菌对其生态环境可能出现的各种复杂碳水化合物进行水解和利用.通过研究超嗜热神袍菌在极端高温下迅速转化难降解多糖为发酵产物的机理,可以为生物质的综合利用提供必要的理论支持,而其产生的具有热稳定性和高活性的酶在工业生产中具有巨大的应用潜力.
- 左万兵乐易林邵蔚蓝
- 关键词：海栖热袍菌碳代谢水解酶
