彭延杰
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：山东农业大学植物保护学院环境生物学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 农杆菌介导的获取疏绵状嗜热丝孢菌插入突变体体系的建立(英文)
- 2012年
- 【目的】建立疏绵状嗜热丝孢菌的稳定遗传转化体系并获得插入突变体。【方法】利用农杆菌介导的方法建立疏绵状嗜热丝孢菌的遗传转化体系;分别通过Southern杂交、克隆转移DNA(T-DNA)侧翼序列来确定T-DNA在疏绵状嗜热丝孢菌基因组中的拷贝数和插入位点。【结果】成功建立了可靠的疏绵状嗜热丝孢菌的遗传转化体系。共培养过程中使用萌发孢子是成功建立疏绵状嗜热丝孢菌遗传转化体系的必要条件。疏绵状嗜热丝孢菌萌发的孢子与农杆菌在28℃共培养48h时,转化效率最高。乙酰丁香酮(AS)在农杆菌预培养及疏绵状嗜热丝孢菌萌发的孢子与农杆菌的共培养阶段都是必需的,且在共培养阶段当AS浓度为500μM时转化效率最高。Southern杂交验证表明,79.2%的转化子为T-DNA单拷贝插入,且通过热不对称PCR(TAIL-PCR)分析得出T-DNA在该菌基因组中的插入位点是随机的。通过该转化系统筛选到部分表型突变体。【结论】我们首次报道了利用ATMT技术成功转化嗜热真菌-疏绵状嗜热丝孢菌,证明了该方法是一种简单有效的获得插入突变体的方法,并为该嗜热真菌进行基因定位提供了工具。
- 韩华徐晓雪彭延杰孔德慧李多川
- 关键词：农杆菌介导转化疏绵状嗜热丝孢菌嗜热真菌
- 嗜热真菌蛋白激酶基因的克隆、表达与打靶载体构建
- 信号转导是外界同生物体或生物体细胞间的信息传递的重要手段,许多研究证,生物信号在细胞内传递的主要方式就是蛋白激酶和蛋白磷酸酶催化的蛋白质可逆酸化,通过磷酸化和去磷酸化作用使蛋白质发生构型和构象的变化,从而调节其活,通过激...
- 彭延杰
- 关键词：蛋白激酶CDNA克隆异源表达荧光定量PCR打靶载体
- 文献传递
