高丽丽 作品数:4 被引量:5 H指数:2 供职机构: 南京农业大学动物医学院 更多>> 发文基金: 江苏高校优势学科建设工程资助项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
捻转血矛线虫ES24抗原基因的克隆与表达特性分析 2012年 根据捻转血矛线虫ES24抗原基因序列(U64793.1)设计1对特异性引物,用RT-PCR方法扩增出大小约为670 bp的DNA片段。将该DNA片段克隆到pMD18-T载体后进行序列测定和分析,结果发现该基因与GenBank中已知的捻转血矛线虫24 ku ES抗原基因的相似性达96%~98%。将该基因的开放阅读框插入pET28a(+)载体中,获得原核表达质粒pET28/ES24,并转化大肠杆菌BL21。重组细菌用IPTG诱导,经SDS-PAGE分析,结果表明该基因获得了表达,重组蛋白分子量大小约为25 ku。用实时荧光定量PCR技术对该基因在捻转血矛线虫的虫卵、第3期幼虫、雌虫和雄虫等不同发育阶段、不同性别虫体内的表达情况进行了定量分析,结果显示ES24基因在雄性成虫中表达量最高,雌虫和虫卵其次,在第3期幼虫中表达最低。 牛延萍 高丽丽 宋小凯 徐立新 李祥瑞 严若峰关键词:捻转血矛线虫 排泄分泌抗原 实时荧光定量PCR 高效液相色谱法测定地昔尼尔含量方法的建立 被引量:2 2011年 建立用高效液相色谱法(HPLC)测定地昔尼尔含量的方法。采用Hypersil NH2色谱柱(5μm,250 mm×4.6 mm),流动相:乙腈∶水(0.1%甲酸)为40∶60,紫外检测波长为270 nm,进样量20μL,流速为0.8 mL/m in,柱温30℃。结果显示,地昔尼尔在0.78~100μg/mL范围内,其峰面积与浓度的线性关系良好,回归方程为:A=329 232 C-44 761,R2=0.999 9。日内、日间精密度RSD均小于2%,稳定性试验RSD为0.61%,重复性试验RSD为1.45%,回收率测定结果为100.72%。本法操作简单,结果准确,分析快速,适用于地昔尼尔的含量测定。 高丽丽 刘利锋 季辉 张军忍 江善祥关键词:高效液相色谱法 犬口服国产麻保沙星溶液的生物利用度研究 被引量:2 2010年 本研究旨在考察国产麻保沙星溶液在健康犬体内的药动学特征及生物利用度。选用8只健康犬,按照随机拉丁方设计,进行单次不同单剂量(2.75mg·kg-1)分别静注麻保沙星溶液和口服麻保沙星溶液制剂。血浆样品经乙腈沉淀血浆蛋白,高速离心,用反相高效液相色谱法测定犬血浆中麻保沙星的浓度,3P97药动学计算软件处理血浆药物浓度-时间数据。健康犬静注给药的药物动力学最佳数学模型为无吸收开放二室模型,主要药动学参数为:T1/2α(0.34±0.14)h,T1/2β(7.74±1.70)h,V(1.03±0.60)L·kg-1,CL(0.22±0.08)L·h-1;AUC(14.05±4.25)mg·mL-1·h。口服给药的药物动力学最佳数学模型为一级吸收二室模型。主要药动学参数为:T1/2α((2.82±1.86)h,T1/2β(16.03±9.27)h,V/F(2.25±0.34)L·kg-1,CL/F(0.21±0.05)L·h-1,Tmax(1.55±0.62)h,Cmax(0.89±0.21)μg·mL-1,AUC(13.66±2.77)mg·mL-1·h。肌注麻保沙星冻干粉针的生物利用度为97.22%。麻保沙星在健康犬体内口服的主要药动学特征为吸收较快,达峰时间短,半衰期较长,生物利用度高。 刘利锋 高丽丽 苏凤 江善祥关键词:麻保沙星 生物利用度 地昔尼尔乳剂在猪体内的药动学研究 被引量:2 2011年 为建立高效液相色谱法(HPLC)测定猪血浆中地昔尼尔质量浓度的方法,探讨地昔尼尔乳剂在猪体内的药动学特征,将50g/kg地昔尼尔乳剂以45mg/kg的单剂量为6头健康猪给药(背正中线浇泼),血浆经乙腈提取,采用HPLC测定了血液中地昔尼尔浓度。本试验条件下,地昔尼尔在0.05~20μg/mL内线性良好,r2=0.999,最低检测限为0.01μg/mL;其药时数据符合一级吸收二室模型,主要药动学参数为:t1/2ka=9.836h±0.198h,t1/2α=13.649h±0.124h,t1/2β=20.745h±1.187h,tmax=17.576h±0.216h,Cmax=9.129μg/mL±0.313μg/mL,AUC=450.010μg/mL.h±2.993μg/mL.h。结果表明,该测定方法专属、准确、灵敏,适用于地昔尼尔的药动学研究;地昔尼尔乳剂经皮给药后,在猪体内的吸收、消除速率较慢,达峰浓度高。 吴开宝 高丽丽 季辉 江善祥关键词:药代动力学 HPLC