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hVEGF121与βhCG融合蛋白的表达载体构建与初步表达: 为了构建一种新型抗肿瘤融合蛋白疫苗,包含hVEGF121和βhCG抗原表位,并探索融合蛋白的纯化条件和方法.采用PCR方法,克隆VEGF和βhCG基因,并通过限制性内切酶NcoⅠ、EcoR Ⅰ和HindⅢ将两个基因逐个插...; 曹荣月宦晓军孙翁李盼郑梅赵鹤肖芳杨梦琪龙军; 关键词：ΒHCG 克隆融合蛋白

hVEGF_(121)与βhCG融合蛋白的克隆、分离纯化与初步鉴定被引量：2: 2014年; 构建一种新型抗肿瘤融合蛋白疫苗,包含hVEGF121和βhCG抗原表位,并探索融合蛋白的纯化条件和方法。采用PCR方法,克隆VEGF和βhCG基因,并通过限制性内切酶NcoⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ将两个基因逐个插入pET-28a(+)质粒中,利用质粒自带的卡那霉素抗性筛选出阳性克隆,获得重组基因的表达载体。对重组菌进行乳糖诱导表达后,通过超声破碎,硫酸铵分级沉淀,阴离子交换层析等方法进行融合蛋白的分离纯化,Western-blot鉴定。测序结果表明成功构建重组载体pET-28a-VEGF-M2-X10-βhCG-CTP37,重组基因长993 bp,编码331个氨基酸残基。SDS-PAGE显示,经乳糖诱导,Escherichia coli BL21(DE3)重组菌表达hVEGF121-M2-X10-βhCG-CTP37多肽,约占菌体总蛋白量的35%。融合蛋白经分离纯化后纯度可达到电泳纯,约占蛋白冻干粉的80%。结论:克隆、测定了融合蛋白基因,并在Escherichia coli BL21(DE3)中诱导表达hVEGF121-M2-X10-βhCG多肽,同时成功分离纯化此多肽。; 曹荣月宦晓军孙翁李盼郑梅赵鹤杨梦琪龙军张晓红; 关键词：ΒHCG 克隆分离纯化融合蛋白

真核表达载体pcDNA3.1(+)-GFP-M2的构建及在小鼠骨髓树突状细胞中的表达被引量：1: 2014年; 为了构建含有绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)报告基因的M2真核表达载体pcDNA3.1(+)-GFP-M2(2段热休克蛋白70表位序列407-426,mHSP70407-426,M2),探讨M2基因转染小鼠骨髓树突状细胞(Dendritic cell,DC)的表达情况。采用4轮PCR方法从pcDNA3.1(+)-GFP载体中将GFP编码序列扩增出来,并在其上游引入Kozak序列,下游引入M2序列,使用限制性内切酶HindIII和BamHI将目的片段插入到pcDNA3.1(+)中,利用质粒自带的氨苄青霉素抗性筛选出阳性克隆,获得重组基因的表达载体。重组载体通过转染试剂Lipofectamine2 000转染至DC中,通过倒置荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在细胞内的表达。构建的pcDNA3.1(+)-GFP-M2经双酶切、PCR和测序鉴定和预期结果一致。荧光显微镜观察显示在转染pcDNA3.1(+)-GFP-M2基因的树突状细胞中,荧光均匀地分布于整个细胞。成功构建含有绿色荧光蛋白报告基因的M2真核表达载体pcDNA3.1(+)-GFP-M2。M2基因成功转染至树突状细胞中。; 曹荣月孙翁陈檬杨梦琪宦晓军肖芳李盼龙军; 关键词：真核表达载体树突状细胞 KOZAK序列

一种新型抗肿瘤融合蛋白疫苗及其制备方法和应用: 本发明属于基因工程制备活性肽领域，公开一种抗肿瘤融合蛋白疫苗VEGF121-M2-X10-βhCG-CTP37肽及其制备方法和应用。利用本实验室的融合表达制备技术平台，构建在大肠杆菌细胞内融合表达VEGF121-M2-X...; 曹荣月宦晓军张鹏常娜杨梦琪; 文献传递

创新实验中ICR小鼠部分参数探索: 小鼠是药理试验中最常使用的实验动物，了解小鼠的体重变化、脏器系数、血糖值的高低对实验有很重要的参考意义。本实验通过对24只雄性ICR小鼠体重变化数据的分析，得到了小鼠的体重增长率；测定120只雄性ICR小鼠在非禁食状态下...; 肖芳李盼郑梅赵鹤杨梦琪宦晓军曹荣月; 关键词：ICR小鼠血糖值体重脏器系数

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杨梦琪