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王军
作品数:
1
被引量:9
H指数:1
供职机构:
北京大学生命科学学院
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发文基金:
国家高技术研究发展计划
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相关领域:
生物学
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合作作者
张庭芳
北京大学生命科学学院
张龙翔
北京大学生命科学学院
唐建国
北京大学生命科学学院
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唐建国
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王军
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生物化学杂志
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1篇
1996
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胰蛋白酶分子中二硫键Cys129-Cys232的定位改造研究
被引量:9
1996年
对胰蛋白酶所特有的二硫键[129,232]进行了定位改造,将Cys突变为Ser,以观察其对胰蛋白酶稳定性及活性的影响。采用蛋白质工程的方法,构建了三个突变体C129S、C232S和C129S/C232S.在E.coliX-90菌体中进行表达,表达产物用含胰蛋白酶特异性底物TAME的活性胶检测活性,发现C232S丧失胰蛋白酶活性,而C129S和C129S/C232S保留了胰蛋白酶活性。在盐酸胍作用下比较双突变体和野生型胰蛋白酶活性,发现突变体C129S/C232S的稳定性有所降低。结果表明二硫键Cys129-Cys232对于胰蛋白酶的活性是非必需的,可能在稳定蛋白质的结构上发挥着重要作用。
王军
唐建国
张庭芳
张龙翔
关键词:
胰蛋白酶
二硫键
定位突变
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