闫晓菲
- 作品数:11 被引量:15H指数:4
- 供职机构:新疆农业大学更多>>
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- 堆形艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库的构建及鉴定
- 构建堆形艾美耳球虫(Eimeria acervulina)孢子化卵囊cDNA表达文库,以筛选其功能性基因.用TRI-ZOL Reagent试剂提取堆形艾美耳球虫总RNA,再用Oligo(dT)12-纤维素柱从总RNA中分...
- 闫晓菲韩红玉岳城黄兵赵其平姜连连董辉卞庆松张建哲
- 关键词:鸡球虫堆形艾美耳球虫孢子化卵囊CDNA文库
- 文献传递
- 堆型艾美耳球虫生物学特性研究进展被引量:6
- 2007年
- 鸡球虫病是一种严重危害养禽业的寄生虫病,其中堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)对鸡致病力较强,在各地养鸡场流行率较高,严重感染时可引起死亡,对鸡的生长发育和饲料转化率有较明显的影响。本文对E.acervulina的流行状况、形态特征、致病性、免疫原性等相关研究进行了综述,为兽医临床有效防治E.acervulina提供理论依据。
- 闫晓菲黄兵岳城
- 关键词:堆型艾美耳球虫生物学特性免疫原性
- 柔嫩艾美耳球虫蛋白质二硫键异构酶基因的克隆、表达及应用
- 本发明公开了一种柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)蛋白质二硫键异构酶基因EtPDI(克隆号:BW1-E06,Genbank登录号EF552214),本发明将该基因连接到原核表达载体pGEX-4T-2,构建了原核表达重组...
- 黄兵韩红玉林矫矫赵其平董辉姜连连王鑫韩静芳张建哲卞庆松闫晓菲
- 文献传递
- cDNA文库及其在原虫研究中的应用被引量:5
- 2008年
- cDNA文库构建和筛选是基因克隆的重要方法之一,它是目前发现新基因和研究基因功能的基本工具。从cDNA文库中可以筛选到目的基因,并直接用于该基因的表达。由于cDNA文库在基因分离和克隆中具有重要作用,因此其应用也日益广泛。简要介绍自cDNA文库创建以来,发展起来的各类文库及其构建cDNA文库的方法。作者重点阐述了弓形虫、利什曼原虫、阴道毛滴虫、疟原虫等原虫cDNA文库的构建及其应用。
- 闫晓菲韩红玉岳城黄兵
- 关键词:CDNA文库原虫基因克隆
- 一种促进绵羊生长的经济型饲料添加剂配方
- 本发明属于畜牧产业中新饲料添加剂配方的研发技术领域,特别是涉及一种添加半胱胺盐酸盐的促进绵羊生长经济型饲料添加剂配方,由半胱氨酸盐酸盐、维生素A、维生素E、硫酸铜、亚硒酸钠及淀粉组成;按绵羊体重每公斤添加量为半胱氨酸盐酸...
- 王金泉姚刚王勇苏战强韩冰彭华刚张继红张晓红郭庆勇杨力伟王琦闫晓菲
- 文献传递
- 堆形艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库的构建及鉴定被引量:4
- 2007年
- 构建堆形艾美耳球虫(Eimeria acervulina)孢子化卵囊cDNA表达文库,以筛选其功能性基因.用TRI-ZOL Reagent试剂提取堆形艾美耳球虫总RNA,再用Oligo(dT)12-纤维素柱从总RNA中分离mRNA,以mRNA为模板,RT-PCR法反转录合成cDNA第一链,用LD-PCR法扩增合成双链cDNA,经蛋白酶K消化、SfiⅠ酶切、CHROMA SPIN-400柱分离去除小于400 bp的片段后,将cDNA与已经SfiⅠ酶切的λTriplEx2载体按一定比例连接,经体外包装,建立堆形艾美耳球虫孢子化卵囊的噬菌体表达文库.随后测定文库容量为4.6×10^6pfu/mL,扩增文库的滴度为4.4×10^10pfu/mL,重组率达到98%,插入片段大小为750-1 000 bp,并从扩增文库中扩增出了堆形艾美耳球虫巨噬细胞游走抑制因子基因片段.
- 闫晓菲韩红玉岳城黄兵赵其平姜连连董辉卞庆松张建哲
- 关键词:球虫堆形艾美耳球虫孢子化卵囊CDNA文库
- 毒害艾美球虫孢子化卵囊cDNA文库的构建被引量:4
- 2008年
- 为构建毒害艾美球虫孢子化卵囊cDNA表达文库,用Trizol试剂提取毒害艾美球虫孢子化卵囊总RNA,采用SMART技术,在逆转录酶的作用下将总RNA反转录成第一链cDNA,经LD-PCR扩增合成双链cDNA(ds cDNA)。经蛋白酶K消化、SfiⅠ酶切,过CHROMA SPIN-400^TM柱去除小于400bp的片段,与λTriplEx2^TM噬菌体载体连接,用GigapackⅢGold^TM载体蛋白包装,构建了cDNA噬菌体表达文库。经测定,原始文库容量为4.72×10^6pfu/mL,扩增后的文库容量为2.62×10^10pfu/mL,重组率为97.5%,插入片段为500~1100bp。证实,该文库质量良好,为毒害艾美球虫新基因的筛选、克隆及功能研究奠定了基础。
- 卞庆松韩红玉赵其平姜连连董辉闫晓菲张建哲黄兵
- 关键词:球虫孢子化卵囊CDNA文库SMART技术
- 柔嫩艾美耳球虫蛋白质二硫键异构酶基因的克隆、表达及应用
- 本发明公开了一种柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)蛋白质二硫键异构酶基因EtPDI(克隆号:BW1-E06,Genbank登录号EF552214),本发明将该基因连接到原核表达载体pGEX-4T-2,构建了原核表达重组...
- 黄兵韩红玉林矫矫赵其平董辉姜连连王鑫韩静芳张建哲卞庆松闫晓菲
- 文献传递
- 巨型艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库的构建被引量:1
- 2008年
- 为构建巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)孢子化卵囊cDNA表达文库,从E.maxima孢子化卵囊中提取总RNA,以总RNA为模板、λTriplex2TM为载体,利用SMARTTM cDNA文库构建试剂盒构建全长cDNA表达文库。经测定构建的E.maxima cDNA表达文库的原始文库容量为1×106 pfu/ml,扩增后的文库滴度为5×1010 pfu/ml,重组率为95%,插入片断主要集中在0.5~1kb之间。根据已知序列设计引物,能从文库中扩增出编码E.maxima免疫球蛋白重链结合蛋白的基因序列片段。结果表明所构建的E.maxima cDNA表达文库质量良好,为克隆、筛选E.maxima的功能性基因奠定了基础。
- 张建哲韩红玉姜连连董辉赵其平卞庆松闫晓菲黄兵
- 关键词:球虫巨型艾美耳球虫CDNA文库SMART技术
- 一种促进绵羊生长的经济型饲料添加剂配方
- 本发明属于畜牧产业中新饲料添加剂配方的研发技术领域,特别是涉及一种添加半胱胺盐酸盐的促进绵羊生长经济型饲料添加剂配方,由半胱氨酸盐酸盐、维生素A、维生素E、硫酸铜、亚硒酸钠及淀粉组成;按绵羊体重每公斤添加量为半胱氨酸盐酸...
- 王金泉姚刚王勇苏战强韩冰彭华刚张继红张晓红郭庆勇杨力伟王琦闫晓菲