高永
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 供职机构：浙江理工大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 复制缺陷型腺病毒PCA的构建及其对结肠癌细胞生长的影响被引量：1
- 2013年
- 通过同源重组方式,利用Adeasy系统成功构建携带p14ARF基因的复制缺陷型腺病毒,命名为AdpShuttle-CMV-p14ARF(PCA),并研究其对结肠癌细胞株SW480及HT-29的杀伤作用。PCR方法鉴定阳性重组子病毒;MTT法检测PCA对细胞增殖的影响;Hoechst33258荧光染色法检测细胞凋亡形态学变化;结晶紫染色法定性分析PCA对两种结肠癌细胞的杀伤作用。结果显示:经目的病毒PCA作用,SW480及HT-29出现明显病变和生长抑制现象,并呈现出时间和浓度依赖性;Hoechst染色后观察到细胞内出现凋亡小体,并且数目随药物处理浓度的升高而增多。
- 黄越陈文铎周炜董淼高永许韶威徐涛唐斌
- 关键词：结肠癌MTT
- 三叶半夏凝集素C端结构域的可溶表达及其活性研究被引量：2
- 2014年
- 利用pET-32-SUMO表达载体在大肠杆菌中可溶表达三叶半夏凝集素C端结构域(P-D2),并研究其凝血活性、糖结合特异性以及肿瘤抑制活性。实验结果表明,P-D2蛋白的产量为5mg/L。该蛋白具有凝集小鼠红细胞的活性,可以被D-甘露聚糖抑制,但不能被D-乳糖、D-葡萄糖、D-麦芽糖抑制。P-D2蛋白的体外抗肿瘤活性实验表明其对肝癌细胞Bel-7404以及结肠癌细胞SW-620都有良好的抑制作用。凋亡现象观察实验发现P-D2蛋白可以诱导癌细胞Bel-7404的凋亡。这是首次在大肠杆菌表达系统中表达了可溶的半夏凝集素C端结构域,为其他凝集素的可溶表达提供了新的选择。
- 许韶威刘冰颖周炜高永杨支力吕正兵徐涛
- 关键词：凝血活性SUMO抗肿瘤活性
- 半夏凝集素结构预测分析被引量：6
- 2015年
- 为进一步深入了解半夏凝集素(Pinellia ternata agglutinin)已知蛋白序列的性质,采用生物信息学预测方法,对其结构进行了系统性分析。从NCBI数据库中调取半夏凝集素蛋白序列信息,利用Expasy、SMART、CBS、SWISS-MODEL、DNAman6.0等生物软件对凝集素蛋白的一级结构、高级结构性质进行全面分析。半夏凝集素的基本结构信息表明其属于稳定的亲水性蛋白,人工神经网络法预测其二级结构含有16个α螺旋,91个β折叠和150个随机卷曲,同源建模分析显示半夏凝集素蛋白序列与模板岩芋凝集素蛋白A链和B链的同源相似度分别达76.15%和84.55%。高级结构信息显示半夏凝集素N端存在跨膜区域和信号肽区域,并且整个蛋白序列中存在多个N-糖基化位点和蛋白激酶磷酸化位点,功能域预测表明半夏凝集素含有两个B型凝集素功能域,每个功能域均含有保守的甘露糖结合位点,并且这些结合位点多位于半夏凝集素蛋白空间构象的外部。通过对半夏凝集素结构性质的预测为进一步实验验证其生物功能和药用机理提供了有益参考。
- 高永杨支力李东海徐涛
- 关键词：同源建模
