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单增李斯特菌srtA基因缺失株的构建及srtA基因对其毒力的影响研究被引量：5: 2019年; 为了研究srtA 基因对单增李斯特菌LM90SB2毒力的影响,本研究利用同源重组技术构建了LM90SB2 srtA 基因缺失株LM90SB2-ΔsrtA,比较分析了亲本株LM90SB2与缺失株LM90SB2-ΔsrtA对MBMEC、HBMEC、RAW264.7、SIEC 4种细胞系的粘附、侵袭、胞内增值能力及LM90SB2和LM90SB2-ΔsrtA 感染小鼠后,小鼠的LD50及肝脏、脾脏、脑载菌量变化差异。结果显示,本研究成功构建了srtA 基因缺失株;与亲本株LM90SB2比较,缺失株LM90SB2-ΔsrtA 对RAW264.7和SIEC的粘附率、侵袭率及胞内细菌数量均下降,且差异具有显著统计学意义(p <0.05);小鼠 LD50降低了21.38倍,肝脏、脾脏载菌量降低,差异具有显著统计学意义(p <0.05)。本研究结果表明,srtA 基因对单增李斯特菌LM90SB2的毒力具有关键作用,参与粘附、侵袭BMEC,该研究结果为进一步阐明单增李斯特菌毒力因子的致病机制提供理论依据。; 张奇文凌晨吴学林马勋薄新文; 关键词：单增李斯特菌毒力粘附

单核细胞增生性李斯特菌srtA基因的克隆与原核表达被引量：12: 2015年; 为了探究从新疆发病绵羊中临床分离的单核细胞增多性李斯特菌(简称LM90SB2)srt A基因的特异性及其在原核表达质粒p ET32a中的表达,本研究利用PCR技术扩增LM90SB2的srt A基因,测序后并进行序列比对分析,将其克隆到原核表达质粒p ET32a中构成重组表达质粒p ET32a-srt A。重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导使其表达,SDS-PAGE电泳检测,同时采用Western-blotting对表达产物进行了鉴定。结果表明:Srt A蛋白在BL21(DE3)中大量表达,表达产物经SDS-PAGE电泳和Western-blotting检测分析其为1个分子量为47 ku的融合蛋白,与预期的大小相符合,成功的构建了重组质粒p ET32a-srt A,并使其在BL21(DE3)中获得了高效的表达。本研究为下一步研究其对李斯特菌致病性的影响及制备单克隆抗体奠定了基础。; 吴学林曹树珠马勋; 关键词：单增李斯特菌原核表达

单核细胞增生性李斯特菌srtA基因的克隆与原核表达: 李斯特菌分拣酶A(SrtA)可以影响其表面蛋白的锚定,从而影响李斯特菌的毒力。本研究利用PCR技术扩增临床分离到的4b血清型的李斯特菌野毒株LM90SB2的srt基因,测序并进行序列的比对分析后,将其克隆到原核表达质粒p...; 吴学林马勋; 关键词：李斯特菌原核表达; 文献传递

单核细胞增多性李斯特菌对人、鼠脑微血管内皮细胞黏附、侵袭、增殖差异性分析被引量：4: 2014年; 为探究单核细胞增多性李斯特菌（LM）不同菌株对脑微血管内皮细胞黏附,侵袭以及在细胞内增殖的差异,本实验利用LM90SB2、LM3、LM4,塞氏李斯特菌（L.seeligeri）,无害李斯特菌（L.innocua）感染脑微血管内皮细胞,采用BHI平板计数,测定细菌黏附率、侵袭率及不同时间细胞内增殖情况。结果表明：LM90SB2、LM3、LM4对脑微血管内皮细胞黏附率为3.14%～7.83%,统计学分析其差异不显著;LM90SB2、LM3、LM4对人/鼠脑微血管内皮细胞侵袭率（0.036%～0.128%）均大于L.seeligeri（0.0315%、0.00148%）,L.innocua不侵袭脑微血管内皮细胞。LM90SB2、LM3、LM4对人/鼠2种细胞的侵袭率存在显著差异（P〈0.05）,临床分离株LM90SB2增殖速度、菌量及持续时间明显高于其它菌株。以上结果提示LM不同菌株的毒力不同。; 邓兴梅魏丽马勋蒋建军于佳佳吴学林; 关键词：LM 脑微血管内皮细胞增殖

产后奶牛子宫机能复旧治疗方案的研究被引量：1: 2014年; 为了探讨产后奶牛子宫机能恢复的有效治疗方案,本试验随机选择生殖正常的荷斯坦奶牛,在产后特定时间内注射缩宫素、氯前列烯醇、苯甲酸雌二醇、促黄体释放激素A3,并结合中药制剂和土霉素,直肠检查产后子宫形态,观察产后子宫恶露排放情况以及发情时间,统计受胎率,分析产后奶牛子宫机能的恢复状况。结果显示:试验组(A组)产后奶牛在30和45 d内发情率分别为75%、85%,60 d内的受胎率为55%,极显著高于对照组(B组)。A组中恶露排尽的时间,子宫孕角以及子宫颈恢复的时间要比B组提前,差异极显著(P<0.01);由此得出:以缩宫素、氯前列腺素、苯甲酸雌二醇、促黄体释放激素A3结合中药制剂和土霉素的治疗方案,可有效的加快奶牛产后恶露的排放和子宫机能的恢复,而且可以有效的预防和治疗子宫内膜炎、卵巢囊肿等产后疾病,起到了提高受胎率,缩短产犊间隔的作用。; 王银龙谷新利吴学林刘贤侠伍辉刘强木尔扎提赛务加甫; 关键词：生殖激素奶牛子宫复旧受胎率

中药复方理囊散对奶牛子宫复旧期间生殖激素的影响被引量：1: 2015年; 为探讨中药理囊散对产后奶牛生殖激素的影响,使20头荷斯坦奶牛于产后0、15 d口服中药理囊散,统计受胎率,通过酶联免疫法(ELISA)分析理囊散对产后奶牛血清中促黄体素(LH)、促卵泡素(FSH)、孕酮(P4)、雌二醇(E2)含量的影响。结果显示,试验组(A组)45 d内的受胎率为70%,显著高于对照组(B组)。血清中FSH含量于产后15、30 d达到最大值,LH含量于产后20 d达到最大值,E2含量于产后20、30 d达到最大值,均极显著高于对照组同时期FSH、LH、E2的含量(P<0.01)。P4含量从产后15 d开始上升,于产后20 d达到最大值,极显著高于对照组(P<0.01),并于产后30 d下降,极显著低于对照组(P>0.05)。理囊散能刺激卵巢活动,提高产后奶牛血清中FSH、LH、P4、E2分泌水平,提升早期受胎率,缩短产犊间隔,对产后奶牛子宫机能的恢复具有显著作用。; 王银龙谷新利木尔扎提.阿勒腾别克吴学林伍辉赛务加甫; 关键词：子宫复旧奶牛生殖激素

单核细胞增生性李斯特菌srtA基因的克隆与原核表达: 李斯特菌分拣酶A(SrtA)可以影响其表面蛋白的锚定,从而影响李斯特菌的毒力。本研究利用PCR技术扩增临床分离到的4b血清型的李斯特菌野毒株LM90SB2的srt基因,测序并进行序列的比对分析后,将其克隆到原核表达质粒p...; 吴学林马勋; 关键词：李斯特菌原核表达

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吴学林