- 乳源免疫调节肽（PGPIPN）对小鼠免疫和抗肿瘤的影响
- 目的探讨乳源免疫调节肽/(PGPIPN/)对小鼠免疫与抗肿瘤方面的影响。
方法通过四甲基偶氮唑盐比色法/(MTT法/)检测在不同浓度的PGPIPN作用下体内、外Balb//c鼠的脾T淋巴细胞的转化情况;利用人卵...
- 王巍
- 关键词：免疫调节肽SKOV3BCL-2BAX脾T淋巴细胞
- 文献传递
- 牛乳铁蛋白肽基因的慢病毒载体构建
- 牛乳铁蛋白肽(Bovine lactofericin,简称LfcinB)是一种阳离子生物活性肽,是从牛乳铁蛋白的降解产物中分离得到,其含有25个氨基酸残基(Phe-Lys-Cys-Arg-Arg-Trp-Gln-Trp-...
- 张晓宇秦宜德王超张文晓王巍何晓光
- 免疫调节肽对T淋巴细胞转化和巨噬细胞分泌的影响被引量：8
- 2011年
- 目的研究乳源免疫调节肽(PGPIPN)对BALB/c鼠脾T淋巴细胞转化和骨髓巨噬细胞(BMMs)分泌的影响。方法通过MTT法检测不同浓度PGPIPN对小鼠脾T淋巴细胞的转化作用,通过ELISA法检测在PGPIPN刺激下小鼠BMMs活化所释放的肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)的含量。结果 PGPIPN在体外与刀豆蛋白A(Co-nA)合用可明显促进ConA的丝裂原作用;体内实验表明各种剂量PGPIPN饲养的小鼠,其脾淋巴细胞在适当剂量的ConA的诱导下均具有明显的T淋巴细胞转化的能力;PG-PIPN单独作用于BMMs不能刺激TNF-α和IL-6的释放,但与脂多糖(LPS)合用时则可以明显增加细胞因子的释放。结论 PGPIPN具有促进T淋巴细胞转化的作用,与LPS合用可促进BMMs的细胞因子释放的水平,提示PGPIPN可增加T淋巴细胞和巨噬细胞的免疫功能。
- 王巍何晓光郑欣顾芳秦宜德
- 关键词：脾T淋巴细胞骨髓巨噬细胞细胞因子
- 人MUC16基因启动子区域的初步分析
- 2009年
- 目的分析人MUC16基因的转录起始位点和重要的调控区域,确定人MUC16基因的核心启动子可能存在区域。方法用生物信息学分析人MUC16基因启动子所在区域。培养SKOV3细胞株并提取细胞基因组DNA,用PCR技术扩增启动子区域的594(-1 844/-1 250/)、548(-1 798/-1 250)、326(-1 576/-1 250)和170 bp(-1 420/-1 250)的启动子片段,分别构建重组PGEM-T质粒,再克隆入荧光素酶报告基因载体PGL3载体,构建PGL3-170、PGL3-326、PGL3-548和PGL3-594重组表达质粒。用脂质体介导的方法瞬时转染SKOV3细胞,测定荧光素酶的表达活性。结果成功构建4种人MUC16基因启动子片段的荧光素酶报告基因表达体系,分别为PGL3-170(-1 420/-1 250)、PGL3-326(-1 576/-1 250)、PGL3-548(-1 798/-1 250)和PGL3-594(-1 844/-1 250),各缺失片段在SK-OV3细胞中均有活性。MUC16的核心启动子5′端可能为PGL3-326的3′端,3′端固定在-1 250处,5′端由-1 844向-1420移动时启动子活性逐渐增强,且变化幅度较大,提示这一区间内可能存在重要的顺式作用元件。结论成功构建了人MUC16基因启动子片段的荧光素酶报告基因载体,确定人MUC16基因的核心启动子区域。
- 王超秦宜德王巍顾芳
- 乳源免疫调节肽诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡的研究被引量：2
- 2013年
- 目的研究乳源免疫调节肽(PGPIPN)对人食管癌Eca-109细胞生长和凋亡的影响。方法采用MTT法测定PGPIPN对人食管癌Eca-109细胞的作用,用流式细胞仪(FCM)、琼脂糖凝胶电泳检测PGPIPN诱导Eca-109细胞凋亡,用免疫组化SP法检测PGPIPN诱导Eca-109细胞凋亡过程中survivin、caspase-3蛋白的表达变化情况。结果 PG-PIPN对人食管癌Eca-109细胞有明显的生长抑制作用并有剂量依赖性,其增殖抑制作用与诱导细胞凋亡有关,Eca-109细胞经PGPIPN作用后,其survivin蛋白表达下降,caspase-3蛋白表达增强。结论 PGPIPN能诱导人食道癌Eca-109细胞凋亡,这可能与survivin蛋白表达下降,caspase-3蛋白表达增强有关。
- 顾芳秦宜德桂丽王巍唐宜桂
- 关键词：ECA-109细胞细胞凋亡
- 福平增加大鼠胆汁碳酸氢盐成分的利胆作用及其分子机制探讨
- 利福平作为一种一线抗结核药物已在临床上广泛的应用。我们先前的研究显示,利福平可以诱导胆汁淤积适应性模型,但有报道表明利福平在多次处理大鼠及分离灌注大鼠肝脏的系统中介导胆流增加,这些结果提示利福平可能在胆流消弱的生理和病理...
- 王巍
- 关键词：利福平碳酸氢盐
- 文献传递
- 牛乳铁蛋白肽基因LfcinB的慢病毒载体的构建及鉴定被引量：4
- 2011年
- 目的构建并鉴定牛乳铁蛋白肽基因LfcinB基因的慢病毒载体,为LfcinB应用于基因治疗奠定了基础,以便进一步研究LfcinB的功能。方法根据GenBank报道的Lf-cinB基因序列,合成LfcinB基因,PCR方法扩增LfcinB基因,与经EcoR 1和Nhe 1酶切后的pljm1载体[含CMV启动子和绿色荧光蛋白(GFP)]连接、转化,产生pljm1-LfcinB慢病毒表达载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。用pljm1-Lf-cinB载体、△8.91载体、pvsvg载体三质粒共转染包装细胞293T细胞,包装产生重组慢病毒,以293T细胞中绿色荧光蛋白GFP的表达水平测定病毒滴度。Western blot检测Lf-cinB的表达。结果 PCR和测序证实成功构建了pljm1-Lf-cinB慢病毒载体。浓缩病毒悬液滴度为2×108 TU/ML。Western blot检测到目的肽成功表达。结论成功构建含LfcinB的慢病毒载体,为进一步感染细胞和基因治疗奠定了基础。
- 张晓宇秦宜德张文晓郑欣何晓光王巍
- 关键词：乳铁蛋白细胞凋亡
