王思涵
- 作品数：14 被引量：9H指数：1
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- 小分子化合物Me6TREN促进小鼠骨髓中造血干/祖细胞的增殖被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨小分子化合物Me6TREN对小鼠骨髓中造血干/祖细胞的增殖作用。方法:采用细胞计数、细胞集落形成能力检测、流式细胞术检测细胞表面标志等实验技术,观察Me6TREN对小鼠骨髓细胞的影响。结果:皮下注射Me6TREN 12 h后,Me6TREN组的集落形成能力、造血干/祖细胞表面标志lin-Sca-1+c-Kit+的比例均明显高于对照组;在体外分离培养的小鼠骨髓单个核细胞,4 d后Me6TREN组细胞的集落形成能力及造血干/祖细胞的增殖能力均高于对照组。结论:Me6TREN对小鼠骨髓造血干/祖细胞有一定的促增殖作用。
- 杨舒张静张静王思涵范增王静雪韩毅田宇何丽娟陈琳岳文李艳华
- 关键词：扩增
- CAPE在体外培养造血干/祖细胞中的用途
- 本发明涉及CAPE在体外培养造血干/祖细胞中的用途。在造血干/祖细胞体外扩增体系中添加一定浓度的CAPE，扩增后的人脐血单个核细胞或CD34阳性细胞中造血干/祖细胞的比例明显增加，总集落数量显著提高，从而，可以有效促进造...
- 裴雪涛李艳华刘一鸣张博文张静王思涵何丽娟姚海雷
- 文献传递
- 诱导脐带血来源的CD34+细胞重编程获得诱导性多能干细胞（iPS cells）
- ＜正＞目的:目前已经利用转录因子的表达使得人类各种成体细胞（表皮成纤维细胞、间充质干细胞、神经干细胞、肝细胞、外周血细胞等）重编程形成诱导性多能干细胞（iPS cells）,然而对脐带血来源的细胞的诱导仍在研究
- 姚海雷张文成王思涵李保伟张锐习佳飞周军年吕洋曾泉施双双何丽娟南雪李艳华岳文裴雪涛
- 文献传递
- 体外诱导巨核系祖细胞的三维细胞培养方法
- 本发明公开了一种体外诱导巨核系祖细胞的三维细胞培养方法。该方法将单个核细胞培养于细胞培养袋中，并置于跷跷板式生物反应器上进行培养，其中，所述跷跷板式生物反应器的振荡角度为2-13°，转速为3-40rpm。采用该三维细胞培...
- 裴雪涛陈琳谢小燕刘大庆岳文吕洋李思霆王思涵姚海雷贾雅丽
- 文献传递
- 饱和胺类化合物在制备抗辐射损伤药物中的应用
- 本发明公开了饱和胺类化合物的新用途——在制备抗辐射损伤药物中的应用。实验证明，饱和胺类化合物能够提高辐射损伤动物的外周血中白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血小板（PLT）的含量，促进骨髓造血干/祖细胞的增殖、造血系统...
- 裴雪涛李艳华王思涵张静姚海雷师伟岳文
- CAPE在体外培养造血干/祖细胞中的用途
- 本发明涉及CAPE在体外培养造血干/祖细胞中的用途。在造血干/祖细胞体外扩增体系中添加一定浓度的CAPE，扩增后的人脐血单个核细胞或CD34阳性细胞中造血干/祖细胞的比例明显增加，总集落数量显著提高，从而，可以有效促进造...
- 裴雪涛李艳华刘一鸣张博文张静王思涵何丽娟姚海雷
- 文献传递
- 神经元限制性沉默因子在NTera2/CloneD1细胞向神经元分化模型中表达的检测
- 2011年
- 目的:建立NTera2/CloneD1细胞向神经元分化的模型,检测神经元限制性沉默因子(NRSF)经分化培养基诱导后表达的变化。方法:收集正常培养的NTera2/CloneD1细胞及经全反式维甲酸(RA)、阿糖胞苷(AraC)、尿苷分阶段诱导共28 d的细胞,显微镜下观察诱导前后细胞的形态学变化;免疫荧光法检测NTera2/CloneD1细胞诱导前后干性标志Nestin、Sox2和成熟神经元特异性标志NF-200、β-tubulinⅢ的表达情况;应用RT-PCR和免疫荧光法对NRSF进行mRNA和蛋白水平的检测。结果:显微镜下观察到正常培养的NTera2/CloneD1细胞呈克隆样生长,经分化培养基诱导后的NTera2/CloneD1细胞表现出典型的神经元样细胞形态。免疫荧光检测表明,未诱导的NTera2/CloneD1细胞表达神经干细胞的标志Sox2、Nestin,不表达成熟神经元特异性蛋白NF-200、β-tubulinⅢ;而经RA等诱导分化的细胞则不表达Sox2、Nestin,表达NF-200、β-tubulinⅢ。RT-PCR和免疫荧光检测显示,NRSF在诱导分化后的NTera2/CloneD1细胞中的表达量显著降低。结论:建立了NTera2/CloneD1细胞向神经元分化的模型,NRSF在诱导后的NTera2/CloneD1细胞中表达量显著下调,提示NTera2/CloneD1细胞在诱导过程中可能通过下调NRSF,使受到NRSF负性调控的神经元特异性蛋白启动表达并上调,进而实现NTera2/CloneD1细胞向神经元的定向分化。
- 张静王思涵张博文姚海雷陈琳吕洋南雪岳文李艳华裴雪涛
- 关键词：神经元分化神经元限制性沉默因子
- 间充质干细胞对造血干/祖细胞分化为巨核细胞的影响被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨间充质干细胞(MSC)共培养对体外诱导脐带血单个核细胞来源的造血干/祖细胞生成巨核细胞的影响。方法:分离得到骨髓和脐带2种来源的MSC,并对它们进行表面标志和多向分化能力的鉴定,同时通过实时定量PCR及对RT-PCR产物的电泳分析,对比相同培养代数下2种MSC表达造血因子的情况;用梯度离心法分离得到单个核细胞,通过直接接触或Trans-well分隔的方式分别与MSC共培养,观察细胞增殖情况,并检测巨核系特异性的表面标志和相关基因的表达。结果:骨髓和脐带来源的MSC均分泌对巨核细胞增殖分化有促进作用的造血因子,与造血干/祖细胞直接共培养,对于巨核细胞的增殖有明显的促进作用,分化效果不明显;在非接触共培养的条件下,对巨核细胞的增殖及分化都产生促进作用,且骨髓来源的MSC较脐带来源的MSC效果更加明显。结论:MSC与脐带血造血干/祖细胞非接触培养,对其向巨核分化和增殖的促进作用明显,本实验所用的骨髓来源MSC促分化效果更好。本研究为今后进一步优化巨核系诱导分化体系奠定了基础,并对未来体外大规模制备巨核系祖细胞应用于临床治疗有一定的指导作用。
- 曲洺逸王静雪王静雪王思涵房芳陈琳张文成贾雅丽岳文谢小燕
- 关键词：巨核细胞间充质干细胞分化共培养
- 人造血转录因子GATA-1的克隆、表达及其对间质细胞的生物学作用
- 2013年
- 目的:构建人GATA-1全长过表达载体,对其进行过表达,并初步探讨其在人非造血细胞(人脐静脉内皮细胞、人成纤维细胞)中的生物学作用。方法:以人脐带血cDNA为模板,采用高保真PCR获得GATA-1的CDS序列,连接至pGEM-T Easy载体,构建pBPLV-GATA1慢病毒表达质粒,并对上述载体进行NheⅠ、XbaⅠ双酶切和测序鉴定,鉴定正确后,在293T细胞中进行慢病毒包装,浓缩病毒后,对我们原代分离培养的人脐静脉内皮细胞和成纤维细胞进行慢病毒感染,采用流式分选对阳性目的细胞进行纯化,阳性细胞扩增后进行Western印迹鉴定;以人包皮成纤维细胞(HFF)为研究对象,在光学及荧光显微镜下观察细胞形态变化情况,CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞表面标志表达情况。结果:双酶切和测序结果表明克隆了1242 bp的人GATA-1全长CDS序列,经Western印迹检测,GATA-1在293T细胞中获得瞬时表达;获得了人GATA-1稳转细胞株,对稳转细胞株的检测表明,GATA-1对HFF细胞增殖具有一定的抑制作用,但对HFF细胞形态及细胞表面标志CD90、CD29的表达无明显影响。结论:构建了人GATA-1慢病毒表达载体及其稳转细胞株,GATA-1蛋白对间质细胞的增殖有一定的抑制作用。
- 南雪曾泉王静雪张文成房芳王思涵岳文周军年裴雪涛
- 关键词：GATA-1间质细胞增殖
- 诱导脐带血来源的CD34+细胞重编程获得诱导性多能干细胞(iPS cells)
- 姚海雷张文成王思涵李保伟张锐习佳飞周军年吕洋曾泉施双双何丽娟南雪李艳华岳文裴雪涛
