喻丹丹
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：安徽农业大学安徽省人兽共患病重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸡B-FA分子中结合Ii链功能片段特性的研究
- 2016年
- 目的:研究鸡Ii链结合的B-FA分子的功能片段及其特征。方法:将克隆的B-FA基因片段(α1α2、sα1α2和α3TC)分别插入原核或真核表达质粒,然后分别转染或与Ii共转染工程菌E.coli(BL-21)或293T细胞,经过诱导表达、亲和层析纯化和SDS-PAGE鉴定后,分别用Pull-down法观察B-FA片段与Ii结合与在细胞内的共定位特征。结果:首先,构建了3个重组原核表达质粒和4个重组真核表达质粒。原核表达的B-FA片段经亲和层析纯化可获得单一蛋白分子。其次,用Pulldown从共转染工程菌表达的蛋白分子中分别检测到Ii/B-FA-α1α2和Ii/B-FA-sα1α2,而未能检测到Ii与α3TC的结合物,而免疫印迹结果也表明该两片段是结合Ii链形成复合物的功能片段。最后,在真核表达的293T中,B-FA-α1α2具有同B-FA相同的细胞定位特性。结论:鸡B-FA-α1α2片段是结合Ii的功能片段,并保持了B-FA的细胞定位的作用。本研究结果首次提供了B-FA分子与Ii的互相作用的实验依据。
- 喻丹丹吴琼罗兰芳余为一陈芳芳
- 关键词：复合物
