王建业
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：广州军区广州总医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 白介素-18基因修饰人脑胶质瘤U87/hIL-18细胞的建立被引量：1
- 2009年
- 目的构建人白介素18(hIL-18)基因真核表达载体质粒,建立hIL-18基因修饰并呈稳定表达的人脑胶质瘤U87/hIL-18细胞。方法从人淋巴细胞cDNA文库钓取hIL-18基因后行PCR扩增,利用pcDNA3.1(+)质粒为载体,构建hIL-18真核表达质粒pcDNA3.1/hIL-18。将构建的重组质粒转染人胶质瘤细胞U87,采用G418筛选单克隆细胞株,ELISA检测培养上清中的hIL-18蛋白含量,提取细胞RNA,RT-PCR方法检测hIL-18基因在U87/hIL-18细胞中的表达。结果所得hIL-18cDNA序列与Gene Bank比对一致,构建的质粒经PCR、酶切及测序鉴定正确。质粒转染U87细胞后,经加压筛选获得hIL-18基因稳定、高效表达的U87/hIL-18单克隆细胞株,细胞培养72h的上清中,hIL-18蛋白含量达131.2pg/ml,且RT-PCR结果显示细胞中hIL-18基因表达呈阳性。结论成功构建hIL-18真核表达质粒pcDNA3.1/hIL-18,并建立U87/hIL-18单克隆细胞株,为hIL-18基因修饰的胶质瘤疫苗研究打下了基础。
- 戴学军袁振华林健徐敏敏赵刚王建业王伟民
- 关键词：神经胶质瘤白细胞介素18质粒U87细胞
- 体内可控性基因免疫脑胶质瘤疫苗的实验研究
- 目的研究可调控存活状态的基因修饰活细胞疫苗的构建及其在体内产生的抗胶质瘤免疫效应。方法(1)运用分子克隆技术、基因重组技术和病毒生产包装技术,将自杀基因HSVTK和免疫调节基因IL-12、IL-18转导入9L和U87胶质...
- 王伟民戴学军林健王建业
- 文献传递
- 9L-rIL12-TK大鼠胶质瘤基因免疫疫苗的安全可控性体内实验研究
- 2009年
- 目的评估9L-rIL12-TK脑胶质瘤基因免疫活细胞疫苗在体内的安全可控性。方法将40只裸鼠随机分成3组,分别于右侧腋部皮下接种9L-rIL12-TK细胞(n=14)、9L-TK细胞(n=14)和9L细胞(n=12),7d后将各组裸鼠分成两亚组,实验组(n=8,8,6)给予更昔洛韦(GCV)干预实验,对照组(均n=6)给予生理盐水注射,连续7d;观察裸鼠瘤体生长情况和生存时间,60d后取瘤结节及全身脏器行组织学检查(苏木精-伊红染色)。结果①给予GCV干预后7d,9L-rIL12-TK实验组及9L-TK实验组裸鼠瘤体平均体积较相应对照组及9L组显著性缩小(均P<0.05)。60d时,8只9L-rIL12-TK实验组裸鼠瘤体均完全消退,且均无复发;8只9L-TK实验组裸鼠中,瘤体完全消退3只,瘤体缩小后再次增大5只;余亚组瘤体均呈增大趋势。②GCV干预后,9L-rIL12-TK实验组和9L-TK实验组与相应对照组比较,生存时间明显延长(P<0.05)。③9L-rIL12-TK实验组和9L-TK实验组无瘤裸鼠接种部位无异型性肿瘤细胞,余裸鼠瘤体内均见异型性肿瘤细胞;所有裸鼠相关脏器病理学检查均未见肿瘤远处转移征象。结论9L-rIL12-TK大鼠胶质瘤细胞基因免疫疫苗在裸鼠体内可得到安全有效的控制,使制备免疫原性强且安全有效的胶质瘤基因免疫活细胞疫苗策略成为可能;其基因免疫治疗效应有待进一步研究。
- 王建业戴学军林健王伟民
- 关键词：白细胞介素12胸苷激酶神经胶质瘤更昔洛韦
- 9L-rIL12-TK大鼠胶质瘤基因免疫疫苗的安全可控性实验研究
- 王建业戴学军林健王伟民
