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王生存: 作品数：16 被引量：30H指数：3; 供职机构：南通大学更多>>; 发文基金：江苏省自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目国家自然科学基金更多>>; 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>

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TGF-α在B6-Co小鼠胚胎发育后期眼睑中表达变化被引量：4: 2012年; 目的检测转化生长因子α(TGF-α)在遗传性角膜混浊(B6-Co)小鼠胚胎发育后期眼睑中的表达变化。方法雄性B6-Co和B6小鼠分别与雌性B6小鼠以1∶2比例配对,各10笼。体视显微镜下取不同胚胎期小鼠眼睑组织,采用实时定量PCR法和免疫组化法分别检测眼睑组织中TGF-αmRNA和蛋白表达。结果随着发育时间的推移,B6-Co小鼠上、下眼睑不能融合,角膜完全暴露;TGF-αmRNA表达低于B6小鼠(P<0.05),而TGF-α蛋白表达与B6小鼠比较差异无统计学意义。结论 TGF-α表达可能是导致B6-Co小鼠胚胎期眼睑发育缺陷的主要原因之一。; 缪进王生存刘春邵义祥; 关键词：转化生长因子Α

SNP标记技术在生命科学中的应用被引量：1: 2011年; 单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)标记技术已被广泛应用于生命科学的各个研究领域中。概述了SNP标记技术的应用情况。随着分子生物学技术的不断发展,SNP标记技术必将不断改进完善。人们也将会不断地发现更多的SNP标记技术应用于生命科学领域的研究中。; 王生存缪进; 关键词：SNP 生命科学领域

应用16S rDNA克隆文库法分析B6-Co小鼠角膜炎细菌组成被引量：1: 2014年; 目的鉴定B6-Co突变系小鼠角膜的病原菌组成,并与人类细菌性角膜炎病原菌组成进行比较分析。方法选取10 d龄B6小鼠和B6-Co小鼠各6只为实验动物,提取小鼠角膜组织刮取物细菌基因组DNA,通过PCR扩增构建16S rDNA克隆文库,采用随机测序法分析B6-Co小鼠角膜细菌组成,B6小鼠作为对照。结果 B6-Co角膜混浊小鼠中共鉴定出20种细菌,隶属于15个属,包括葡萄球菌属、假单胞菌属、链球菌属、微球菌属、棒状杆菌属等。葡萄球菌属和假单胞菌属为优势群,葡萄球菌属丰度为19.7%~53.1%,假单胞菌属的丰度为17.4%~32.8%。其中葡萄球菌属主要是表皮葡萄球菌,丰度为13.8%~20.9%;缓慢葡萄球菌,丰度为14.0%~30.9%;金黄色葡萄球菌,丰度为7.4%~20.3%。此外,棒状杆菌和微球菌也比较常见。10 d龄B6小鼠未检测出细菌。结论 B6-Co突变系小鼠角膜细菌组成与人类角膜炎病原菌相似,是研究人类角膜炎诊断方法、发病机理及临床用药的很好的动物模型。; 宋鸿雁仇保丰刘春朱顺星缪进王生存吴刘成王旭邵义祥; 关键词：细菌性角膜炎

B6-Co小鼠眼睑体外培养的形态学研究被引量：1: 2011年; 目的:通过体外组织培养,研究小鼠眼睑体外生长发育情况。方法:剖宫产取18.5dpc胎鼠,分别切取正常彼此融合的上下眼睑及开裂的眼睑,在琼脂小岛上做组织培养,动态观察眼睑外形变化,并作HE染色观察。结果:18.5dpc胎鼠正常眼睑经过14d的培养未发生分离,睑裂沟处的组织松散,细胞凋亡呈无序性;开裂眼睑上皮细胞增殖受阻,周皮与间质部位发生分离。结论:琼脂小岛法体外培养小鼠眼睑,其组织结构及细胞增殖与迁移都不能完全重现体内情况,可能还需要添加多种生长因子。; 缪进王生存刘春邵义祥; 关键词：眼睑多种生长因子小鼠

角膜混浊小鼠突变候选基因Map3k1克隆与序列分析被引量：4: 2011年; 对具有角膜混浊表型的B6-Co突变系小鼠突变候选基因Map3k1进行克隆及测序分析,寻找该突变系小鼠Map3k1基因的突变位点。以小鼠Map3k1基因的mRNA、全长及上游5 kb序列设计引物,分别以基因组DNA和mRNA为模板,采用PCR和RT-PCR技术分段扩增目的基因,将目的片段连接在T载体上,转化至感受态细胞,筛选阳性克隆,质粒DNA分子提取,电泳检测,EcoRⅠ酶切释放目的片段,送上海生工生物工程技术服务有限公司测序。成功扩增出Map3k1基因的20个外显子和上游调控序列,B6-Co小鼠测序结果与基因组数据库序列比对,该基因位于13号染色体第112 559 574的碱基由T突变为A,编码的蛋白质第314氨基酸由亮氨酸变为谷氨酸,但是该基因的表达调控及蛋白质剪切机制仍有待深入研究。; 吴刘成刘春蒋荧梅王生存邵义祥; 关键词：PCR扩增

蛋白磷酸酶2A的Cβ亚基在胚胎成纤维细胞凋亡过程中的作用被引量：1: 2016年; 为探究蛋白磷酸酶2A的Cβ亚基在胚胎成纤维细胞(MEFs)凋亡过程中的作用,用Cβ+/-的杂合子雄鼠与雌鼠1∶2配对,取胚胎期12.5d(E12.5)的胚胎制备MEFs,用PCR、RT-PCR和Western blot方法进行基因型鉴定。同时对P3代MEFs利用流式分选技术检测其细胞凋亡和细胞周期的变化,并采用Western blot检测抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。结果采用胰酶消化方法成功获得了MEFs,DNA、RNA和蛋白水平鉴定显示获得了3对3的野生型和Cβ基因敲除MEFs。流式分选发现Cβ基因敲除MEFs和野生型之间细胞分裂期前期(M1期)细胞分别为53.95%±2.81和46.94%±4.17,细胞分裂期后期(M2期)细胞分别为21.14%±2.53和29.83%±3.25。但Bcl-2的蛋白表达量和mRNA表达量没有显著差异。结果表明,虽然蛋白磷酸酶2A的Cβ亚基的缺失并不会导致小鼠胚胎死亡,但Cβ亚基的缺失会轻微影响胚胎成纤维细胞(MEFs)的细胞周期。; 王庆华王生存李斌刘春吴刘成王旭彭晓清邵义祥; 关键词：胚胎成纤维细胞细胞凋亡细胞周期

一种肝癌动物模型的制备方法: 本发明提供一种肝癌动物模型的制备方法，包括以下具体步骤：（1）选取4周龄的ICR小鼠，观察饲养2周；将HepG2细胞在加有10％胎牛血清的DMEM培养基中培养传代扩增后用注射器注射入ICR小鼠腹腔；（2）待小鼠出现明显腹...; 王庆华戚龙菊董传明吴勤峰邵义祥朱顺星刘春王旭吴刘成王生存; 文献传递

核壳结构量子点的制备方法、靶向肿瘤标志物GPC-3的荧光纳米探针及其制备方法: 本发明提供一种核壳结构量子点的制备方法、靶向肿瘤标志物GPC-3的荧光纳米探针及其制备方法，其中荧光纳米探针的制备方法为：制备以ZnS为壳层的核壳结构量子点；以ZnS为壳层的核壳结构量子点表面的羧基被碳化二亚胺（EDC）...; 李景源姚登福邵义祥朱顺星王生存; 文献传递

实验动物学课程实验课教学法初探被引量：9: 2008年; 实验动物学课程的实践性和操作性非常强,实验教学在整个课程中的地位至关重要。从不同的学生心理、专业特点、教学安排等方面可初步探讨该课程实验课的教学规律,从而采取相应的措施来优化现有的教学方法。; 王生存邵义祥; 关键词：实验动物学实验教学教学法