王苗 作品数:13 被引量:69 H指数:5 供职机构: 北京市顺义区疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
一起食源性疾病暴发事件分离的2种血清型沙门菌的病原学分析 2023年 目的对一起食源性疾病暴发事件中分离的2种血清型沙门菌进行病原学分析。方法采集2022年9月8日某学校暴发事件中病例肛拭子11件、可疑污染食品13件和环境样本10件;对病例肛拭子分别使用亚硒酸盐煌绿增菌液和脑心浸液肉汤(BHI)进行增菌培养,在完成常见肠道病原菌荧光PCR检测后,根据结果开展相应致病菌的分离培养;对可疑污染食品参照食品安全国家标准进行检测;每份肛拭子样本和食品样本均挑取多个疑似沙门菌菌落进行血清学凝集和全基因组测序;根据全基因组测序结果确定沙门菌血清型,基于菌株核心基因组单核苷酸多态性(SNP)进行聚类分析。结果病例肛拭子和可疑污染食品沙门菌检出率分别为9/11和5/13,其中4例病例肛拭子和4件可疑污染食品样本均分离到2种血清型沙门菌(乌干达沙门菌和伊迪坎沙门菌),其余阳性样本分离沙门菌均为单一乌干达沙门菌血清型或单一伊迪坎沙门菌血清型。11件病例肛拭子样本接种BHI增菌液后12 h和24 h沙门菌荧光PCR检出率均为9/11,与分离培养结果一致。2种血清型沙门菌在基于核心基因组SNP构建的聚类树中形成2个相互独立且遗传距离较远的分支,而每一种血清型沙门菌也表现出基因组多态性,乌干达沙门菌之间SNP差异个数介于0~14个,伊迪坎沙门菌之间SNP差异个数介于0~23个。结论本次事件为乌干达沙门菌和伊迪坎沙门菌共同导致食源性疾病暴发事件,基于BHI对病例肛拭子增菌并进行沙门菌荧光PCR检测的方案可在暴发中应用。 闫爱霞 康颖 崔尧 赵文轩 李首飞 王苗 王园园 王洛桐 王凤双 逄波 李颖关键词:食源性疾病 病原学 一起由C型产气荚膜梭菌引起的食源性疾病致病因子检测 被引量:14 2016年 目的检测食物中毒样本中的产气荚膜梭菌,为同类事件检测和判定提供依据。方法利用快速显微镜便检锁定检测方向;利用TSC培养基厌氧培养产气荚膜梭菌;利用产气荚膜梭菌α、β、ε、ι毒素和CPE、β2肠毒素PCR扩增检测产气荚膜梭菌所含肠毒素类型。结果在食品留样、环境涂抹拭子和患者粪便标本中共检出产气荚膜梭菌阳性样本8例。1份食品样本和5份患者粪便样本中分离株毒素携带情况完全一致,为含有α、β和肠毒素β2的C型产气荚膜梭菌;从环境试子中分离的菌株6种毒素均为阴性。结论此次事件是一起由C型产气荚膜梭菌毒素导致的细菌性食物中毒,食品与环境之间存在产气荚膜梭菌的交叉污染。作为重要食物中毒致病因的产气荚膜梭菌的监测与检测工作有待开展与标准化。 李颖 李长青 王彦波 王园园 杨杰 王苗关键词:产气荚膜梭菌 食物中毒 致病因子 2016年北京市顺义区食源性疾病主动监测实验室检测结果分析 被引量:13 2018年 目的了解顺义区食源性疾病的发病情况及病原学特征,为制定有效防控措施提供依据。方法对采集临床腹泻粪便标本进行病原体分离与鉴定。结果共采集检测标本365份标本,检出致病菌阳性101份,阳性率为27.67%(101/365);其中副溶血性弧菌检出率最高,为39株,检出率为10.68%(39/365);其次为致泻大肠埃希菌28株,检出率为7.67%(28/365);检出沙门菌15株,检出率为4.21%(15/365);空肠弯曲菌15株,检出率为4.21%(15/365)。结论顺义区食源性腹泻主要以副溶、致泻性大肠埃希菌和沙门菌感染为主,空肠弯曲菌检出率也有所增加,应加强监测工作,注意致病菌病原谱变化。 王彦波 李颖 李湛 王园园 杨杰 王苗关键词:食源性致病菌 腹泻 北京市顺义区零售生猪肉中小肠结肠炎耶尔森菌的检测与病原特征分析 被引量:2 2021年 目的获得北京市顺义区零售市场生猪肉中小肠结肠炎耶尔森菌的分布及病原特征。方法采集样本,应用细菌增菌培养并同时对增菌液进行荧光PCR预筛查的方法检测小肠结肠炎耶尔森菌。对于鉴定阳性菌株应用传统PCR及多重荧光PCR方法分析5种毒力基因的分布特征。应用肉汤稀释法获得分离菌株的耐药特征并应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行菌株分子分型。结果70份样本中19份增菌液foxA基因实时荧光PCR筛查阳性,阳性率为27.14%(19/70)。19份foxA筛查阳性标本培养获得小肠结肠炎耶尔森菌。19株菌对头孢唑啉、氨苄西林、头孢西丁、氨苄西林/舒巴坦耐药率分别为97.74%、84.21%、47.39%和42.11%,其携带毒力基因特征均为ail-/ystA-/ystB+/yadA-/virF-。17株菌完成PFGE检测并被分为15种带型。结论针对增菌液进行荧光PCR预筛查,可提高食品样本中小肠结肠炎耶尔森菌分离培养的检出率。菌株毒力基因的荧光PCR组合检测可快速获得分离菌株的毒力特征。本次研究中分离自本地区零售生猪肉中的小肠结肠炎耶尔森菌未发现显著遗传聚集性特征。 张彦春 杨波 王苗 冀国强 马红梅 李颖 张茂俊关键词:小肠结肠炎耶尔森菌 脉冲场凝胶电泳 抗生素敏感性 毒力基因 2013-2019年北京市顺义区腹泻病例分离致泻性大肠埃希菌耐药特征分析 被引量:4 2021年 目的对2013—2019年北京市顺义区2家哨点腹泻病例分离的致泻性大肠埃希菌(DEC)进行耐药特征分析。方法收集2013—2019年北京市顺义区2家哨点医院腹泻病例粪便标本,进行DEC分离培养、生化鉴定与分型鉴定,抗菌药敏感性试验使用微量肉汤法,耐药特征分析包括耐药率、非敏感率、多重耐药率和耐药谱分析。结果腹泻病例DEC检出率为9.53%(232/2434)、肠产毒性大肠埃希菌(ETEC)占56.47%(131/232)、肠致病性大肠埃希菌(EPEC)占27.16%(63/232)、肠聚集性大肠埃希菌(EAEC)占16.38%(38/232)。DEC多重耐药率为33.19%(77/232),共有90种耐药谱型;ETEC多重耐药率为17.56%(23/131),共有36种耐药谱型;EPEC多重耐药率为58.73%(37/63),共有42种耐药谱型;EAEC多重耐药率为44.74%(17/38),共有23种耐药谱型。耐药率≥30%的抗菌药ETEC有萘啶酸(NAL)、氨苄西林(AMP),EPEC有AMP、四环素(TET)、复方新诺明(SXT)、磺胺异恶唑(Sul)、NAL,EAEC有NAL、AMP、SXT、Sul、TET。2013—2016年与2017—2019年两个时间组试验抗菌药差异性比较发现:ETEC对AMP、头孢唑啉(CFZ)、TET、头孢吡肟(FEP)、氨曲南(AZM)、氨苄西林/舒巴坦(AMS)耐药水平上升,对Sul耐药水平下降;EPEC对庆大霉素(GEN)耐药水平下降;EAEC对头孢噻肟(CTX)、GEN、多西环素(DOX)耐药水平下降。结论北京市顺义区腹泻病例中,DEC具有较高的流行强度,ETEC、EPEC和EAEC的流行与耐药均具有较为独立的特征,耐药形势依然严峻;值得应引起公共卫生和临床部门的广泛关注。 王园园 林帆 王苗 康颖 李颖 马红梅关键词:致泻性大肠埃希菌 腹泻 耐药率 耐药谱 2018-2022年北京市某区腹泻病例副溶血弧菌流行与分子分型特征 2023年 目的分析2018—2022年北京某平原郊区腹泻病例中副溶血弧菌的流行状况和分子分型特征,为疾病暴发和病原检测提供参考。方法分析由副溶血性弧菌引起的腹泻病例流行病学及临床资料,对病例的分离菌株进行毒力基因检测和脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)分子分型,利用致病菌识别网对PFGE图谱进行聚类分析。结果腹泻病例中副溶血弧菌检出率为6.83%(87/1273),不同年份和年龄组检出率差异有统计学意义(χ^(2)趋势=16.47,χ^(2)=0.005,P<0.01;病例主要临床症状为腹泻(98.85%,86/87)、恶心(87.36%,76/87)、腹痛(68.97%,60/87);分离菌株有11种血清型,构成比前3位为O3∶K6(58.62%,51/87)、O10∶K4(14.94%,13/87)和O4∶KUT(10.34%,9/87),O3∶K6血清型比例随年份下降,O10∶K4血清型比例随年份上升,差异有统计学意义(χ^(2)趋势=22.25、34.95,P<0.01);85株副溶血弧菌携带毒力基因特征为tdh+/trh-,2株为tdh+/trh+;87株菌共有37种PFGE带型,4种血清型(O3:K6、O10:K4、O4:KUT、O6:KUT)中均存在带型一致且检出时间接近的菌株。结论本地区腹泻病例副溶血弧菌流行强度下降,血清型分布多样且优势血清型发生转变,多种血清型可能存在分散暴发,应加强副溶血弧菌相关暴发监测和深度病原学监测。 闫爱霞 张赫 康颖 王园园 王苗 张彦春 张爽 李颖关键词:副溶血弧菌 腹泻 血清型 脉冲场凝胶电泳 顺义区市售双壳贝类中副溶血性弧菌和诺如病毒的耐药性及分型研究 被引量:10 2018年 目的了解北京市顺义区部分市售双壳贝类中副溶血性弧菌及诺如病毒的污染情况,为相关感染性腹泻的防治提供依据。方法 2017年7~10月采集顺义区市场的双壳贝类,取适量样品分离其消化腺,进行样品前处理,提取病毒RNA后采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测诺如病毒。剩余样品按照GB4789.7—2013《食品安全国家标准食品微生物学检验副溶血性弧菌检验》进行副溶血性弧菌的分离鉴定。对检出的副溶血性弧菌进行毒力基因(tlh,tdh,trh)检测、耐药性分析和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型。结果 50份双壳贝类样品中有18份检出副溶血性弧菌(18株),检出率为36.0%;有8份样品携带诺如病毒。分离的副溶血性弧菌17株为tlh+tdh-trh-型,1株为tlh-tdh-trh-型;所有副溶血性弧菌均对氨苄西林耐药,对其他抗生素均敏感;PFGE图谱聚类后呈现多态性,存在多个克隆群。诺如病毒只在10月份检出,分布于牡蛎、蛏子和扇贝中,均为GⅡ型核酸阳性。结论顺义区市售双壳贝类中存在副溶血性弧菌和GⅡ型诺如病毒,需警惕感染风险。分离的副溶血性弧菌呈现多态性,但毒力基因携带率较低,对大多数抗生素敏感。 王园园 李颖 杨杰 王苗关键词:副溶血性弧菌 诺如病毒 贝类 毒力基因 脉冲场凝胶电泳 耐药性 一起诺如病毒感染混合金黄色葡萄球菌肠毒素中毒相关急性胃肠炎暴发事件的实验室检测分析 被引量:3 2020年 目的对一起诺如病毒感染混合金黄色葡萄球菌肠毒素中毒相关急性胃肠炎暴发事件的实验室检测结果进行分析。方法采用实时荧光PCR方法检测6份病例呕吐物中的诺如病毒和8种常见致病菌。从呕吐物样本增菌液中分离培养金黄色葡萄球菌,采用PCR方法检测增菌液的金黄色葡萄球菌肠毒素基因。利用酶联免疫吸附试验检测5株金黄色葡萄球菌分离株的肠毒素、利用PCR方法检测其肠毒素基因并进行spa分型分析。结果共采集到6份呕吐物标本,其中5份诺如病毒阳性,2份金黄色葡萄球菌耐热核酸酶基因nuc阳性。其中5份呕吐物增菌液nuc基因阳性,4份seb基因阳性,1份sea基因阳性。共分离到5株金黄色葡萄球菌,分为3种spa型(t701、t437和t4209)。金黄色葡萄球菌肠毒素的基因PCR检测结果和酶联免疫吸附试验结果存在差别。结论本次急性胃肠炎暴发事件可能由诺如病毒感染混合金黄色葡萄球菌肠毒素中毒共同导致。 甄国新 李颖 冀国强 张爽 王园园 张彦春 王苗 荆红波 马晓晨 张茂俊关键词:急性胃肠炎暴发 诺如病毒 金黄色葡萄球菌肠毒素 实时荧光PCR 北京市顺义区市售生鲜整鸡中弓形杆菌流行状况及耐药特征分析 被引量:1 2022年 目的了解顺义区市售生鲜整鸡中弓形杆菌的污染状况及耐药特征。方法在顺义区农贸市场、超市随机采集零售生鲜整鸡样品60份,应用滤膜法对样品进行弓形杆菌的分离培养,采用基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)及实时荧光定量PCR进行菌株鉴定,并将菌株的质谱图进行聚类分析。采用琼脂稀释法对弓形杆菌分离株进行11种抗生素的耐药性检测。结果60份市售生鲜整鸡样品中弓形杆菌的检出率为26.67%(16/60),且均为布氏弓形杆菌。6月、7月弓形杆菌的检出率明显高于5月。16株弓形杆菌分离株经MALDI-TOF MS聚类,以相对距离1000为节点分为两个簇群,相对距离与菌株相似性呈负相关,聚类图对样品地域来源有一定的提示作用。弓形杆菌分离株对喹诺酮类抗生素耐药严重,对萘啶酸和环丙沙星的耐药率分别为81.25%和43.75%;对庆大霉素(12.50%)、红霉素(12.50%)、阿奇霉素(12.50%)、泰利霉素(12.50%)、链霉素(6.25%)耐药率相对较低。结论顺义区零售生鲜整鸡中弓形杆菌的检出率较高,应警惕因未烧熟煮透和交叉污染导致食源性疾病的风险。 王园园 李颖 杨杰 张彦春 张爽 张赫 王苗 马红梅 张茂俊关键词:耐药 羊粪便中克罗诺菌分离与种鉴定分析 2023年 目的分析散养羊粪便中克罗诺菌的分离与种鉴定,为克罗诺菌相关风险研究奠定基础。方法采集北京市某区农村地区散养羊粪便标本,参考GB 4789.40-2016标准进行克罗诺菌分离培养;对疑似菌株进行全自动生化鉴定、16S RNA全长序列比对分析以及菌株基因组测序。基于基因组序列,进行菌株基于基因组的平均核苷酸一致性(ANI)分析以及多位点序列分型(MLST)分析;对核实鉴定后的克罗诺菌使用肉汤稀释法进行15种抗生素敏感性检测。结果共采集129件羊粪便标本,其中获得26株疑似菌株。不同鉴定方法鉴定结果不完全一致。ANI分析结果显示26株菌中14株菌为克罗诺菌,分别属于4个菌种(阪崎克罗诺菌、丙二酸盐克罗诺菌、苏黎世克罗诺菌、都柏林克罗诺菌),14株克罗诺菌中8株为苏黎世克罗诺菌,样本克罗诺菌的检出率为10.85%(14/129)。1株阪崎克罗诺菌的分型为ST40,2株丙二酸盐克罗诺菌的分型分别为ST7和ST201,3株都柏林克罗诺菌分为2个亚型,其ST型别分别为ST809、ST810和ST666。8株苏黎世克罗诺菌分别为ST25(3株)、ST811、ST813、ST814(2株)和ST815。14株克罗诺菌对检测的抗生素均为敏感。结论本地区散养羊携带阪崎克罗诺菌及其它克罗诺菌菌种病原菌。全自动生化鉴定及基于16Sr RNA序列分析鉴定对于克罗诺菌的鉴定可能存在错误。 李颖 王海瑞 王鹏 康颖 闫爱霞 王园园 李首飞 王苗 王凤双 彭涛 张茂俊关键词:菌种鉴定 基因组测序 分子分型 抗生素敏感性