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弓形虫SAG1单抗的研制及其初步应用被引量：3: 2013年; 为开展弓形虫免疫诊断及抗弓形虫感染的相关研究,利用可溶性表达的弓形虫表面抗原SAG1截短型重组蛋白(trSAG1)研制单克隆抗体,筛选出能够稳定分泌高滴度抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的单抗不仅适用于在虫体定位该蛋白,而且具有一定的小鼠体内保护作用。共筛选出4株(6H1、6G12、7B4和7A12)特异性好的单抗分泌株,经亚型测定,4株单抗重链均为IgG1,轻链均为κ链。抗体经纯化后测定效价为1∶8 000～1∶25 600;Western blot结果显示4株单抗能够同时识别重组表达及天然弓形虫SAG1抗原。筛选得到的2株抗SAG1单抗(6H1和7B4)可用于间接免疫荧光检测SAG1蛋白在虫体中的表达定位和分布。小鼠被动免疫保护试验表明,6H1和7B4两株单抗分别或联合使用可稍微延长被弓形虫感染的小鼠的存活时间。本试验研制的弓形虫SAG1单克隆抗体对将来研究弓形虫蛋白定位、弓形虫感染的诊断及防治具有一定的应用价值。; 蒋蔚刘迎春陈永军安立刚张花景王权; 关键词：弓形虫 SAG1 单克隆抗体免疫荧光检测免疫保护

微胶囊技术在医学生物学中的应用被引量：4: 2010年; 微胶囊是由天然或合成高分子制成的微型容器,直径一般为1～1 000μm。含固体的微胶囊形状与囊内固体相同,含液体或气体的微胶囊为球形。微胶囊有保护物质免受环境条件的影响,掩蔽不良味道、颜色和气味,控制芯材释放,降低毒性,改变物质的性质或性能,; 安立刚卢胜明康峰胡建武; 关键词：微胶囊微胶囊技术医药

弓形虫SAG1单抗的研制及其初步应用: 为开展弓形虫免疫诊断及抗弓形虫感染的相关研究,本实验利用可溶性表达的弓形虫表面抗原SAG1截断型重组蛋白(trSAG1)研制单克隆抗体,筛选出能够稳定分泌高滴度抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的单抗不仅适用于在虫体定位该蛋白,...; 蒋蔚刘迎春陈永军安立刚张花景王权; 关键词：单克隆抗体免疫荧光检测免疫保护

进口奶牛犬新孢子虫病血清学抗体及流产胎儿病原分子生物学检测被引量：5: 2009年; 采用间接免疫荧光抗体试验对随机抽取的3批进口奶牛1 238份奶牛血样进行牛新孢子虫病的流行病调查。随后用乳胶凝集对牛新孢子虫抗体阳性样品进行弓形虫抗体检测。并用已建立的牛新孢子虫病巢式PCR(Nested-PCR)对第一批进口奶牛的数十头流产胎儿进行牛新孢子虫病的病原分子生物学检测。结果表明,3批进口奶牛的新孢子虫整体感染率为6.54%,所有奶牛犬新孢子虫抗体阳性血清的弓形虫抗体全部为阴性。新孢子虫血清抗体阳性母牛流产的胎儿经Nested-PCR检测,60%胎儿为阳性,而抗体阴性母牛流产的胎儿经Nested-PCR检测均为阴性。; 邢小勇王权胡永浩陈永军蒋蔚安立刚; 关键词：奶牛犬新孢子虫病

衰老动物模型的研究进展及应用被引量：7: 2011年; 衰老是生物随着时间的推移、自发的必然过程,表现为机能衰退,适应性和抵抗力减退。从古至今,人们一直在寻找各种延年益寿的方法和药物,以期能在遗传学上所界定的寿限内延迟衰老或提高生命质量。1939年第一个衰老研究协会（the Club for Research in Aging）成立,从此科研工作者开始对衰老进行真正系统的研究。; 李树梅卢胜明康峰安立刚张海峰; 关键词：衰老动物模型实验动物

弓形虫表面抗原SAG1截短型片段在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化被引量：7: 2009年; 在大肠杆菌中高效表达及纯化获得可溶性、有反应活性的弓形虫表面抗原SAG1截短型片段(tSAG1),为研制新型的弓形虫病检测试剂奠定基础。构建重组质粒pET-32a-tSAG1并将其转化大肠埃希菌BL21(DE3)表达菌株,在异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导下表达蛋白。SDS-PAGE分析表达产物的表达形式,通过降低培养温度、降低摇床转数和升高LB液体培养基pH,诱导目的蛋白在上清中表达,利用His.Bind Kit试剂盒对目的蛋白进行纯化,Western blot和ELISA检测纯化蛋白的反应原性。在IPTG为1mmol/L、温度37℃条件下,tSAG1以融合蛋白(His-tSAG1)的形式在大肠埃希菌中高效表达,表达产物以包涵体形式存在。在22℃和LB培养基pH为7.7条件下,融合蛋白主要在上清中表达。Western blot和ELISA分析纯化蛋白能被弓形虫的阳性血清所识别。tSAG1在大肠埃希菌中得到了可溶性蛋白表达,经纯化后能被弓形虫的阳性血清所识别,可用于制备检测弓形虫病的诊断试剂。; 安立刚蒋蔚王权陈永军龚国华周锦萍邢小勇孙泉云丁铲; 关键词：弓形虫蛋白纯化免疫印迹

奶牛隐孢子虫Nested PCR-RFLP方法的建立及初步应用被引量：2: 2009年; 为快速检测并准确鉴别奶牛隐孢子虫种,以隐孢子虫18S rRNA基因的特殊区域为基础,设计内、外引物,并根据软件分析确定相应的内切酶EcoT14I,采用Nested PCR-RFLP方法进行虫种种型鉴别分析。在Nested PCR两次PCR反应中,以微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum,C.p)和安氏隐孢子虫(Cryptosporidium andersoni,C.an)卵囊提取的DNA为模板,均能扩增出长约800bp和500bp的明亮条带,且特异性强,其他虫种不能扩增出条带,该方法最低可检测到5个卵囊/g粪便;对于由内引物扩增出的500bp的条带,C.an的PCR产物能被内切酶EcoT14I酶切,酶切后的片段分别为416bp和92bp,C.p的PCR产物不能被此酶酶切。用所建立的Nested PCR-RFLP法对上海奶牛389头和进口奶牛200头的共计589份粪样进行检测,Nested PCR的结果表明上海奶牛和进口奶牛的隐孢子虫阳性率分别为19.02%和3.5%,RFLP的结果表明上海奶牛感染的主要是C.p和C.an,进口奶牛感染的主要是C.p。研究结果表明,本研究建立的检测奶牛粪便中的隐孢子虫的Nested PCR-RFLP法,可用于奶牛隐孢子虫流行病学调查并有效鉴别奶牛隐孢子虫种。; 王权陈永军袁耀明李安平蒋蔚朱志宏安立刚; 关键词：奶牛隐孢子虫

功能性寡糖及其作用机理被引量：9: 2011年; 本文介绍了功能性寡糖的概念、种类,并阐述了果寡糖、甘露寡糖、异麦芽寡糖和木寡糖等对动物的作用及其机理,还对其应用提出了展望。; 康峰卢胜明张海峰安立刚胡建武; 关键词：功能性寡糖动物

弓形虫重组SAG1可溶性表达、鉴定及单克隆抗体的制备: 弓形虫（Toxoplasma gondii）是一种机会性致病原虫,分布广泛,是严重危害的人畜共患病之一。因此,弓形虫病的诊断,尤其是弓形虫现症感染的及时诊断成为弓形虫病防治工作的重点。SAG1蛋白是弓形虫速殖子期特异性抗...; 安立刚; 关键词：弓形虫 SAG1 蛋白表达蛋白纯化单克隆抗体; 文献传递

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安立刚